摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-10页 |
缩略语表(Abbreviations) | 第11-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-23页 |
1.1 梨树三种潜隐病毒的寄主范围及危害特点 | 第12-14页 |
1.2 三种病毒的分子特性及分子变异特点 | 第14-15页 |
1.3 果树病毒分子检测技术研究进展 | 第15-22页 |
1.3.1 核酸分子杂交技术 | 第16页 |
1.3.2 DNA微阵列技术 | 第16-17页 |
1.3.3 双链RNA(dsRNA)电泳分析 | 第17页 |
1.3.4 聚合酶链式反应(PCR)技术 | 第17-19页 |
1.3.5 环介导等温扩增技术 | 第19-22页 |
1.4 研究目的及意义 | 第22-23页 |
第二章 三种梨潜隐病毒多重RT-PCR检测技术 | 第23-39页 |
2.1 材料与方法 | 第23-28页 |
2.1.1 供试材料 | 第23页 |
2.1.2 主要试剂 | 第23-24页 |
2.1.3 提取总RNA | 第24页 |
2.1.4 引物设计 | 第24-26页 |
2.1.5 RT-PCR扩增 | 第26-27页 |
2.1.6 基因克隆 | 第27-28页 |
2.2 结果与分析 | 第28-36页 |
2.2.1 三种梨病毒多重RT-PCR检测引物筛选 | 第28-29页 |
2.2.2 多重PCR反应条件及体系优化 | 第29-32页 |
2.2.3 多重RT-PCR检测梨病毒效果评价 | 第32-36页 |
2.3 小结与讨论 | 第36-39页 |
第三章 三种梨潜隐病毒巢式-多重RT-PCR检测技术 | 第39-49页 |
3.1 材料与方法 | 第39-42页 |
3.1.1 供试材料 | 第39页 |
3.1.2 主要试剂 | 第39页 |
3.1.3 总RNA的提取 | 第39-40页 |
3.1.4 引物设计 | 第40-41页 |
3.1.5 RT-PCR扩增 | 第41-42页 |
3.2 结果与分析 | 第42-47页 |
3.2.1 巢式-多重RT-PCR两种方法检测梨病毒效果对比 | 第42-43页 |
3.2.2 巢式-多重RT-PCR与多重RT-PCR检测灵敏度对比 | 第43-44页 |
3.2.3 巢式-多重RT-PCR检测三种梨病毒效果评价 | 第44-47页 |
3.3 小结与讨论 | 第47-49页 |
第四章 环介导等温扩增技术检测苹果茎沟病毒 | 第49-58页 |
4.1 材料与方法 | 第49-51页 |
4.1.1 供试材料 | 第49页 |
4.1.2 总RNA的提取 | 第49页 |
4.1.3 引物设计 | 第49-50页 |
4.1.4 RT-PCR扩增 | 第50页 |
4.1.5 RT-LAMP反应体系和反应条件的优化 | 第50页 |
4.1.6 RT-LAMP特异性检测及其产物内切酶鉴定 | 第50页 |
4.1.7 LAMP与常规PCR灵敏度的比较 | 第50-51页 |
4.2 结果与分析 | 第51-56页 |
4.2.1 RT-LAMP扩增ASGV引物筛选 | 第51页 |
4.2.2 RT-LAMP反应条件及体系优化 | 第51-53页 |
4.2.3 RT-LAMP检测效果评价 | 第53-55页 |
4.2.4 RT-LAMP反应产物的观察 | 第55-56页 |
4.3 小结与讨论 | 第56-58页 |
第五章 结论与展望 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-68页 |
附录A 多重R-PCR与单一RT-PCR检测梨和苹果三种病毒结果统计 | 第68-73页 |
附录B 三种方法检测梨样品三种病毒结果统计 | 第73-77页 |
附录C 硕士研究期间发表文章 | 第77-78页 |
致谢 | 第78页 |