| 摘要 | 第4-8页 |
| ABSTRACT | 第8-14页 |
| 缩略词 | 第15-23页 |
| 第一章 文献综述 | 第23-41页 |
| 1 鱼类免疫系统研究进展 | 第23-34页 |
| 1.1 鱼类免疫器官 | 第23-26页 |
| 1.2 免疫细胞 | 第26-28页 |
| 1.3 免疫分子 | 第28-34页 |
| 2 无乳链球菌研究进展 | 第34-39页 |
| 2.1 病原特性 | 第34-35页 |
| 2.2 分型 | 第35页 |
| 2.3 易感动物 | 第35-36页 |
| 2.4 毒力因子 | 第36-39页 |
| 3 本研究的目的与意义 | 第39-41页 |
| 第二章 罗非鱼脾脏的正常结构研究 | 第41-70页 |
| 1 试验材料 | 第41-43页 |
| 1.1 试验动物 | 第41页 |
| 1.2 主要试剂与溶液配制 | 第41-43页 |
| 1.3 主要仪器 | 第43页 |
| 2 实验方法 | 第43-49页 |
| 2.1 脾脏的解剖结构观察 | 第43-44页 |
| 2.2 脾脏的组织结构观察 | 第44-46页 |
| 2.3 脾脏的超微结构观察 | 第46-47页 |
| 2.4 血脾屏障观察 | 第47-49页 |
| 2.5 结果分析 | 第49页 |
| 3 实验结果 | 第49-57页 |
| 3.1 大体位置 | 第49页 |
| 3.2 脾脏血管观察 | 第49-52页 |
| 3.3 脾脏组织结构观察 | 第52-54页 |
| 3.4 脾脏纤维 | 第54-55页 |
| 3.5 血脾屏障 | 第55-57页 |
| 4 讨论 | 第57-60页 |
| 4.1 罗非鱼脾脏的大体形态 | 第57-58页 |
| 4.2 罗非鱼脾脏微循环 | 第58-59页 |
| 4.3 脾脏的组织结构 | 第59页 |
| 4.4 被膜-小梁系统 | 第59-60页 |
| 4.5 血脾屏障 | 第60页 |
| 5 小结 | 第60-70页 |
| 第三章 无乳链球菌感染后尼罗罗非鱼脾脏的动态病理研究 | 第70-94页 |
| 1 实验材料 | 第70-71页 |
| 1.1 试验菌株 | 第70页 |
| 1.2 试验动物 | 第70页 |
| 1.3 主要试剂 | 第70-71页 |
| 1.4 主要仪器 | 第71页 |
| 1.5 引物设计与合成 | 第71页 |
| 2 实验方法 | 第71-73页 |
| 2.1 GBS的复壮与鉴定 | 第71-72页 |
| 2.2 活菌数-OD_(600)标准曲线绘制 | 第72页 |
| 2.3 菌液准备 | 第72页 |
| 2.4 试验分组 | 第72页 |
| 2.5 罗非鱼攻毒 | 第72页 |
| 2.6 样本采集与指标测定 | 第72-73页 |
| 2.7 病理分期 | 第73页 |
| 2.8 结果分析 | 第73页 |
| 3 实验结果 | 第73-82页 |
| 3.1 GBS复苏与复壮 | 第73-74页 |
| 3.2 GBS标准曲线 | 第74页 |
| 3.3 脾脏大体动态观察 | 第74-76页 |
| 3.4 脾脏组织病理动态观察 | 第76-79页 |
| 3.5 细菌动态分布 | 第79页 |
| 3.6 濒死和幸存鱼脾脏病理观察 | 第79-80页 |
| 3.7 感染评分与病理分期 | 第80-82页 |
| 4 讨论 | 第82-85页 |
| 4.1 GBS对罗非鱼的影响 | 第82-83页 |
| 4.2 GBS对脾体指数的影响 | 第83页 |
| 4.3 GBS对脾脏组织的影响 | 第83-85页 |
| 4.4 GBS在脾脏的分布 | 第85页 |
| 5 小结 | 第85-94页 |
| 第四章 无乳链球菌剂量对尼罗罗非鱼脾脏病理分期的影响 | 第94-109页 |
| 1 实验材料 | 第94页 |
| 1.1 试验菌株 | 第94页 |
| 1.2 试验动物 | 第94页 |
| 1.3 主要试剂 | 第94页 |
| 1.4 主要仪器 | 第94页 |
| 1.5 引物设计与合成 | 第94页 |
| 2 实验方法 | 第94-97页 |
| 2.1 菌液准备 | 第95页 |
| 2.2 试验分组与攻毒 | 第95页 |
| 2.3 样本采集 | 第95页 |
| 2.4 脾脏动态病理学观察 | 第95-96页 |
| 2.5 GBS的动态分布检查 | 第96-97页 |
| 2.6 结果分析 | 第97页 |
| 3 实验结果 | 第97-103页 |
| 3.1 脾脏大体动态观察 | 第97-99页 |
| 3.2 脾脏组织病理动态观察 | 第99-100页 |
| 3.3 GBS定量分析 | 第100-102页 |
| 3.4 感染评分与病理分期 | 第102-103页 |
| 4 讨论 | 第103-104页 |
| 4.1 GBS浓度对罗非鱼的影响 | 第103-104页 |
| 4.2 QPCR定量细菌 | 第104页 |
| 5 小结 | 第104-109页 |
| 第五章 无乳链球菌感染尼罗罗非鱼脾脏的超微病理学观察 | 第109-121页 |
