中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
目录 | 第8-10页 |
缩略语 | 第10-12页 |
前言 | 第12-18页 |
研究现状、成果 | 第12-17页 |
研究目的、方法 | 第17-18页 |
一、ATP5B-shRNA表达载体的构建及其干扰作用的验证 | 第18-32页 |
1.1 对象和方法 | 第18-26页 |
1.1.1 材料 | 第18-20页 |
1.1.2 方法 | 第20-26页 |
1.2 结果 | 第26-28页 |
1.2.1 Real-time PCR检测ATP5B在宫颈癌组织和癌旁正常组织中的差异表达 | 第26页 |
1.2.2 pRNAT-U6.2/ATP5B-shRNA载体的构建及鉴定 | 第26-27页 |
1.2.3 Western Blotting检测pRNAT-U6.2/ATP5B-shRNA对ATP5B的干扰效果 | 第27-28页 |
1.3 讨论 | 第28-31页 |
1.3.1 应用Real-time PCR技术检测宫颈癌组织中ATP5B基因表达情况 | 第28-29页 |
1.3.2 RNA干扰机制及其应用 | 第29-31页 |
1.4 小结 | 第31-32页 |
二、ATP5B的沉默对HeLa细胞生物学功能及化疗药物敏感性的影响 | 第32-51页 |
2.1 对象和方法 | 第32-38页 |
2.1.1 材料 | 第32-33页 |
2.1.2 方法 | 第33-38页 |
2.2 结果 | 第38-45页 |
2.2.1 Western Blotting验证单克隆HeLa细胞株中ATP5B的表达水平 | 第38-39页 |
2.2.2 MTT法分析ATP5B的沉默对细胞生长活性的影响 | 第39-40页 |
2.2.3 平板克隆形成和生长曲线实验分析ATP5B的沉默对HeLa细胞生长能力的影响 | 第40-41页 |
2.2.4 细胞划痕实验分析ATP5B的沉默对HeLa细胞运动能力的影响 | 第41-42页 |
2.2.5 Transwell实验分析ATP5B的沉默对HeLa细胞侵袭能力的影响 | 第42-43页 |
2.2.6 细胞聚集实验分析ATP5B的沉默对HeLa细胞黏附能力的影响 | 第43-44页 |
2.2.7 MTT法分析ATP5B的沉默对HeLa细胞化疗药物敏感性的影响 | 第44-45页 |
2.3 讨论 | 第45-50页 |
2.3.1 ATP合成酶与疾病的关系 | 第45-46页 |
2.3.2 ATP5B的沉默抑制HeLa细胞的生长能力 | 第46-48页 |
2.3.3 ATP5B的沉默抑制HeLa细胞的侵袭和运动能力增强黏附能力 | 第48-49页 |
2.3.4 ATP5B的沉默增强HeLa细胞对紫杉醇药物的敏感性 | 第49-50页 |
2.4 小结 | 第50-51页 |
三、ATP5B的沉默影响HeLa细胞生长能力的作用机制 | 第51-56页 |
3.1 对象和方法 | 第51-52页 |
3.1.1 材料 | 第51页 |
3.1.2 方法 | 第51-52页 |
3.2 结果 | 第52-54页 |
3.2.1 流式细胞术检测ATP5B的沉默对HeLa细胞周期的影响 | 第52-53页 |
3.2.2 流式细胞术检测ATP5B的沉默对HeLa细胞凋亡的影响 | 第53-54页 |
3.3 讨论 | 第54-55页 |
3.4 小结 | 第55-56页 |
结论 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-65页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第65-66页 |
综述 | 第66-82页 |
综述参考文献 | 第76-82页 |
致谢 | 第82页 |