| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第11-22页 |
| 1.1 生防芽孢杆菌的研究进展 | 第11-14页 |
| 1.1.1 芽孢杆菌的应用现状 | 第11-12页 |
| 1.1.2 芽孢杆菌的作用机理 | 第12-14页 |
| 1.1.2.1 芽孢杆菌对植物生长的促进作用 | 第12-13页 |
| 1.1.2.2 芽孢杆菌与病原微生物的竞争作用 | 第13页 |
| 1.1.2.3 芽孢杆菌对植物的诱导抗性作用 | 第13-14页 |
| 1.1.2.4 芽孢杆菌的拮抗作用 | 第14页 |
| 1.2 芽孢杆菌产抗菌物质研究概况 | 第14-21页 |
| 1.2.1 核糖体途径合成的抗菌物质 | 第14-15页 |
| 1.2.1.1 抗菌肽 | 第14页 |
| 1.2.1.2 细胞壁降解酶类 | 第14-15页 |
| 1.2.1.3 其他抗菌物质 | 第15页 |
| 1.2.2 非核糖体途径合成的脂肽类化合物 | 第15-21页 |
| 1.2.2.1 脂肽类化合物的种类及理化性质 | 第15-16页 |
| 1.2.2.2 脂肽类化合物的合成机制 | 第16-18页 |
| 1.2.2.3 脂肽类化合物的作用机制 | 第18页 |
| 1.2.2.4 脂肽类化合物的分离纯化 | 第18-19页 |
| 1.2.2.5 脂肽类化合物的ESI-Q-TOF-MS鉴定 | 第19-21页 |
| 1.3 展望 | 第21页 |
| 1.4 研究的目的和意义 | 第21-22页 |
| 1.4.1 研究目的 | 第21页 |
| 1.4.2 研究意义 | 第21-22页 |
| 2 材料和方法 | 第22-32页 |
| 2.1 材料 | 第22-24页 |
| 2.1.1 土样采集 | 第22页 |
| 2.1.2 供试病原菌 | 第22页 |
| 2.1.3 培养基与试剂 | 第22-23页 |
| 2.1.3.1 培养基 | 第22页 |
| 2.1.3.2 试剂的配制 | 第22-23页 |
| 2.1.4 实验药品及仪器 | 第23-24页 |
| 2.1.4.1 实验药品 | 第23页 |
| 2.1.4.2 实验仪器 | 第23-24页 |
| 2.1.4.3 实验所用引物 | 第24页 |
| 2.2 方法 | 第24-32页 |
| 2.2.1 植物病原真菌的活化与培养 | 第24页 |
| 2.2.2 菌株的分离 | 第24页 |
| 2.2.3 菌株的初筛 | 第24-25页 |
| 2.2.4 菌株的复筛 | 第25页 |
| 2.2.5 拮抗菌株的形态学特征及分子辅助鉴定 | 第25-27页 |
| 2.2.5.1 菌落的形态学观察及部分生理生化特性 | 第25页 |
| 2.2.5.2 菌株的分子辅助鉴定 | 第25-27页 |
| 2.2.6 脂肽类抗菌物质的基因检测 | 第27页 |
| 2.2.7 拮抗菌株发酵上清液的制备 | 第27页 |
| 2.2.8 拮抗菌株抗菌物质粗提物的制备 | 第27-28页 |
| 2.2.9 拮抗菌株抑菌谱分析 | 第28页 |
| 2.2.9.1 拮抗菌株菌体的抑菌活性分析 | 第28页 |
| 2.2.9.2 拮抗菌株发酵上清液的抑菌活性分析 | 第28页 |
| 2.2.9.3 拮抗菌株抗菌物质粗提物的抑菌活性分析 | 第28页 |
| 2.2.10 实验室条件下菌株Y5-18发酵条件的优化 | 第28-29页 |
| 2.2.10.1 发酵时间对产抗菌物质的影响 | 第29页 |
| 2.2.10.2 发酵温度对产抗菌物质的影响 | 第29页 |
| 2.2.10.3 接种量对脂肽类抗菌物质产量的影响 | 第29页 |
