| 摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 缩略词 | 第9-10页 |
| 文献综述 | 第10-26页 |
| 1 苜蓿属植物组织培养研究进展 | 第10-14页 |
| 1.1 蒺藜苜蓿再生体系构建方法 | 第10-12页 |
| 1.2 影响苜蓿组织培养的因素 | 第12-14页 |
| 2 苜蓿属植物基因工程研究进展 | 第14-18页 |
| 2.1 苜蓿遗传转化方法 | 第14-16页 |
| 2.2 转基因苜蓿研究进展 | 第16-18页 |
| 3 microRNA的概述 | 第18-22页 |
| 3.1 植物中miRNA的合成 | 第18-19页 |
| 3.2 microRNAs作用靶基因的机制 | 第19-20页 |
| 3.3 植物中microRNA的生物学功能 | 第20-22页 |
| 4 植物蛋白酶抑制剂基因研究 | 第22-25页 |
| 4.1 蛋白酶抑制剂作用机理 | 第22-23页 |
| 4.2 植物中与PI相关的信号通路 | 第23-25页 |
| 5 研究目的和内容 | 第25-26页 |
| 第一章 蒺藜苜蓿离体再生及转化体系的建立 | 第26-40页 |
| 1 材料与方法 | 第26-30页 |
| 1.1 材料 | 第26-28页 |
| 1.2 方法 | 第28-30页 |
| 2 结果与分析 | 第30-36页 |
| 2.1 蒺藜苜蓿再生体系的建立 | 第30-33页 |
| 2.2 蒺藜苜蓿遗传转化体系的优化 | 第33-36页 |
| 3 讨论 | 第36-40页 |
| 3.1 蒺藜苜蓿体外再生的激素效应 | 第36-37页 |
| 3.2 蒺藜苜蓿遗传转化中抗生素选择 | 第37-38页 |
| 3.3 蒺藜苜蓿遗传转化共培时间的选择 | 第38-40页 |
| 第二章 蒺藜苜蓿MiR1509及其靶基因Mt2g021690的过表达载体构建及转化 | 第40-56页 |
| 1 材料与方法 | 第40-50页 |
| 1.1 实验材料 | 第40-43页 |
| 1.2 方法 | 第43-50页 |
| 2 结果与讨论 | 第50-56页 |
| 2.1 蒺藜苜蓿miR1509及Mt2g021690的扩增 | 第50-51页 |
| 2.2 质粒DNA的提取及酶切鉴定 | 第51-52页 |
| 2.3 目的基因连入表达载体的鉴定 | 第52页 |
| 2.4 目的基因连入农杆菌的鉴定 | 第52-53页 |
| 2.5 根癌农杆菌介导的蒺藜苜蓿遗传转化 | 第53页 |
| 2.6 转基因愈伤的检测 | 第53-56页 |
| 第三章 过表达Mt2g021690基因转化拟南芥及转基因植株初步分析 | 第56-64页 |
| 1 材料与方法 | 第56-59页 |
| 1.1 实验材料 | 第56-57页 |
| 1.2 实验方法 | 第57-59页 |
| 2 结果与分析 | 第59-64页 |
| 2.1 DNA水平上的转基因植株的检测 | 第59-60页 |
| 2.2 Mt2g021690过表达转化拟南芥T3代纯合体获得 | 第60页 |
| 2.3 RNA水平检测--实时荧光定量RT-PCR | 第60-61页 |
| 2.4 RT-PCR检测MeJA处理后COI1的表达 | 第61-64页 |
| 全文总结 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-76页 |
| 致谢 | 第76页 |
