| 摘要 | 第9-11页 |
| ABSTRACT | 第11页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-33页 |
| 1.1 纤维素酶的性质及用途 | 第13-17页 |
| 1.1.1 纤维素酶系的组成 | 第13-14页 |
| 1.1.2 纤维素酶的分子结构 | 第14-15页 |
| 1.1.3 纤维素酶的分子量及分子大小 | 第15页 |
| 1.1.4 纤维素酶的最适反应条件及稳定性 | 第15-17页 |
| 1.1.5 纤维素酶的抑制剂和激活剂 | 第17页 |
| 1.1.6 纤维素酶的应用 | 第17页 |
| 1.2 纤维素酶的生产及发展趋势 | 第17-21页 |
| 1.2.1 生产菌种 | 第17-18页 |
| 1.2.2 产酶工艺 | 第18-19页 |
| 1.2.3 研究现状及发展趋势 | 第19-21页 |
| 1.3 植物纤维原料的酶法水解 | 第21-26页 |
| 1.3.1 纤维原料的化学组成 | 第21-22页 |
| 1.3.2 纤维原料的预处理 | 第22-23页 |
| 1.3.3 天然纤维素与酶作用的关系 | 第23-24页 |
| 1.3.4 纤维素酶的降解机理 | 第24-25页 |
| 1.3.5 影响纤维素酶降解的主要因素 | 第25-26页 |
| 1.4 纤维原料的同步糖化发酵 | 第26-27页 |
| 1.5 乳酸的性质、生产及用途 | 第27-32页 |
| 1.5.1 乳酸的性质 | 第27-28页 |
| 1.5.2 乳酸的生产方法 | 第28-30页 |
| 1.5.3 乳酸的应用 | 第30-32页 |
| 1.6 本文的研究思路 | 第32-33页 |
| 第二章 纤维素酶的生产 | 第33-48页 |
| 2.1 材料与方法 | 第33-39页 |
| 2.1.1 菌种及保藏 | 第33页 |
| 2.1.2 原材料 | 第33-34页 |
| 2.1.3 培养基 | 第34页 |
| 2.1.4 液体深层发酵 | 第34-35页 |
| 2.1.5 酶活力测定 | 第35-36页 |
| 2.1.6 糖含量测定 | 第36-37页 |
| 2.1.7 常用试剂及配制 | 第37-38页 |
| 2.1.8 实验数据分析方法 | 第38-39页 |
| 2.2 结果与讨论 | 第39-47页 |
| 2.2.1 碳源对里氏木霉合成纤维素酶的影响 | 第39-41页 |
| 2.2.1.1 不同碳源的诱导作用 | 第39页 |
| 2.2.1.2 利用纤维纸浆和木糖渣产酶的比较 | 第39-41页 |
| 2.2.1.3 木糖渣浓度对产酶的影响 | 第41页 |
| 2.2.2 氮源的选择 | 第41-42页 |
| 2.2.3 碳氮比对产酶的影响 | 第42页 |
| 2.2.4 2L发酵罐产酶试验 | 第42-44页 |
| 2.2.4.1 搅拌速度对产酶的影响 | 第42页 |
| 2.2.4.2 通气量对产酶的影响 | 第42-44页 |
| 2.2.4.3 里氏木霉在2L发酵罐中的产酶进程 | 第44页 |
| 2.2.5 30m~3发酵罐产酶试验 | 第44-47页 |
| 2.2.5.1 产酶进程 | 第44-45页 |
| 2.2.5.2 里氏木霉纤维素酶系各组分的活力变化 | 第45-47页 |
| 2.3 小结 | 第47-48页 |
| 第三章 纤维二糖酶的生产及固定化 | 第48-62页 |
| 3.1 材料与方法 | 第48-51页 |
| 3.1.1 菌种 | 第48页 |
| 3.1.2 培养基 | 第48-49页 |
| 3.1.3 固态发酵 | 第49页 |
| 3.1.4 纤维二糖酶的固定化 | 第49页 |
| 3.1.5 固定化纤维二糖酶的催化反应 | 第49-50页 |
| 3.1.6 分析测定方法 | 第50-51页 |
| 3.2 结果与讨论 | 第51-61页 |
| 3.2.1 纤维二糖酶生产菌的筛选 | 第51页 |
