摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
实验名词英文缩写对照表 | 第11-12页 |
一、综述 | 第12-32页 |
1. 猪瘟病毒 | 第12-17页 |
1.1 CSFV的结构蛋白 | 第12-14页 |
1.2 CSFV的非结构蛋白 | 第14-15页 |
1.3 CSFV的致病机制 | 第15-17页 |
2. STAT家族 | 第17-22页 |
2.1 晶体结构 | 第19-20页 |
2.2 在信号传导过程中STAT分子间的相互作用 | 第20页 |
2.3 STATs各基因之间和其它转录因子间的相互作用 | 第20-21页 |
2.4 与辅活化因子和转接子相互作用 | 第21-22页 |
3. STAT1 蛋白 | 第22-26页 |
3.1 STAT1 的分子结构 | 第23页 |
3.2 STAT1 的激活机制 | 第23-24页 |
3.3 STAT1的结合与转录 | 第24-25页 |
3.4 STAT1是作为一种病毒感染和增殖的抑制因子 | 第25-26页 |
4. 病原体可抑制STAT1信号传递途径 | 第26-28页 |
5. STAT1蛋白与IFNs、病毒感染的相互作用 | 第28-31页 |
6. 研究目的和意义 | 第31-32页 |
二、材料与方法 | 第32-49页 |
1. 实验材料及仪器 | 第32-35页 |
1.1 毒株、菌株、细胞与试验动物 | 第32页 |
1.2 主要的仪器设备 | 第32-33页 |
1.3 试剂 | 第33页 |
1.4 质粒载体及构建 | 第33-34页 |
1.5 引物设计 | 第34-35页 |
2. 技术路线 | 第35-36页 |
3. 具体实验方法 | 第36-49页 |
3.1 克隆猪STAT-1α基因 | 第36-39页 |
3.2 构建原核表达质粒 pET-STAT1α | 第39-40页 |
3.3 猪STAT-1α多克隆抗体的制备 | 第40-47页 |
3.4 猪瘟病毒感染对PK-15细胞中STAT-1α蛋白表达的影响 | 第47-49页 |
三、实验结果及分析 | 第49-62页 |
1. STAT-1α基因的克隆 | 第49-51页 |
2. STAT-1α原核表达载体的构建 | 第51-52页 |
3. 重组蛋白的表达和鉴定 | 第52-54页 |
4. 重组蛋白的纯化和复性 | 第54-55页 |
5. 多克隆抗体的效价测定与反应性验证 | 第55-58页 |
6. 猪瘟病毒感染对PK-15细胞中STAT-1α蛋白表达的影响 | 第58-62页 |
四、讨论 | 第62-66页 |
1. 目的蛋白表达系统的选择 | 第62页 |
2. 构建原核表达载体的策略 | 第62-63页 |
3. STAT-1α重组蛋白表达、纯化条件的摸索 | 第63-64页 |
4. 鼠抗猪STAT-1α多克隆抗体的制备与鉴定 | 第64页 |
5. CSFV感染PK-15细胞后STAT-1α的表达变化 | 第64-66页 |
五、结论 | 第66-67页 |
参考文献 | 第67-78页 |
致谢 | 第78-79页 |
攻读硕士学位期间发表的论文 | 第79页 |