| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 缩略语及符号 | 第11-12页 |
| 第一篇 文献综述 | 第12-32页 |
| 1 黏膜抗体在疫苗效力检验中的意义 | 第12-18页 |
| 1.1 简介 | 第12页 |
| 1.2 疫苗免疫效果的评价与免疫监测 | 第12-14页 |
| 1.3 黏膜抗体的功能 | 第14-16页 |
| 1.4 黏膜抗体在疫苗效力评价中的研究 | 第16-18页 |
| 1.5 展望 | 第18页 |
| 2 猪肺炎支原体免疫学研究进展 | 第18-21页 |
| 2.1 P97蛋白 | 第19页 |
| 2.2 P46蛋白 | 第19-20页 |
| 2.3 P36蛋白 | 第20页 |
| 2.4 脂蛋白类P65 | 第20-21页 |
| 2.5 NrdF蛋白 | 第21页 |
| 3 猪支原体肺炎诊断方法研究进展 | 第21-25页 |
| 3.1 基层常用的诊断方法 | 第21-22页 |
| 3.2 实验室常用的诊断方法 | 第22-25页 |
| 参考文献 | 第25-32页 |
| 第二篇 研究内容 | 第32-83页 |
| 第一章 主要包被抗原的表达及免疫原性的鉴定 | 第32-42页 |
| 1 材料与方法 | 第33-36页 |
| 1.1 菌种与血清 | 第33页 |
| 1.2 主要材料与方法 | 第33页 |
| 1.3 主要仪器 | 第33页 |
| 1.4 猪肺炎支原体主要蛋白P97R1、P46、P36的表达和鉴定 | 第33-36页 |
| 2 实验结果 | 第36-41页 |
| 2.1 各蛋白浓度测定结果 | 第36页 |
| 2.2 表达蛋白SDS-PAGE电泳及Western-blotting鉴定结果 | 第36-41页 |
| 参考文献 | 第41-42页 |
| 第二章 SIgA-间接ELISA标准品的制备 | 第42-50页 |
| 1 材料与方法 | 第42-45页 |
| 1.1 实验动物、菌株、肺泡灌洗液 | 第42-43页 |
| 1.2 主要试剂 | 第43页 |
| 1.3 标准阴性支气管肺泡灌洗液样本的制备 | 第43页 |
| 1.4 猪肺炎支原体标准阳性灌洗液的制备 | 第43-44页 |
| 1.5 标准Mhp阴阳性肺泡灌洗液样本的校准 | 第44-45页 |
| 1.6 间接ELISA操作 | 第45页 |
| 2 实验结果 | 第45-48页 |
| 2.1 标准Mhp阴阳性肺泡灌洗液样本的校准结果 | 第45页 |
| 2.2 标准阴性灌洗液样本的制备结果 | 第45-47页 |
| 2.3 标准阳性灌洗液样本的制备结果 | 第47-48页 |
| 2.3.1 Mhp组织强毒毒力实验结果 | 第47页 |
| 2.3.2 阳性BLAF标准品的制备结果 | 第47-48页 |
| 3 讨论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-50页 |
| 第三章 MHP单蛋白特异性IgA-间接ELISA方法及猪IgA双抗夹心ELISA方法的优化及建立 | 第50-67页 |
| 1 材料与方法 | 第51-54页 |
| 1.1 材料 | 第51页 |
| 1.2 方法 | 第51-54页 |
| 1.2.1 MHP单蛋白特异性IgA-间接ELISA的优化及建立 | 第51-53页 |
| 1.2.2 猪呼吸道总IgA双抗夹心ELISA检测方法的优化及建立 | 第53-54页 |
| 2 实验结果 | 第54-64页 |
| 2.1 MHP单蛋白特异性IgA-间接ELISA的优化及建立 | 第54-58页 |
| 2.1.1 样本稀释液中不加相应封闭液时最佳封闭液选择 | 第54-55页 |
| 2.1.2 样本稀释液中加相应封闭液时最佳封闭液选择 | 第55-56页 |
| 2.1.3 1%酪蛋白和1%明胶做为封闭液时,封闭液对不同种类临床样本检测的影响 | 第56-57页 |
| 2.1.4 P97R1、P46、P36单一蛋白包被浓度和一抗稀释度的确定 | 第57-58页 |
| 2.2 猪呼吸道总IgA双抗夹心ELISA检测方法的优化及建立 | 第58-64页 |
| 2.2.1 SIgA标准阴性灌洗液的验证 | 第58-59页 |
| 2.2.2 抗原包被浓度及最佳血清稀释度的确定 | 第59页 |
| 2.2.3 一抗反应时间优化 | 第59-60页 |
| 2.2.4 羊抗猪IgA-HRP最佳稀释度的确定 | 第60页 |
| 2.2.5 羊抗猪IgA-HRP最佳反应时间的确定 | 第60-61页 |
| 2.2.6 双抗夹心ELISA显色时间的确定 | 第61页 |
| 2.2.7 重复性实验 | 第61-62页 |
| 2.2.8 ELISA工作条件的确定 | 第62页 |
| 2.2.9 标准曲线的绘制 | 第62-63页 |
| 2.2.10 鼻试子样本的检测 | 第63-64页 |
| 3 讨论 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-67页 |
| 第四章 MHP感染后特异性IgA抗体分泌规律研究 | 第67-83页 |
| 1 材料与方法 | 第68-70页 |
| 1.1 材料 | 第68页 |
| 1.2 方法 | 第68-70页 |
| 2 鼻试子中特异性SIgA抗体检测结果的校准方法 | 第70-71页 |
| 2.1 鼻试子中总蛋白浓度的测定 | 第70-71页 |
| 2.2 间接ELISA实验检测鼻试子样本中总IgA的量 | 第71页 |
| 2 实验结果 | 第71-79页 |
| 2.1 间接ELISA检测鼻试子中总IgA检测结果 | 第71页 |
| 2.2 鼻试子中总蛋白检测结果 | 第71-72页 |
| 2.3 间接ELISA实验检测鼻试子中特异性SIgA水平结果 | 第72-78页 |
| 2.4 攻毒后猪血清P97R1、P46、P36特异性IgA抗体的变化规律 | 第78-79页 |
| 3 讨论 | 第79-82页 |
| 参考文献 | 第82-83页 |
| 全文总结 | 第83-84页 |
| 致谢 | 第84-86页 |
| 攻读学位期间发表的论文 | 第86页 |