| 3.2.2 发酵条件的优化 | 第51-56页 |
| 3.2.2.1 菌丝接种与孢子接种的比较 | 第51-52页 |
| 3.2.2.2 培养基含水量 | 第52页 |
| 3.2.2.3 培养温度 | 第52-53页 |
| 3.2.2.4 培养基初始pH值 | 第53-54页 |
| 3.2.2.5 麸皮的用量 | 第54-55页 |
| 3.2.2.6 浅盘发酵生产纤维二糖酶的进程 | 第55页 |
| 3.2.2.7 重复分批发酵试验 | 第55-56页 |
| 3.2.3 纤维二糖酶的固定化 | 第56-57页 |
| 3.2.3.1 孢子中的纤维二糖酶 | 第56-57页 |
| 3.2.3.2 纤维二糖酶的固定化 | 第57页 |
| 3.2.4 固定化纤维二糖酶的性质 | 第57-59页 |
| 3.2.4.1 固定化酶的稳定性 | 第57页 |
| 3.2.4.2 酶的耐热性 | 第57-58页 |
| 3.2.4.3 酶反应的适宜pH值 | 第58-59页 |
| 3.2.4.4 酶反应动力学常数 | 第59页 |
| 3.2.5 固定化纤维二糖酶的催化试验 | 第59-61页 |
| 3.2.5.1 重复分批酶解纤维二糖 | 第59页 |
| 3.2.5.2 连续酶解纤维二糖 | 第59-61页 |
| 3.3 小结 | 第61-62页 |
| 第四章 纤维原料的酶解工程 | 第62-75页 |
| 4.1 材料与方法 | 第62-65页 |
| 4.1.1 纤维原料及预处理 | 第62页 |
| 4.1.2 酶制剂 | 第62页 |
| 4.1.3 纤维原料水解液的制备 | 第62-63页 |
| 4.1.4 批式酶解反应 | 第63页 |
| 4.1.5 协同酶解反应 | 第63-64页 |
| 4.1.6 纤维物料成分测定 | 第64页 |
| 4.1.7 常用试剂及配制 | 第64-65页 |
| 4.2 结果与讨论 | 第65-74页 |
| 4.2.1 酶解工艺参数的优化 | 第65-69页 |
| 4.2.1.1 不同底物对酶解效率的影响 | 第65页 |
| 4.2.1.2 底物浓度 | 第65-66页 |
| 4.2.1.3 酶用量 | 第66-67页 |
| 4.2.1.4 酶解过程中产物的变化趋势 | 第67-68页 |
| 4.2.1.5 酶系组成对纤维原料糖化的影响 | 第68-69页 |
| 4.2.2 固定化纤维二糖酶在纤维原料酶水解中的应用 | 第69-71页 |
| 4.2.2.1 固定化纤维二糖酶对纤维原料水解液的糖化作用 | 第69页 |
| 4.2.2.2 重复分批糖化试验 | 第69页 |
| 4.2.2.3 连续糖化试验 | 第69-71页 |
| 4.2.3 里氏木霉纤维素酶与固定化纤维二糖酶的协同降解作用 | 第71-74页 |
| 4.2.3.1 协同酶解反应进程 | 第71-73页 |
| 4.2.3.2 分批添料式协同酶解试验 | 第73-74页 |
| 4.3 小结 | 第74-75页 |
| 第五章 固定化乳酸杆菌发酵纤维原料水解液 | 第75-85页 |
| 5.1 材料与方法 | 第75-79页 |
| 5.1.1 菌种及保藏 | 第75页 |
| 5.1.2 纤维原料水解液的制备 | 第75页 |
| 5.1.3 麸皮水解液的制备 | 第75页 |
| 5.1.4 培养基 | 第75-76页 |
| 5.1.5 乳酸杆菌的固定化 | 第76页 |
| 5.1.6 固定化乳酸杆菌发酵试验 | 第76-77页 |
| 5.1.7 乳酸测定 | 第77-78页 |
| 5.1.8 常用试剂及配制 | 第78-79页 |
| 5.2 结果与讨论 | 第79-84页 |
| 5.2.1 固定化细胞与游离细胞发酵性能的比较 | 第79页 |
| 5.2.2 固定化细胞发酵纤维原料水解液 | 第79-80页 |
| 5.2.3 温度的影响 | 第80-81页 |
