| 中文摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 目录 | 第10-16页 |
| 縮略语/符号说明 | 第16-20页 |
| 前言 | 第20-23页 |
| 研究现状、成果 | 第20-21页 |
| 研究目的、方法 | 第21-23页 |
| 一、高盐负荷诱导的SHR心脏淋巴管增生性反应动态变化 | 第23-79页 |
| 1.1 对象和方法 | 第23-52页 |
| 1.1.1 实验动物 | 第23页 |
| 1.1.2 动物分组及技术路线 | 第23-24页 |
| 1.1.3 大鼠无创血压的测定 | 第24-25页 |
| 1.1.3.1 主要仪器 | 第24页 |
| 1.1.3.2 实验步骤 | 第24-25页 |
| 1.1.4 大鼠有创血流动力学的测定 | 第25页 |
| 1.1.4.1 主要仪器 | 第25页 |
| 1.1.4.2 主要试剂 | 第25页 |
| 1.1.4.3 实验步骤 | 第25页 |
| 1.1.5 动物组织的取材及处理 | 第25-28页 |
| 1.1.5.1 主要仪器 | 第25-26页 |
| 1.1.5.2 主要试剂 | 第26页 |
| 1.1.5.3 动物取材 | 第26页 |
| 1.1.5.4 心肌组织的固定、脱水与浸蜡 | 第26-27页 |
| 1.1.5.5 石蜡包埋 | 第27页 |
| 1.1.5.6 载玻片的处理 | 第27页 |
| 1.1.5.7 切片 | 第27-28页 |
| 1.1.6 SHR心肌组织中相关基因的mRNA表达水平检测 | 第28-36页 |
| 1.1.6.0 主要仪器及耗材 | 第28页 |
| 1.1.6.1 主要试剂 | 第28-29页 |
| 1.1.6.2 TRIzol法提取SHR心肌组织的总RNA | 第29-30页 |
| 1.1.6.3 RNA的定量及变性电泳 | 第30-32页 |
| 1.1.6.4 两步法反转录合成cDNA第一链 | 第32-33页 |
| 1.1.6.5 SHR心肌组织中相关基因的mRNA表达水平检测 | 第33-36页 |
| 1.1.7 SHR心肌组织中相关蛋白的表达水平检测 | 第36-43页 |
| 1.1.7.1 主要仪器及耗材 | 第36页 |
| 1.1.7.2 主要试剂 | 第36-38页 |
| 1.1.7.3 大鼠心肌组织蛋白的提取 | 第38-39页 |
| 1.1.7.4 应用BCA法测定SHR心肌组织蛋白的浓度 | 第39-40页 |
| 1.1.7.5 Western blot操作步骤 | 第40-42页 |
| 1.1.7.6 Western结果的分析 | 第42-43页 |
| 1.1.8 组织病理学实验 | 第43-52页 |
| 1.1.8.1 主要仪器及耗材 | 第43页 |
| 1.1.8.2 主要试剂 | 第43-46页 |
| 1.1.8.3 HE染色 | 第46页 |
| 1.1.8.4 PSR染色 | 第46-47页 |
| 1.1.8.5 WGA染色 | 第47页 |
| 1.1.8.6 CD68免疫荧光染色 | 第47-48页 |
| 1.1.8.7 vWF免疫组化染色 | 第48-49页 |
| 1.1.8.8 Podoplanin免疫组化染色 | 第49-50页 |
| 1.1.8.9 TonEBP免疫组化染色 | 第50-51页 |
| 1.1.8.10 病理图像分析 | 第51-52页 |
| 1.1.9 统计学分析 | 第52页 |
| 1.2 结果 | 第52-72页 |
| 1.2.1 SHR高盐干预不同时间的血压及基本资料的变化 | 第52-55页 |
| 1.2.2 不同时间点各组大鼠心脏功能的变化 | 第55页 |