| 1 实验材料 | 第109页 |
| 1.1 组织样本 | 第109页 |
| 1.2 主要试剂 | 第109页 |
| 1.3 主要仪器 | 第109页 |
| 2 实验方法 | 第109-110页 |
| 2.1 透射电镜样本的选择 | 第109-110页 |
| 2.2 扫描电镜样本的选择 | 第110页 |
| 3 实验结果 | 第110-111页 |
| 3.1 透射电镜样本选择 | 第110页 |
| 3.2 透射电镜结果 | 第110-111页 |
| 3.3 扫描电镜结果 | 第111页 |
| 4 讨论 | 第111-113页 |
| 4.1 细胞的异噬 | 第111-112页 |
| 4.2 红细胞的免疫功能 | 第112页 |
| 4.3 GBS荚膜 | 第112-113页 |
| 5 小结 | 第113-121页 |
| 第六章 无乳链球菌感染罗非鱼脾脏的转录组分析 | 第121-157页 |
| 1 试验材料 | 第121-122页 |
| 1.1 试验菌株 | 第121页 |
| 1.2 试验动物 | 第121页 |
| 1.3 主要试剂 | 第121页 |
| 1.4 主要仪器 | 第121页 |
| 1.5 引物设计与合成 | 第121-122页 |
| 2 实验方法 | 第122-126页 |
| 2.1 菌液制备 | 第122页 |
| 2.2 试验分组与攻毒 | 第122页 |
| 2.3 样品采集 | 第122-123页 |
| 2.4 测序样本的选择 | 第123页 |
| 2.5 样品RNA提取 | 第123页 |
| 2.6 RNA质量检测 | 第123-124页 |
| 2.7 cDNA文库构建与转录组测序 | 第124页 |
| 2.8 序列处理 | 第124-125页 |
| 2.9 基因注释 | 第125页 |
| 2.10 质量评估 | 第125页 |
| 2.11 基因表达分析 | 第125-126页 |
| 2.12 荧光定量PCR验证 | 第126页 |
| 3 实验结果 | 第126-149页 |
| 3.1 样本选取 | 第126-129页 |
| 3.2 RNA纯度和完整性鉴定 | 第129-130页 |
| 3.3 RNA-SEQ结果 | 第130-133页 |
| 3.4 样品关系分析 | 第133-134页 |
| 3.5 差异分析 | 第134-149页 |
| 3.6 荧光定量验证 | 第149页 |
| 4 讨论 | 第149-156页 |
| 4.1 RNA-SEQ技术 | 第149-150页 |
| 4.2 RNA-SEQ在罗非鱼疾病中的应用 | 第150-151页 |
| 4.3 GO基因分析 | 第151-152页 |
| 4.4 KEGG信号通路分析 | 第152-153页 |
| 4.5 差异基因分析 | 第153-156页 |
| 5 小结 | 第156-157页 |
| 第七章 无乳链球菌对罗非鱼脾脏免疫功能的影响 | 第157-179页 |
| 1 试验材料 | 第157-159页 |
| 1.1 样本 | 第157页 |
| 1.2 质粒与菌株 | 第157页 |
| 1.3 主要试剂 | 第157-158页 |
| 1.4 主要仪器 | 第158页 |
| 1.5 引物设计 | 第158-159页 |
| 2 实验方法 | 第159-166页 |
| 2.1 抗原模式识别受体分析 | 第159-160页 |
| 2.2 免疫应答系统分析 | 第160-161页 |
| 2.3 SIGM原核表达 | 第161-164页 |
| 2.4 兔抗SIGM多克隆抗体制备 | 第164页 |
| 2.5 IGG的抗体纯化 | 第164页 |
| 2.6 兔抗SIGM -IGG的特性分析 | 第164-165页 |
| 2.7 罗非鱼抗体检测 | 第165-166页 |
| 2.8 免疫荧光 | 第166页 |
| 3 实验结果 | 第166-174页 |
| 3.1 抗原模式识别受体 | 第166-169页 |
| 3.2 免疫应答系统分析 | 第169页 |
| 3.3 IGM克隆、表达、纯化 | 第169-171页 |
| 3.4 兔抗SIGM-IGG制备及抗体效价检测 | 第171页 |
| 3.5 SIGM-IGG抗体特性 | 第171-173页 |
| 3.6 GBS感染后抗体滴度 | 第173-174页 |
| 3.7 脾脏IGM~+细胞定位 | 第174页 |
| 4. 讨论 | 第174-175页 |
| 4.1 抗原模式识别受体 | 第174-175页 |
| 4.2 免疫相关分子 | 第175页 |
| 4.3 IGM分析 | 第175页 |
| 5. 小结 | 第175-179页 |
| 第八章 结论 | 第179-180页 |
| 论文创新点 | 第180-181页 |
| 参考文献 | 第181-206页 |
| 致谢 | 第206-207页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文/书籍/专利 | 第207页 |
