发菜响应盐胁迫相关基因的克隆表达与功能鉴定
| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 1 绪论 | 第12-18页 |
| 1.1 发菜概述 | 第12-13页 |
| 1.1.1 发菜简介 | 第12页 |
| 1.1.2 发菜生理特性 | 第12页 |
| 1.1.3 发菜人工培养 | 第12-13页 |
| 1.1.4 发菜分子生物学相关研究 | 第13页 |
| 1.2 盐胁迫概述 | 第13-16页 |
| 1.2.1 盐胁迫简介 | 第13页 |
| 1.2.2 盐胁迫对发菜的影响 | 第13-15页 |
| 1.2.3 发菜响应盐胁迫 | 第15-16页 |
| 1.2.4 发菜抗盐胁迫分子学进展 | 第16页 |
| 1.3 发菜多糖概述 | 第16页 |
| 1.4 课题研究目的及内容 | 第16-18页 |
| 2 对于发菜响应盐胁迫相关基因的克隆和分析 | 第18-62页 |
| 2.1 引言 | 第18页 |
| 2.2 材料与设备 | 第18-20页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第18页 |
| 2.2.2 主要实验试剂 | 第18-19页 |
| 2.2.3 主要实验仪器与设备 | 第19页 |
| 2.2.4 主要试剂溶液的配制 | 第19-20页 |
| 2.3 操作方法 | 第20-24页 |
| 2.3.1 样品藻体的制备 | 第20页 |
| 2.3.2 发菜DNA的提取 | 第20-21页 |
| 2.3.3 引物设计 | 第21页 |
| 2.3.4 PCR扩增 | 第21-22页 |
| 2.3.5 PCR产物回收 | 第22-23页 |
| 2.3.6 连接T载体 | 第23页 |
| 2.3.7 转化DH5α感受态 | 第23页 |
| 2.3.8 质粒抽提与测序 | 第23-24页 |
| 2.3.9 生物信息学分析 | 第24页 |
| 2.4 结果与分析 | 第24-59页 |
| 2.4.1 发菜DNA的提取 | 第24-25页 |
| 2.4.2 PCR扩增 | 第25-27页 |
| 2.4.3 菌液PCR验证 | 第27-32页 |
| 2.4.4 生物信息分析 | 第32-59页 |
| 2.5 本章小结 | 第59-62页 |
| 3 目的基因的克隆与表达 | 第62-77页 |
| 3.1 引言 | 第62页 |
| 3.2 材料与设备 | 第62页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第62页 |
| 3.2.2 实验设备 | 第62页 |
| 3.2.3 配置试剂 | 第62页 |
| 3.3 实验方法 | 第62-64页 |
| 3.3.1 设计引物 | 第62-63页 |
| 3.3.2 PCR扩增 | 第63页 |
| 3.3.3 PCR产物回收 | 第63页 |
| 3.3.4 目的基因与载体连接 | 第63页 |
| 3.3.5 转化DH5α感受态 | 第63页 |
| 3.3.6 转化BL21感受态 | 第63页 |
| 3.3.7 目的基因的诱导表达 | 第63-64页 |
| 3.4 结果与分析 | 第64-75页 |
| 3.4.1 PCR扩增 | 第64-66页 |
| 3.4.2 重组质粒阳性菌的筛选 | 第66-71页 |
| 3.4.3 目的基因的诱导表达 | 第71-75页 |
| 3.5 本章小结 | 第75-77页 |
| 4 表达蛋白的功能验证 | 第77-87页 |
| 4.1 引言 | 第77页 |
| 4.2 材料与设备 | 第77页 |
| 4.3 实验方法 | 第77页 |
| 4.4 结果与分析 | 第77-85页 |
| 4.5 讨论 | 第85-86页 |
| 4.6 本章小结 | 第86-87页 |
| 5 主要结论、本文的创新点对后期的展望 | 第87-90页 |
| 5.1 本课题主要的结论 | 第87-88页 |
| 5.2 本文的创新点 | 第88页 |
| 5.3 对后续的展望 | 第88-90页 |
| 致谢 | 第90-91页 |
| 参考文献 | 第91-97页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第97-98页 |