| 1.2.3 高盐摄入对淋巴管内皮细胞标志物相关基因、TonEBP、VEGF-C及炎症因子mRNA表达水平的影响 | 第55-62页 |
| 1.2.4 高盐摄入对VEGF-C、TonEBP及Prox-1蛋白表达水平的影响 | 第62-65页 |
| 1.2.5 高盐摄入对SHR心肌组织形态学及纤维化程度的影响 | 第65-71页 |
| 1.2.6 高盐摄入对SHR心肌组织MPS细胞浸润、血管和淋巴管增生及TonEBP表达水平的影响 | 第71-72页 |
| 1.3 讨论 | 第72-78页 |
| 1.3.1 高盐摄入与盐敏感性高血压 | 第72-74页 |
| 1.3.2 高盐摄入与心肌纤维化 | 第74-75页 |
| 1.3.3 高盐摄入与左心室肥大 | 第75-77页 |
| 1.3.4 高盐摄入与心肌组织MPS细胞的浸润及血管、淋巴管的增生 | 第77-78页 |
| 1.4 小结 | 第78-79页 |
| 二、逆转录病毒载体的构建及表达 | 第79-109页 |
| 2.1 对象和方法 | 第79-99页 |
| 2.1.1 质粒、菌株及细胞株 | 第79-80页 |
| 2.1.2 实验动物 | 第80页 |
| 2.1.3 实验方法及技术路线 | 第80页 |
| 2.1.4 质粒转化感受态大肠杆菌DH5α | 第80-84页 |
| 2.1.4.1 主要仪器及耗材 | 第80-82页 |
| 2.1.4.2 主要试剂 | 第82-83页 |
| 2.1.4.3 实验步骤 | 第83-84页 |
| 2.1.5 转化菌落的PCR鉴定 | 第84-85页 |
| 2.1.6 摇菌及质粒抽提 | 第85-86页 |
| 2.1.6.1 主要仪器 | 第85页 |
| 2.1.6.2 主要试剂 | 第85-86页 |
| 2.1.6.3 实验步骤 | 第86页 |
| 2.1.7 pLPCX-VRg的双酶切及目的条带线性pLPCX的回收 | 第86-87页 |
| 2.1.7.1 主要仪器 | 第86页 |
| 2.1.7.2 主要试剂 | 第86页 |
| 2.1.7.3 实验步骤 | 第86-87页 |
| 2.1.8 pLPCX对照质粒的构建及鉴定 | 第87-88页 |
| 2.1.8.1 主要仪器 | 第87-88页 |
| 2.1.8.2 主要试剂 | 第88页 |
| 2.1.8.3 实验步骤 | 第88页 |
| 2.1.9 pLPCX-VC质粒的构建及鉴定 | 第88-90页 |
| 2.1.9.1 主要仪器 | 第88-89页 |
| 2.1.9.2 主要试剂 | 第89页 |
| 2.1.9.3 实验步骤 | 第89-90页 |
| 2.1.10 逆转录病毒的包装、鉴定 | 第90-93页 |
| 2.1.10.1 主要仪器 | 第90-91页 |
| 2.1.10.2 主要试剂 | 第91-92页 |
| 2.1.10.3 质粒转染PT67细胞 | 第92页 |
| 2.1.10.4 逆转录病毒的鉴定 | 第92-93页 |
| 2.1.11 逆转录病毒的纯化浓缩及滴度测定 | 第93-95页 |
| 2.1.11.1 主要仪器及耗材 | 第93页 |
| 2.1.11.2 主要试剂 | 第93-94页 |
| 2.1.11.3 逆转录病毒上清的纯化浓缩 | 第94-95页 |
| 2.1.11.4 逆转录病毒上清的滴度测定 | 第95页 |
| 2.1.12 逆转录病毒在RAW264.7细胞的表达 | 第95-97页 |
| 2.1.12.1 主要仪器 | 第95-96页 |
| 2.1.12.2 主要试剂 | 第96页 |
| 2.1.12.3 重组逆转录病毒转染RAW264.7细胞 | 第96页 |
| 2.1.12.4 RAW264.7细胞蛋白的提取及Western blot检测 | 第96-97页 |
| 2.1.13 逆转录病毒在大鼠体内的表达 | 第97-98页 |
