| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 引言 | 第9页 |
| 1 实验背景介绍 | 第9-15页 |
| 1.1 辽宁绒山羊 | 第9页 |
| 1.2 MP1基因及其研究进展 | 第9-11页 |
| 1.2.1 MAPK信号通路及支架蛋白 | 第9-10页 |
| 1.2.2 MP1基因 | 第10-11页 |
| 1.3 RNA干扰技术 | 第11-12页 |
| 1.3.1 RNA干扰的发现 | 第11-12页 |
| 1.3.2 RNAi的作用机制 | 第12页 |
| 1.3.3 RNAi载体的选择与应用 | 第12页 |
| 1.3.4 RNAi的应用 | 第12页 |
| 1.4 研究的目的及意义 | 第12-13页 |
| 1.5 研究技术路线 | 第13-14页 |
| 1.6 本研究项目的特色与创新 | 第14-15页 |
| 1.6.1 特色 | 第14页 |
| 1.6.2 创新 | 第14-15页 |
| 2 MP1基因在毛囊生长不同时期的表达分析 | 第15-35页 |
| 2.1 实验材料及样本采集 | 第15-16页 |
| 2.1.1 主要实验仪器设备 | 第15页 |
| 2.1.2 主要实验试剂及耗材 | 第15页 |
| 2.1.3 样本的采集 | 第15-16页 |
| 2.2 实验方法 | 第16-22页 |
| 2.2.1 MP1基因全长测通 | 第16页 |
| 2.2.2 生物信息学分析 | 第16-17页 |
| 2.2.3 初、次级毛囊的分离 | 第17页 |
| 2.2.4 初次级毛囊总RNA的提取 | 第17-18页 |
| 2.2.5 总RNA的检测 | 第18页 |
| 2.2.6 RNA反转录成cDNA | 第18-19页 |
| 2.2.7 RT-PCR检测 | 第19-20页 |
| 2.2.8 qPCR检测 | 第20页 |
| 2.2.9 原位杂交 | 第20-22页 |
| 2.3 结果 | 第22-33页 |
| 2.3.1 MP1基因的生物信息学分析 | 第22-30页 |
| 2.3.2 RNA提取 | 第30-31页 |
| 2.3.3 qPCR | 第31-32页 |
| 2.3.4 原位杂交 | 第32-33页 |
| 2.4 讨论 | 第33-35页 |
| 3 慢病毒感染后MP1基因的表达研究 | 第35-43页 |
| 3.1 实验材料 | 第35页 |
| 3.1.1 实验所用细胞及病毒液 | 第35页 |
| 3.1.2 主要试剂、仪器与耗材 | 第35页 |
| 3.2 实验方法 | 第35-38页 |
| 3.2.1 辽宁绒山羊的原代皮肤细胞培养 | 第35页 |
| 3.2.2 Noggin基因干扰慢病毒及阴性病毒感染羊皮肤细胞 | 第35-36页 |
| 3.2.3 提取病毒感染后的细胞中的总RNA | 第36页 |
| 3.2.4 RNA反转录成cDNA | 第36页 |
| 3.2.5 Lenti-EGFP-Noggin-miR慢病毒感染羊皮肤细胞后MP1基因的qPCR检测 | 第36-38页 |
| 3.3 结果 | 第38-41页 |
| 3.3.1 感染病毒前，正常皮肤细胞的镜检照片 | 第38页 |
| 3.3.2 慢病毒感染靶细胞（感染48小时后） | 第38-39页 |
| 3.3.3 RNA抽提电泳图 | 第39-40页 |
| 3.3.4 Lenti- Noggin-EGFP-miR慢病毒感染羊皮肤细胞后MP1基因的qPCR检测 | 第40-41页 |
| 3.4 讨论 | 第41-43页 |
| 4 注意事项 | 第43-44页 |
| 结论 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-49页 |
| 附录A MP1基因的开放阅读框 | 第49-50页 |
| 附录B MP1基因在各个时期初次级毛囊中荧光定量的扩增曲线及溶解曲线 | 第50-53页 |
| 附录C 病毒液感染后qPCR检测的各组扩增曲线及溶解曲线 | 第53-54页 |
| 攻读硕士期间发表论文与获奖情况 | 第54-55页 |
| 致谢 | 第55页 |