| 5.2.4 氮源的影响 | 第81-82页 |
| 5.2.5 麸皮水解液对乳酸发酵的促进作用 | 第82页 |
| 5.2.6 重复分批发酵试验 | 第82-83页 |
| 5.2.7 连续发酵试验 | 第83-84页 |
| 5.3 小结 | 第84-85页 |
| 第六章 利用串联式生物反应器转化纤维原料生成乳酸 | 第85-94页 |
| 6.1 材料与方法 | 第85-88页 |
| 6.1.1 纤维原料 | 第85页 |
| 6.1.2 二级串联式生物反应器 | 第85-86页 |
| 6.1.3 三级串联式生物反应器 | 第86页 |
| 6.1.4 分批添料式协同酶解发酵 | 第86-88页 |
| 6.2 结果与讨论 | 第88-93页 |
| 6.2.1 纤维原料酶水解与固定化细胞发酵乳酸的耦联效应 | 第88页 |
| 6.2.2 纤维二糖酶在耦联反应过程中的促进作用 | 第88-90页 |
| 6.2.3 利用三级串联式生物反应器协同酶解发酵乳酸 | 第90-91页 |
| 6.2.4 串联式生物反应器的稳定性研究 | 第91页 |
| 6.2.5 分批添料式协同酶解发酵试验 | 第91-93页 |
| 6.3 小结 | 第93-94页 |
| 第七章 利用共固定化体系协同转化纤维原料生成乳酸 | 第94-102页 |
| 7.1 材料与方法 | 第94-96页 |
| 7.1.1 共固定化体系的构建 | 第94页 |
| 7.1.2 共固定化体系转化纤维原料水解液 | 第94页 |
| 7.1.3 利用共固定化体系组建串联式生物反应器 | 第94-95页 |
| 7.1.4 分批添料式协同酶解发酵 | 第95-96页 |
| 7.2 结果与讨论 | 第96-101页 |
| 7.2.1 共固定化体系的构建 | 第96页 |
| 7.2.2 共固定化体系转化纤维原料水解液生成乳酸的进程 | 第96-97页 |
| 7.2.3 串联式生物反应器中的协同酶解发酵 | 第97-98页 |
| 7.2.4 串联式生物反应器的稳定性研究 | 第98-99页 |
| 7.2.5 分批添料式协同酶解发酵乳酸 | 第99-101页 |
| 7.3 小结 | 第101-102页 |
| 第八章 纤维素酶基因的克隆与表达 | 第102-118页 |
| 8.1 材料与方法 | 第102-113页 |
| 8.1.1 质粒与菌株 | 第102页 |
| 8.1.2 培养基 | 第102-104页 |
| 8.1.3 质粒DNA的提取与纯化 | 第104-105页 |
| 8.1.4 DNA片断的凝胶电泳 | 第105-106页 |
| 8.1.5 质粒DNA的酶切 | 第106页 |
| 8.1.6 DNA酶切片段的回收 | 第106-107页 |
| 8.1.7 DNA片段的连接 | 第107-108页 |
| 8.1.8 重组DNA的转化 | 第108页 |
| 8.1.9 PCR扩增法筛选含E_5基因的转化子 | 第108-110页 |
| 8.1.10 含E_5基因转化子的平板筛选 | 第110页 |
| 8.1.11 重组大肠杆菌摇瓶产酶试验 | 第110页 |
| 8.1.12 常用试剂及配制 | 第110-113页 |
| 8.2 结果与讨论 | 第113-117页 |
| 8.2.1 纤维素酶E_5基因的扩增与分离 | 第113页 |
| 8.2.2 E_5基因的体外重组 | 第113页 |
| 8.2.3 重组质粒的转化 | 第113-114页 |
| 8.2.4 重组质粒的筛选和鉴定 | 第114-115页 |
| 8.2.5 纤维素酶E_5基因的表达 | 第115-117页 |
| 8.2.5.1 平板培养试验 | 第115页 |
| 8.2.5.2 摇瓶产酶试验 | 第115-117页 |
| 8.3 小结 | 第117-118页 |
| 第九章 结论 | 第118-120页 |
| 参考文献 | 第120-126页 |
| 附录 | 第126-127页 |
| 致谢 | 第127页 |