| 2.1.14 统计学分析 | 第98-99页 |
| 2.2 结果 | 第99-105页 |
| 2.2.1 pLPCX-VRg质粒的鉴定 | 第99页 |
| 2.2.2 pLPCX对照质粒的鉴定 | 第99-100页 |
| 2.2.3 pSecTag-VC质粒的hot start PCR | 第100-101页 |
| 2.2.4 pLPCX-VC质粒的鉴定 | 第101页 |
| 2.2.5 三种逆转录病毒的逆转录PCR鉴定 | 第101页 |
| 2.2.6 三种逆转录病毒的滴度测定结果 | 第101页 |
| 2.2.7 逆转录病毒在RAW264.7细胞的表达 | 第101-103页 |
| 2.2.8 逆转录病毒在大鼠体内的表达 | 第103-105页 |
| 2.2.9 RetroVC和RetroVRg对大鼠淋巴管数目的影响 | 第105页 |
| 2.3 讨论 | 第105-108页 |
| 2.3.1 pLPCX逆转录病毒载体与病毒包装 | 第105-106页 |
| 2.3.2 VEGF-C与VEGFR-3 | 第106-108页 |
| 2.4 小结 | 第108-109页 |
| 三、VEGF-C在高盐诱导的高血压性左心室重塑中的作用 | 第109-140页 |
| 3.1 对象和方法 | 第109-116页 |
| 3.1.1 实验动物 | 第109页 |
| 3.1.2 动物分组及技术路线 | 第109-110页 |
| 3.1.3 大鼠无创尾压的测定 | 第110页 |
| 3.1.4 大鼠有创血流动力学的测定 | 第110页 |
| 3.1.5 动物组织的取材及处理 | 第110页 |
| 3.1.6 SHR心肌组织中相关基因的mRNA表达水平检测 | 第110页 |
| 3.1.7 SHR心肌组织中相关蛋白的表达水平检测 | 第110-114页 |
| 3.1.8 组织病理学实验 | 第114-116页 |
| 3.1.8.1 主要试剂 | 第114页 |
| 3.1.8.2 CD68免疫组化染色 | 第114-115页 |
| 3.1.8.3 Isolectin B4免疫荧光染色 | 第115-116页 |
| 3.1.9 统计学分析 | 第116页 |
| 3.2 结果 | 第116-133页 |
| 3.2.1 各组大鼠不同时间点的血压变化及基本资料的比较结果 | 第116-120页 |
| 3.2.2 各组大鼠心脏结构及心功能的比较结果 | 第120-125页 |
| 3.2.3 各组大鼠淋巴管内皮细胞标志物相关基因、TonEBP及VEGF-C的mRNA相对表达水平的比较结果 | 第125-126页 |
| 3.2.4 Western blot检测各组大鼠VEGF-C、VEGFR-3及Prox-1蛋白表达水平的比较结果 | 第126-127页 |
| 3.2.5 各组大鼠心肌组织形态学及纤维化程度的比较结果 | 第127-129页 |
| 3.2.6 各组大鼠心肌组织MPS细胞浸润及淋巴管、血管增生程度的比较结果 | 第129-133页 |
| 3.3 讨论 | 第133-139页 |
| 3.3.1 VEGF-C/VEGFR-3与淋巴管增生 | 第134-135页 |
| 3.3.2 淋巴管与高血压心肌纤维化 | 第135-137页 |
| 3.3.3 淋巴管与心脏损伤 | 第137-139页 |
| 3.4 小结 | 第139-140页 |
| 全文结论 | 第140-142页 |
| 论文创新点及局限性 | 第142-143页 |
| 参考文献 | 第143-155页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第155-156页 |
| 综述 | 第156-168页 |
| 综述参考文献 | 第162-168页 |
| 致谢 | 第168页 |
