| 摘要 | 第9-12页 |
| Abstract | 第12-14页 |
| 第一部分 幽门螺杆菌疫苗的研究进展 | 第15-42页 |
| 1 幽门螺杆菌的病理损伤机制 | 第15-21页 |
| 1.1 幽门螺杆菌的生物学特性 | 第15-16页 |
| 1.2 幽门螺杆菌的感染途径 | 第16-17页 |
| 1.3 幽门螺杆菌的毒力基因 | 第17-21页 |
| 1.3.1 幽门螺杆菌尿素酶(urease) | 第18页 |
| 1.3.2 细胞毒素相关抗原(CagA) | 第18-19页 |
| 1.3.3 空泡毒素基因(VacA) | 第19-20页 |
| 1.3.4 iceA基因 | 第20-21页 |
| 2 幽门螺杆菌的治疗 | 第21-24页 |
| 2.1 幽门螺杆菌的化学药物治疗 | 第21-22页 |
| 2.2 免疫抗体治疗幽门螺杆菌 | 第22-24页 |
| 2.3 影响幽门螺杆菌治疗的因素 | 第24页 |
| 3 幽门螺杆菌感染动物模型 | 第24-30页 |
| 3.1 H. pylori类似菌的自然感染情况 | 第24-25页 |
| 3.2 H. pylori感染的动物模型 | 第25-28页 |
| 3.3 动物模型的应用 | 第28-30页 |
| 3.3.1 动物模型在抗H. pylori治疗方法和疗效研究进展 | 第28-29页 |
| 3.3.2 动物模型在研究H. pylori致病机理方面的应用 | 第29-30页 |
| 3.3.3 动物模型在研究H. pylori疫苗中的应用 | 第30页 |
| 4 幽门螺杆菌疫苗免疫机制及其研究进展 | 第30-40页 |
| 4.1 幽门螺杆菌自然感染的免疫反应 | 第31-32页 |
| 4.2 幽门螺杆菌疫苗类型的研究进展 | 第32-39页 |
| 4.2.1 全菌蛋白疫苗 | 第32-33页 |
| 4.2.2 基因工程疫苗 | 第33-37页 |
| 4.2.3 载体疫苗 | 第37-39页 |
| 4.3 国内外幽门螺杆菌疫苗研究的现状 | 第39-40页 |
| 5 研究目的和意义 | 第40-42页 |
| 5.1 本研究的目的 | 第40-41页 |
| 5.2 本研究的意义 | 第41-42页 |
| 第二部分 实验研究 | 第42-89页 |
| 实验研究一 幽门螺杆菌全菌蛋白疫苗免疫奶牛 | 第42-49页 |
| 引言 | 第42-43页 |
| 1 材料与方法 | 第43-44页 |
| 1.1 材料 | 第43页 |
| 1.1.1 菌株 | 第43页 |
| 1.1.2 试剂 | 第43页 |
| 1.1.3 试验动物 | 第43页 |
| 1.2 方法 | 第43-44页 |
| 1.2.1 疫苗准备 | 第43页 |
| 1.2.2 免疫、采样 | 第43-44页 |
| 1.2.3 血清/乳汁中IgG检测 | 第44页 |
| 2 数据分析 | 第44-45页 |
| 3 结果与分析 | 第45-46页 |
| 3.1 奶牛的血清中和牛奶中幽门螺杆菌抗体的动态变化规律 | 第45页 |
| 3.2 免疫后奶牛身体状况 | 第45-46页 |
| 4 讨论 | 第46-49页 |
| 4.1 疫苗的免疫途径 | 第46-47页 |
| 4.2 免疫乳的应用 | 第47-49页 |
| 实验研究二 幽门螺杆菌UreB/CagA双价口服减毒沙门氏菌活载体疫苗的构建 | 第49-65页 |
| 引言 | 第49-50页 |
| 1 材料与方法 | 第50-56页 |
| 1.1 材料 | 第50页 |
| 1.1.1 菌株与质粒 | 第50页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第50页 |
| 1.1.3 主要仪器 | 第50页 |
| 1.1.4 主要培养基 | 第50页 |
| 1.2 方法 | 第50-56页 |
| 1.2.1 幽门螺杆菌的培养 | 第50-51页 |
| 1.2.2 感受态细菌的制备 | 第51-52页 |
| 1.2.3 引物设计及PCR反应体系 | 第52页 |
| 1.2.4 目的基因CagA和UreB分别与T载体(pMD-18T)的连接、转化 | 第52-53页 |
