摘要 | 第3-6页 |
abstract | 第6-9页 |
第一章 绪论 | 第13-29页 |
1.1 问题的提出与研究意义 | 第13-16页 |
1.2 氧化应激在圆锥角膜发病机制中的作用 | 第16-19页 |
1.3 力学刺激对氧化应激效应的影响 | 第19-24页 |
1.3.1 力学刺激介导的氧化应激对肺组织损伤的影响 | 第19-20页 |
1.3.2 力学刺激介导的氧化应激对心血管疾病的影响 | 第20-21页 |
1.3.3 力学刺激介导的氧化应激在疾病发生发展中的分子生物学机制 | 第21-24页 |
1.4 炎性因子在圆锥角膜发病机制中的作用 | 第24-26页 |
1.5 氧化应激与炎性因子的关系 | 第26-27页 |
1.6 本文的研究目的及内容 | 第27-29页 |
第二章 实验材料及方法 | 第29-43页 |
2.1 实验材料与仪器 | 第29-32页 |
2.1.1 实验试剂与耗材 | 第29-30页 |
2.1.2 实验仪器 | 第30-31页 |
2.1.3 主要溶液的配制 | 第31-32页 |
2.2 实验方法 | 第32-41页 |
2.2.1 人角膜成纤维细胞的原代提取和传代培养 | 第32-34页 |
2.2.2 人角膜成纤维细胞的种板和分组处理 | 第34页 |
2.2.3 细胞内活性氧自由基(ROS)检测 | 第34-35页 |
2.2.4 细胞中总RNA的提取 | 第35页 |
2.2.5 RNA浓度与纯度的鉴定 | 第35-36页 |
2.2.6 反转录合成cDNA第一链 | 第36-37页 |
2.2.7 待测基因引物的设计与合成 | 第37页 |
2.2.8 实时荧光定量PCR技术 | 第37-39页 |
2.2.9 BCA法蛋白质定量检测 | 第39页 |
2.2.10 酶联免疫分析(ELISA)法测定炎性因子含量 | 第39-41页 |
2.3 统计学处理 | 第41页 |
2.4 本章小结 | 第41-43页 |
第三章 力学刺激诱导的氧化应激对角膜成纤维细胞的影响 | 第43-57页 |
3.1 人角膜成纤维细胞ROS水平 | 第43-44页 |
3.2 人角膜成纤维细胞抗氧化酶基因表达水平 | 第44-46页 |
3.3 人角膜成纤维细胞促炎因子表达水平 | 第46-50页 |
3.4 人角膜成纤维细胞基质金属蛋白酶-1表达水平 | 第50-51页 |
3.5 人角膜成纤维细胞基质金属蛋白酶-9表达水平 | 第51-52页 |
3.6 讨论 | 第52-55页 |
3.7 本章小结 | 第55-57页 |
第四章 全文总结 | 第57-61页 |
参考文献 | 第61-69页 |
致谢 | 第69-71页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第71页 |