| 摘要 | 第4-7页 |
| ABSTRACT | 第7-10页 |
| 第一章 端粒酶与hTERT基因 | 第13-23页 |
| 1 端粒与端粒酶 | 第13-20页 |
| 1.1 端粒 | 第13-17页 |
| 1.2 端粒酶 | 第17-20页 |
| 2 hTERT基因的研究进展 | 第20-23页 |
| 2.1 hTERT基因与细胞永生化 | 第20-22页 |
| 2.2 hTERT基因在核移植中的应用 | 第22-23页 |
| 第二章 水牛胎儿成纤维细胞培养与hTERT基因转染 | 第23-38页 |
| 摘要 | 第23页 |
| 1 材料和方法 | 第23-31页 |
| 1.1 材料 | 第23-24页 |
| 1.2 主要试剂、设备及耗材 | 第24-25页 |
| 1.3 方法 | 第25-31页 |
| 2 结果与分析 | 第31-36页 |
| 2.1 hTERT基因表达载体的构建及酶切鉴定结果 | 第31-32页 |
| 2.2 hTERT基因的核酸序列测定和比对分析 | 第32-33页 |
| 2.3 水牛胎儿成纤维细胞的原代培养与传代培养 | 第33页 |
| 2.4 水牛胎儿成纤维细胞转染hTERT基因的重组质粒 | 第33-34页 |
| 2.5 阳性水牛胎儿成纤维细胞的筛选 | 第34-35页 |
| 2.6 转hTERT基因阳性水牛胎儿成纤维细胞的鉴定 | 第35-36页 |
| 3 讨论 | 第36-37页 |
| 4 小结 | 第37-38页 |
| 第三章 阳性细胞hTERT基因的表达和生物学特性分析 | 第38-51页 |
| 摘要 | 第38-39页 |
| 1 材料方法 | 第39-43页 |
| 1.1 材料 | 第39页 |
| 1.2 主要仪器 | 第39页 |
| 1.3 主要试剂 | 第39-40页 |
| 1.4 方法 | 第40-43页 |
| 1.5 统计分析 | 第43页 |
| 2 结果 | 第43-49页 |
| 2.1 水牛胎儿成纤维细胞的生长曲线 | 第43-44页 |
| 2.2 阳性水牛胎儿成纤维细胞中hTERT基因的表达差异 | 第44-45页 |
| 2.3 细胞核型分析 | 第45页 |
| 2.4 细胞周期检测 | 第45-46页 |
| 2.5 端粒酶蛋白检测 | 第46页 |
| 2.6 端粒酶活性检测 | 第46-47页 |
| 2.7 软琼脂细胞生长能力检测 | 第47-48页 |
| 2.8 阳性细胞中p53基因的表达水平 | 第48-49页 |
| 3 讨论 | 第49-50页 |
| 4 小结 | 第50-51页 |
| 第四章 转hTERT基因水牛胎儿成纤维细胞的核移植效果 | 第51-58页 |
| 摘要 | 第51页 |
| 1 材料和方法 | 第51-54页 |
| 1.1 材料 | 第51-52页 |
| 1.2 主要仪器 | 第52页 |
| 1.3 主要试剂 | 第52页 |
| 1.4 方法 | 第52-54页 |
| 1.5 统计分析 | 第54页 |
| 2 结果与分析 | 第54-56页 |
| 2.1 转hTERT基因的水牛胎儿成纤维细胞对核移植重构胚发育的影响 | 第54-55页 |
| 2.2 重构胚早期发育相关基因表达的检测 | 第55-56页 |
| 3 讨论 | 第56-57页 |
| 4 小结 | 第57-58页 |
| 全文结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-63页 |
| 附录一 | 第63-71页 |
| 附录二 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第73页 |
