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三种梨潜隐病毒RT-PCR和RT-LAMP检测技术研究

摘要第7-9页
ABSTRACT第9-10页
缩略语表(Abbreviations)第11-12页
第一章 文献综述第12-23页
    1.1 梨树三种潜隐病毒的寄主范围及危害特点第12-14页
    1.2 三种病毒的分子特性及分子变异特点第14-15页
    1.3 果树病毒分子检测技术研究进展第15-22页
        1.3.1 核酸分子杂交技术第16页
        1.3.2 DNA微阵列技术第16-17页
        1.3.3 双链RNA(dsRNA)电泳分析第17页
        1.3.4 聚合酶链式反应(PCR)技术第17-19页
        1.3.5 环介导等温扩增技术第19-22页
    1.4 研究目的及意义第22-23页
第二章 三种梨潜隐病毒多重RT-PCR检测技术第23-39页
    2.1 材料与方法第23-28页
        2.1.1 供试材料第23页
        2.1.2 主要试剂第23-24页
        2.1.3 提取总RNA第24页
        2.1.4 引物设计第24-26页
        2.1.5 RT-PCR扩增第26-27页
        2.1.6 基因克隆第27-28页
    2.2 结果与分析第28-36页
        2.2.1 三种梨病毒多重RT-PCR检测引物筛选第28-29页
        2.2.2 多重PCR反应条件及体系优化第29-32页
        2.2.3 多重RT-PCR检测梨病毒效果评价第32-36页
    2.3 小结与讨论第36-39页
第三章 三种梨潜隐病毒巢式-多重RT-PCR检测技术第39-49页
    3.1 材料与方法第39-42页
        3.1.1 供试材料第39页
        3.1.2 主要试剂第39页
        3.1.3 总RNA的提取第39-40页
        3.1.4 引物设计第40-41页
        3.1.5 RT-PCR扩增第41-42页
    3.2 结果与分析第42-47页
        3.2.1 巢式-多重RT-PCR两种方法检测梨病毒效果对比第42-43页
        3.2.2 巢式-多重RT-PCR与多重RT-PCR检测灵敏度对比第43-44页
        3.2.3 巢式-多重RT-PCR检测三种梨病毒效果评价第44-47页
    3.3 小结与讨论第47-49页
第四章 环介导等温扩增技术检测苹果茎沟病毒第49-58页
    4.1 材料与方法第49-51页
        4.1.1 供试材料第49页
        4.1.2 总RNA的提取第49页
        4.1.3 引物设计第49-50页
        4.1.4 RT-PCR扩增第50页
        4.1.5 RT-LAMP反应体系和反应条件的优化第50页
        4.1.6 RT-LAMP特异性检测及其产物内切酶鉴定第50页
        4.1.7 LAMP与常规PCR灵敏度的比较第50-51页
    4.2 结果与分析第51-56页
        4.2.1 RT-LAMP扩增ASGV引物筛选第51页
        4.2.2 RT-LAMP反应条件及体系优化第51-53页
        4.2.3 RT-LAMP检测效果评价第53-55页
        4.2.4 RT-LAMP反应产物的观察第55-56页
    4.3 小结与讨论第56-58页
第五章 结论与展望第58-59页
参考文献第59-68页
附录A 多重R-PCR与单一RT-PCR检测梨和苹果三种病毒结果统计第68-73页
附录B 三种方法检测梨样品三种病毒结果统计第73-77页
附录C 硕士研究期间发表文章第77-78页
致谢第78页

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