| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 目录 | 第8-10页 |
| 符号说明 | 第10-11页 |
| 第一部分 结直肠癌组织中mRNA表达谱芯片的研究 | 第11-21页 |
| 前言 | 第11-13页 |
| 1 材料与方法 | 第13-16页 |
| 1.1 实验材料 | 第13页 |
| 1.1.1 结直肠癌石蜡组织标本收集 | 第13页 |
| 1.1.2 主要实验试剂 | 第13页 |
| 1.1.3 主要实验试剂盒 | 第13页 |
| 1.1.4 主要实验仪器 | 第13页 |
| 1.1.5 主要实验软件 | 第13页 |
| 1.2 实验方法 | 第13-16页 |
| 1.2.1 样本收集 | 第13-14页 |
| 1.2.2 结肠癌组织石蜡标本RNA提取 | 第14页 |
| 1.2.3 RNA质控 | 第14-15页 |
| 1.2.4 表达谱基因芯片检测 | 第15-16页 |
| 2 结果 | 第16-19页 |
| 2.1 石蜡组织中RNA提取质量检测结果 | 第16-17页 |
| 2.1.1 紫外分光光度计检测石蜡组织中提取RNA的纯度 | 第16页 |
| 2.1.2 毛细管电泳检测RNA完整性 | 第16-17页 |
| 2.2 mRNA芯片扫描分析结果 | 第17-19页 |
| 2.2.1 mRNA芯片扫描 | 第17-18页 |
| 2.2.2 mRNA芯片分析结果 | 第18-19页 |
| 3 讨论 | 第19-20页 |
| 4 小结 | 第20-21页 |
| 第二部分 CREB3基因对结直肠癌转移的影响 | 第21-46页 |
| 前言 | 第21-25页 |
| 1 材料与方法 | 第25-32页 |
| 1.1 实验材料 | 第25-27页 |
| 1.1.1 样本收集 | 第25页 |
| 1.1.2 结直肠癌细胞株 | 第25页 |
| 1.1.3 主要实验抗体 | 第25页 |
| 1.1.4 主要实验仪器 | 第25页 |
| 1.1.5 主要实验试剂 | 第25-26页 |
| 1.1.6 主要实验试剂盒 | 第26页 |
| 1.1.7 实验常用工作液配制 | 第26-27页 |
| 1.2 实验方法 | 第27-31页 |
| 1.2.1 免疫组织化学 | 第27页 |
| 1.2.2 免疫细胞化学 | 第27-28页 |
| 1.2.3 原位杂交技术 | 第28-29页 |
| 1.2.4 细胞培养 | 第29页 |
| 1.2.5 细胞转染 | 第29页 |
| 1.2.6 Real time PCR | 第29-30页 |
| 1.2.7 Traswell体外迁移实验 | 第30-31页 |
| 1.3 免疫组织化学及原位杂交结果评定 | 第31页 |
| 1.4 统计学处理 | 第31-32页 |
| 2 结果 | 第32-43页 |
| 2.1 基因芯片结果验证 | 第32-36页 |
| 2.1.1 原位杂交技术检测结直肠癌组织中CREB3 mRNA水平的表达 | 第32-34页 |
| 2.1.2 免疫组织化学法检测结直肠癌组织中的CREB3蛋白的表达 | 第34-36页 |
| 2.2 检测三株结直肠癌细胞中CREB3的表达水平及细胞的迁移能力 | 第36-39页 |
| 2.2.1 QPCR检测结直肠癌细胞中的CREB3的相对表达量 | 第36-37页 |
| 2.2.2 Transwell小室检测三株结直肠癌细胞的迁移能力 | 第37-38页 |
| 2.2.3 免疫细胞化学技术对结直肠癌细胞中的CREB3进行定位 | 第38-39页 |
| 2.3 CREB3对结直肠癌细胞迁移作用机制的研究 | 第39-43页 |
| 2.3.1 检测结直肠癌细胞中Twistl、β-catenin、MMP9、MMP2的表达 | 第39-41页 |
| 2.3.2 检测干扰CREB3后Twistl、β-catenin、MMP9、MMP2的表达 | 第41-43页 |
| 3 讨论 | 第43-45页 |
| 4 小结 | 第45-46页 |
| 结论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-51页 |
| 综述 | 第51-60页 |
| 参考文献 | 第55-60页 |
| 致谢 | 第60页 |
