摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
第一章 文献综述 Sirtuin结构和功能研究进展 | 第13-35页 |
1 几种低等模式生物Sirtuin研究进展 | 第13-14页 |
2 植物Sirtuin蛋白研究进展 | 第14-15页 |
3 哺乳动物Sirtuin蛋白研究进展 | 第15-22页 |
3.1 哺乳动物Sirtuin的结构 | 第15-16页 |
3.2 哺乳动物Sirtuin的酶学特征 | 第16-18页 |
3.3 哺乳动物Sirtuin的亚细胞定位 | 第18-19页 |
3.4 哺乳动物Sirtuin蛋白的功能 | 第19-22页 |
4 SIRT4的结构与功能研究进展 | 第22-26页 |
4.1 SIRT4的亚细胞定位 | 第22页 |
4.2 SIRT4的酶学特征 | 第22-23页 |
4.3 SIRT4的功能 | 第23-26页 |
5 SIRT6的结构与功能研究进展 | 第26-32页 |
5.1 SIRT6的亚细胞定位与分布 | 第26页 |
5.2 SIRT6的酶学特征和分子结构 | 第26-27页 |
5.3 SIRT6的功能 | 第27-32页 |
6 哺乳动物SIRT1-7的结构和功能总结 | 第32-33页 |
7 存在的问题和展望 | 第33-35页 |
第二章 材料与方法 | 第35-51页 |
1 实验材料 | 第35页 |
2 试剂与仪器 | 第35-36页 |
3 实验方法 | 第36-51页 |
3.1 系统进化分析 | 第36-37页 |
3.2 CTAB法提取植物基因组DNA | 第37页 |
3.3 大肠杆菌化学转化感受态细胞制备 | 第37页 |
3.4 大肠杆菌化学转化方法 | 第37-38页 |
3.5 碱裂解法提取质粒DNA | 第38页 |
3.6 农杆菌电转化感受态细胞的制备及电转化 | 第38-39页 |
3.7 基于Gateway技术的启动子表达载体的构建 | 第39-45页 |
3.8 转基因和筛选 | 第45-46页 |
3.9 种子萌发和表型观察 | 第46页 |
3.10 基因表达分析 | 第46-48页 |
3.11 同工酶实验 | 第48-49页 |
3.12 在原核生物中过量表达目的蛋白 | 第49页 |
3.13 双分子荧光互补(BiFC)表达载体构建 | 第49-50页 |
3.14 DNA双链断裂(DSB)修复方式报告载体的建立 | 第50-51页 |
第三章 拟南芥AtSIRT1基因的初步研究 | 第51-65页 |
1、AtSIRT1系统进化分析 | 第51-52页 |
2、AtSIRT1蛋白的亚细胞定位 | 第52-55页 |
3、AtSIRT1的表达模型 | 第55-56页 |
4、AtSIRT1突变体的检出 | 第56-57页 |
5、AtSIRT1突变体表型 | 第57-59页 |
6、AtSIRT1基因的过量表达 | 第59-62页 |
7、AtSIRT1和谷氨酸脱氢酶(GDH)的关系 | 第62-65页 |
第四章 拟南芥AtSIRT2因的初步研究 | 第65-74页 |
1、AtSIRT2系统进化分析 | 第65-66页 |
2、AtSIRT2蛋白的亚细胞定位 | 第66页 |
3、T-DNA突变体未检出 | 第66-68页 |
4、AtSIRT2蛋白的原核表达及其功能分析 | 第68-69页 |
5、AtSIRT2互作蛋白的分析 | 第69-74页 |
第五章 讨论 | 第74-85页 |
1 拟南芥AtSIRT1的亚细胞定位及功能分析 | 第75-79页 |
1.1 系统进化分析 | 第75页 |
1.2 AtSIRT1蛋白定位与表达模型 | 第75-76页 |
1.3 T-DNA突变体和过量表达表型 | 第76-78页 |
1.4 拟南芥AtSIRT1与人hSIRT4 | 第78-79页 |
2 拟南芥AtSIRT2的亚细胞定位及功能分析 | 第79-84页 |
2.1 系统进化分析 | 第80页 |
2.2 AtSIRT2蛋白定位 | 第80页 |
2.3 T-DNA突变体未检出 | 第80-81页 |
2.4 BiFC载体构建及AtSIRT2与相关蛋白的互作 | 第81-82页 |
2.5 AtSIRT2与DNA双链断裂修复 | 第82-83页 |
2.6 拟南芥AtSIRT2与人hSIRT6 | 第83-84页 |
3 小结与展望 | 第84-85页 |
参考文献 | 第85-98页 |
致谢 | 第98-99页 |
在学期间所取得的科研成果 | 第99-100页 |
附录:缩略词—中英文对照 | 第100页 |