| 摘要 | 第7-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 前言 | 第13-17页 |
| 第一部分 小鼠肝纤维化发生发展过程中自噬的变化 | 第17-37页 |
| 1 引言 | 第17页 |
| 2 实验材料 | 第17-19页 |
| 2.1 实验主要试剂 | 第17-18页 |
| 2.2 实验主要仪器 | 第18-19页 |
| 2.3 实验动物 | 第19页 |
| 2.4 统计学方法 | 第19页 |
| 3 技术路线 | 第19-20页 |
| 4 实验方法 | 第20-26页 |
| 4.1 主要溶液的配制 | 第20-21页 |
| 4.2 肝纤维化模型的制备 | 第21-22页 |
| 4.3 肝脏病理组织的染色 | 第22-24页 |
| 4.4 Western-blot检测蛋白的表达 | 第24-26页 |
| 5 实验结果 | 第26-35页 |
| 5.1 小鼠一般情况的观察 | 第26页 |
| 5.2 肝脏指数检测 | 第26-27页 |
| 5.3 肝脏血清中ALT、AST的含量检测 | 第27-28页 |
| 5.4 小鼠肝脏的大体变化 | 第28-29页 |
| 5.5 肝脏HE染色 | 第29-30页 |
| 5.6 肝脏Masson染色 | 第30-31页 |
| 5.7 肝脏天狼星红染色 | 第31-32页 |
| 5.8 自噬中LC3的检测与分析 | 第32-34页 |
| 5.9 自噬底物p62检测与分析 | 第34-35页 |
| 6 实验讨论 | 第35-36页 |
| 7 实验结论 | 第36-37页 |
| 第二部分 自噬在原代M-HSC中对Hedgehog信号通路的影响 | 第37-59页 |
| 1 引言 | 第37页 |
| 2 实验材料 | 第37-39页 |
| 2.1 实验试剂 | 第37-38页 |
| 2.2 实验主要仪器 | 第38页 |
| 2.3 实验细胞 | 第38页 |
| 2.4 统计学方法 | 第38-39页 |
| 3 技术路线 | 第39-40页 |
| 4 实验方法 | 第40-45页 |
| 4.1 实验主要试剂的配制 | 第40-41页 |
| 4.2 原代M-HSC提取 | 第41-42页 |
| 4.3 原代M-HSC的鉴定 | 第42-43页 |
| 4.4 实验分组以及处理 | 第43页 |
| 4.5 Western-blot检测Hedgehog信号通路中Gli1、Gli2蛋白的表达 | 第43页 |
| 4.6 免疫荧光Hedgehog信号通路中Gli1、Gli2蛋白的表达 | 第43页 |
| 4.7 实时荧光定量PCR(Real-timePCR)检测Hedgehog信号通路中Gli1、Gli2mRNA的表达 | 第43-45页 |
| 5 实验结果 | 第45-56页 |
| 5.1 原代M-HSC提取的纯度、活性和静息态、活化态的鉴定 | 第45-48页 |
| 5.2 TGFβ1促进原代M-HSC的活化和自噬发生 | 第48-51页 |
| 5.3 自噬促进了原代M-HSC中Hedgehog信号通路的表达 | 第51-56页 |
| 6 实验讨论 | 第56-58页 |
| 7 实验结论 | 第58-59页 |
| 总结 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-68页 |
| 文献综述 | 第68-78页 |
| 参考文献 | 第74-78页 |
| 附录 | 第78-79页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第79-80页 |
| 致谢 | 第80页 |