| 2.2.10.4 初始pH值对脂肽类抗菌物质产量的影响 | 第29页 |
| 2.2.10.5 摇瓶装液量对产脂肽类抗菌物质的影响 | 第29页 |
| 2.2.11 菌株Y5-18发酵上清液抗菌活性稳定性研究 | 第29-30页 |
| 2.2.11.1 温度对发酵上清液抗菌活性的影响 | 第29页 |
| 2.2.11.2 pH对发酵上清液抗菌活性的影响 | 第29-30页 |
| 2.2.11.3 蛋白酶K及有机溶剂对抗菌物质粗提物活性的影响 | 第30页 |
| 2.2.12 拮抗物质的分离纯化及鉴定 | 第30-31页 |
| 2.2.12.1 菌株Y5-18抗菌物质粗提物HPLC分离 | 第30页 |
| 2.2.12.2 HPLC分离获得组分的活性检测 | 第30页 |
| 2.2.12.3 活性组分的UHPLC-ESI-Q-TOF-MS/MS分析 | 第30-31页 |
| 2.2.13 解淀粉芽孢杆菌Y5-18拮抗物质抗真菌机理的初步研究 | 第31-32页 |
| 3 结果 | 第32-51页 |
| 3.1 拮抗菌株的筛选 | 第32-33页 |
| 3.2 菌株Y5-18的形态特征及分子辅助鉴定 | 第33-36页 |
| 3.2.1 菌株Y5-18的形态学特征及部分生理生化特征 | 第33-34页 |
| 3.2.2 拮抗菌株的16S rDNA的PCR扩增结果 | 第34页 |
| 3.2.3 拮抗菌株的16S rDNA序列分析 | 第34-35页 |
| 3.2.4 基于tetB-tetL基因上下游基因的排列顺序分析 | 第35-36页 |
| 3.3 菌株Y5-18产脂肽抗菌物质的基因检测及基因序列分析 | 第36-37页 |
| 3.4 解淀粉芽孢杆菌Y5-18抑菌谱分析 | 第37-38页 |
| 3.5 解淀粉芽孢杆菌Y5-18产抗菌物质培养条件的优化 | 第38-41页 |
| 3.5.1 发酵时间对脂肽类抗菌物质产量的影响 | 第38-39页 |
| 3.5.2 发酵温度对脂肽类抗菌物质产量的影响 | 第39页 |
| 3.5.3 培养基初始pH对脂肽类抗菌物质产量的影响 | 第39-40页 |
| 3.5.4 接种量对脂肽类抗菌物质产量的影响 | 第40页 |
| 3.5.5 摇瓶装液量对脂肽类抗菌物质产量的影响 | 第40-41页 |
| 3.6 菌株Y5-18代谢产物抗菌活性的稳定性分析 | 第41-44页 |
| 3.6.1 温度对发酵液上清抗菌活性的影响 | 第41-42页 |
| 3.6.2 pH值对发酵液上清抗菌活性的影响 | 第42-43页 |
| 3.6.3 蛋白酶K及有机溶剂对抗菌物质粗提物活性的影响 | 第43-44页 |
| 3.7 高效液相色谱分离活性物质粗提物组分 | 第44-46页 |
| 3.8 抗菌活性物质的分子量 | 第46-47页 |
| 3.9 抗菌活性物质的一级结构 | 第47-49页 |
| 3.10 ituD基因的序列分析 | 第49页 |
| 3.11 解淀粉芽孢杆菌Y5-18抗菌物质的抗真菌机理 | 第49-51页 |
| 4 讨论 | 第51-55页 |
| 参考文献 | 第55-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 附录 | 第63-66页 |
| 附录1. 解淀粉芽孢杆菌Y5-18的16S rDNA基因序列 | 第63-64页 |
| 附录2. 解淀粉芽孢杆菌Y5-18的ituD基因序列 | 第64-65页 |
| 附录3. 解淀粉芽孢杆菌Y5-18的ituD基因序列 | 第65-66页 |
| 附录4. 解淀粉芽孢杆菌Y5-18的sfp基因序列 | 第66页 |
