| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 缩略语表 | 第13-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-29页 |
| 1 红曲与红曲菌 | 第14-20页 |
| 1.1 红曲及其应用 | 第14-15页 |
| 1.1.1 在发酵工业中的应用 | 第14页 |
| 1.1.2 在食品加工中的应用 | 第14-15页 |
| 1.1.3 在医药行业的应用 | 第15页 |
| 1.2 红曲菌及其主要代谢产物 | 第15-17页 |
| 1.2.1 色素 | 第15-16页 |
| 1.2.2 Monacolin K | 第16页 |
| 1.2.3 GABA | 第16-17页 |
| 1.2.4 桔霉素 | 第17页 |
| 1.3 红曲菌的分子生物学研究 | 第17-20页 |
| 1.3.1 DNA分子标记技术在红曲菌分类中的应用研究 | 第17-18页 |
| 1.3.2 红曲菌遗传转化方法的研究 | 第18页 |
| 1.3.3 红曲菌功能基因的研究进展 | 第18-20页 |
| 2 丝状真菌全局性调节因子LaeA | 第20-25页 |
| 2.1 laeA基因的结构 | 第21-22页 |
| 2.2 laeA基因的功能 | 第22-24页 |
| 2.2.1 LaeA对次级代谢的调控 | 第22-23页 |
| 2.2.2 LaeA对形态发育的调控 | 第23-24页 |
| 2.3 laeA的调控机制 | 第24-25页 |
| 3 丝状真菌基因功能研究的方法 | 第25-28页 |
| 3.1 随机插入突变 | 第26页 |
| 3.2 基因敲除 | 第26-27页 |
| 3.3 RNAi | 第27页 |
| 3.4 过表达 | 第27-28页 |
| 3.5 诱导表达 | 第28页 |
| 4 研究目的和研究内容 | 第28-29页 |
| 第二章 红色红曲菌laeA敲除菌株的构建 | 第29-44页 |
| 1 材料与方法 | 第30-38页 |
| 1.1 材料 | 第30-32页 |
| 1.1.1 菌株与载体构建所用质粒 | 第30页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第30页 |
| 1.1.3 主要培养基 | 第30-31页 |
| 1.1.4 主要仪器设备 | 第31-32页 |
| 1.2 方法 | 第32-38页 |
| 1.2.1 敲除载体的构建 | 第32-35页 |
| 1.2.2 敲除载体转化农杆菌 | 第35-36页 |
| 1.2.3 农杆菌介导的红曲菌转化 | 第36页 |
| 1.2.4 △laeA菌株的筛选和鉴定 | 第36-38页 |
| 2 结果与分析 | 第38-42页 |
| 2.1 敲除载体的构建 | 第38-40页 |
| 2.2 农杆菌介导的红曲菌转化 | 第40页 |
| 2.3 △laeA菌株的筛选和鉴定 | 第40-42页 |
| 3 小结与讨论 | 第42-44页 |
| 3.1 小结 | 第42页 |
| 3.2 讨论 | 第42-44页 |
| 第三章 红色红曲菌laeA过表达菌株的构建 | 第44-59页 |
| 1 材料与方法 | 第44-51页 |
| 1.1 材料 | 第44-45页 |
| 1.1.1 菌株与载体构建所用质粒 | 第44页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第44-45页 |
| 1.1.3 主要培养基 | 第45页 |
| 1.1.4 主要仪器设备 | 第45页 |
| 1.2 方法 | 第45-51页 |
| 1.2.1 过表达载体的构建 | 第45-50页 |
| 1.2.2 过表达载体转化农杆菌 | 第50页 |
| 1.2.3 农杆菌介导的红曲菌转化 | 第50页 |
| 1.2.4 laeA过表达菌株的筛选和鉴定 | 第50-51页 |
| 2 结果与分析 | 第51-57页 |
| 2.1 过表达载体的构建 | 第51-54页 |
| 2.2 农杆菌介导的红曲菌转化 | 第54页 |
| 2.3 过表达菌株的筛选和鉴定 | 第54-57页 |
| 3 小结与讨论 | 第57-59页 |
| 3.1 小结 | 第57-58页 |
| 3.2 讨论 | 第58-59页 |
| 第四章 红色红曲菌laeA敲除菌株和过表达菌株的性质分析 | 第59-72页 |
| 1 材料与方法 | 第59-62页 |
| 1.1 材料 | 第59-61页 |
| 1.1.1 菌株 | 第59-60页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第60页 |
| 1.1.3 主要培养基 | 第60页 |
| 1.1.4 主要仪器设备 | 第60-61页 |
| 1.2 方法 | 第61-62页 |
| 1.2.1 LaeA对形态发育的调控 | 第61页 |
| 1.2.2 LaeA对红曲色素和桔霉素合成的调控 | 第61-62页 |
| 2 结果与分析 | 第62-69页 |
| 2.1 LaeA对形态发育的调控 | 第62-67页 |
| 2.1.1 菌落形态和显微形态的观察 | 第62-65页 |
| 2.1.2 菌落生长速率的比较 | 第65-66页 |
| 2.1.3 孢子数目的比较 | 第66-67页 |
| 2.2 LaeA对色素和桔霉素合成的调控 | 第67-69页 |
| 3 小结与讨论 | 第69-72页 |
| 3.1 小结 | 第69-70页 |
| 3.1.1 分析了LaeA对红曲菌形态发育的调控 | 第69页 |
| 3.1.2 分析了LaeA对红曲菌色素和桔霉素合成的调控 | 第69-70页 |
| 3.2 讨论 | 第70-72页 |
| 3.2.1 LaeA对红色红曲菌形态发育和产色素、桔霉素能力的调控 | 第70页 |
| 3.2.2 trpC启动子驱动laeA基因在红色红曲菌中的表达不依赖于氮源的种类 | 第70-71页 |
| 3.2.3 trpC启动子驱动laeA基因表达具有位置效应 | 第71-72页 |
| 第五章 结论与展望 | 第72-74页 |
| 1 结论 | 第72页 |
| 2 展望 | 第72-73页 |
| 3 论文创新点 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-81页 |
| 附录 | 第81-82页 |
| 致谢 | 第82页 |