| 1.2.5 转化的质粒提取鉴定 | 第53页 |
| 1.2.6 pYA3493质粒提取,酶切 | 第53-54页 |
| 1.2.7 表达Hp-UreB和Hp-CagA的重组减毒猪霍乱沙门菌疫苗的建立 | 第54-55页 |
| 1.2.8 重组蛋白的表达及鉴定 | 第55-56页 |
| 2 结果与分析 | 第56-61页 |
| 2.1 Hp-UreB和Hp-CagA基因片段的扩增 | 第56-58页 |
| 2.2 酶切鉴定和和PCR鉴定 | 第58-60页 |
| 2.3 重组蛋白的表达及鉴定 | 第60-61页 |
| 3 讨论 | 第61-65页 |
| 3.1 基因的选择 | 第61-62页 |
| 3.2 口服疫苗载体的选择 | 第62-65页 |
| 实验研究三 幽门螺杆菌CagA/UreB沙门氏菌活载体疫苗免疫小鼠的研究 | 第65-74页 |
| 1 材料和方法 | 第65-68页 |
| 1.1 材料 | 第65-66页 |
| 1.1.1 实验动物 | 第65页 |
| 1.1.2 菌株 | 第65页 |
| 1.1.3 主要试剂 | 第65-66页 |
| 1.1.4 主要仪器 | 第66页 |
| 1.1.5 各种培养基 | 第66页 |
| 1.2 方法 | 第66-68页 |
| 1.2.1 疫苗准备 | 第66页 |
| 1.2.2 免疫、采样 | 第66-67页 |
| 1.2.3 幽门螺杆菌特异抗体IgG检测(ELISA) | 第67-68页 |
| 1.2.4 组织切片和免疫组化 | 第68页 |
| 2 数据分析 | 第68页 |
| 3 结果与分析 | 第68-72页 |
| 3.1 血清中抗体分析 | 第68-69页 |
| 3.2 组织切片和免疫组化 | 第69-71页 |
| 3.3 不同组织中幽门螺杆菌SS1菌落数 | 第71-72页 |
| 4 讨论 | 第72-74页 |
| 实验四 幽门螺杆菌CagA/UreB真核荧光载体的构建及胃黏膜上皮细胞GES-1转染的研究 | 第74-89页 |
| 引言 | 第74页 |
| 1 材料与方法 | 第74-80页 |
| 1.1 材料 | 第74-75页 |
| 1.1.1 菌株与质粒 | 第74页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第74-75页 |
| 1.1.3 主要仪器 | 第75页 |
| 1.1.4 各种培养基 | 第75页 |
| 1.2 方法 | 第75-80页 |
| 1.2.1 幽门螺杆菌的培养 | 第75页 |
| 1.2.2 引物设计及PCR反应体系 | 第75-76页 |
| 1.2.3 目的基因CagA和UreB分别与T载体(pMD-18T)的连接、转化 | 第76页 |
| 1.2.4 转化的质粒提取鉴定 | 第76-77页 |
| 1.2.5 质粒pEGFP-N1提取、酶切 | 第77页 |
| 1.2.6 表达Hp-UreB和Hp-CagA的重组质粒的构建 | 第77-78页 |
| 1.2.7 质粒大量提取 | 第78-79页 |
| 1.2.8 提纯质粒转染GES-1细胞 | 第79页 |
| 1.2.9 细胞凋亡的检测 | 第79页 |
| 1.2.10 电镜观察 | 第79-80页 |
| 2 数据分析 | 第80页 |
| 3 结果与分析 | 第80-86页 |
| 3.1 Hp-UreB和Hp-CagA基因片段的扩增 | 第80-81页 |
| 3.2 UreB与pEGFP-N1连接以及酶切结果 | 第81页 |
| 3.3 细胞转染 | 第81-82页 |
| 3.4 细胞凋亡的检测 | 第82-84页 |
| 3.5 透射电镜观察 | 第84-86页 |
| 4 讨论 | 第86-89页 |
| 第三部分 参考文献 | 第89-108页 |
| 第四部分 全文结论和创新点 | 第108-110页 |
| 结论 | 第108-109页 |
| 创新点 | 第109-110页 |
| 附录Ⅰ 在读期间发表的学术论文 | 第110页 |
| 附录II 参加的学术活动 | 第110-111页 |
| 致谢 | 第111页 |
