| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第12-21页 |
| 1.1 研究目的与意义 | 第12-13页 |
| 1.2 文献综述 | 第13-20页 |
| 1.2.1 植酸酶的来源 | 第13-14页 |
| 1.2.2 植酸酶的性质 | 第14-17页 |
| 1.2.3 植酸酶的分类 | 第17-18页 |
| 1.2.4 植酸酶的应用 | 第18页 |
| 1.2.5 植酸酶的表达系统研究进展 | 第18-20页 |
| 1.3 本研究的主要研究内容 | 第20-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-31页 |
| 2.1 材料 | 第21-24页 |
| 2.1.1 菌种及载体 | 第21页 |
| 2.1.2 试剂及酶类 | 第21页 |
| 2.1.3 常用试剂的配置 | 第21-24页 |
| 2.1.4 培养基的配制 | 第24页 |
| 2.1.5 主要实验仪器 | 第24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-31页 |
| 2.2.1 黑曲霉基因组DNA的提取 | 第24页 |
| 2.2.2 基因克隆与扩增 | 第24-27页 |
| 2.2.3 根癌农杆菌介导的黑曲霉的遗传转化 | 第27页 |
| 2.2.4 酶活性测定 | 第27-28页 |
| 2.2.5 重组植酸酶菌株的mRNA水平表达鉴定 | 第28-30页 |
| 2.2.6 在线软件分析植酸酶的氨基酸序列及蛋白质特征 | 第30-31页 |
| 3 结果与分析 | 第31-46页 |
| 3.1 黑曲霉phy基因的表达载体的构建 | 第31-35页 |
| 3.1.1 phy基因的扩增结果 | 第31-34页 |
| 3.1.2 黑曲霉表达载体pSZHG-phy的构建 | 第34-35页 |
| 3.2 农杆菌介导的黑曲霉菌丝体遗传转化 | 第35-39页 |
| 3.2.1 表达载体pSZHG-phy导入农杆菌 | 第35-36页 |
| 3.2.2 农杆菌介导黑曲霉菌丝体的转化 | 第36-39页 |
| 3.3 植酸酶在黑曲霉中的表达检测 | 第39-46页 |
| 3.3.1 重组菌株SDS-PAGE检测 | 第39页 |
| 3.3.2 植酸酶标准曲线的绘制 | 第39-40页 |
| 3.3.3 植酸酶酶活测定 | 第40-41页 |
| 3.3.4 在线软件分析植酸酶的氨基酸序列及蛋白质特征结果 | 第41-43页 |
| 3.3.5 植酸酶的RNA提取结果 | 第43-44页 |
| 3.3.6 重组植酸酶的荧光定量PCR结果 | 第44-46页 |
| 4 讨论 | 第46-48页 |
| 4.1 植酸酶phy黑曲霉表达载体的确定 | 第46页 |
| 4.2 农杆菌介导的黑曲霉菌丝体遗传转化的确定 | 第46页 |
| 4.3 植酸酶phy基因在黑曲霉中表达分析结果 | 第46-48页 |
| 5 结论 | 第48-49页 |
| 5.1 植酸酶黑曲霉表达载体的构建 | 第48页 |
| 5.2 植酸酶phy基因在黑曲霉中表达分析结果 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-54页 |
| 附录 | 第54-55页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第55页 |
