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猪STAT-1α蛋白多克隆抗体的制备及其对猪瘟病毒感染影响的初步研究

摘要第4-6页
Abstract第6-8页
实验名词英文缩写对照表第11-12页
一、综述第12-32页
    1. 猪瘟病毒第12-17页
        1.1 CSFV的结构蛋白第12-14页
        1.2 CSFV的非结构蛋白第14-15页
        1.3 CSFV的致病机制第15-17页
    2. STAT家族第17-22页
        2.1 晶体结构第19-20页
        2.2 在信号传导过程中STAT分子间的相互作用第20页
        2.3 STATs各基因之间和其它转录因子间的相互作用第20-21页
        2.4 与辅活化因子和转接子相互作用第21-22页
    3. STAT1 蛋白第22-26页
        3.1 STAT1 的分子结构第23页
        3.2 STAT1 的激活机制第23-24页
        3.3 STAT1的结合与转录第24-25页
        3.4 STAT1是作为一种病毒感染和增殖的抑制因子第25-26页
    4. 病原体可抑制STAT1信号传递途径第26-28页
    5. STAT1蛋白与IFNs、病毒感染的相互作用第28-31页
    6. 研究目的和意义第31-32页
二、材料与方法第32-49页
    1. 实验材料及仪器第32-35页
        1.1 毒株、菌株、细胞与试验动物第32页
        1.2 主要的仪器设备第32-33页
        1.3 试剂第33页
        1.4 质粒载体及构建第33-34页
        1.5 引物设计第34-35页
    2. 技术路线第35-36页
    3. 具体实验方法第36-49页
        3.1 克隆猪STAT-1α基因第36-39页
        3.2 构建原核表达质粒 pET-STAT1α第39-40页
        3.3 猪STAT-1α多克隆抗体的制备第40-47页
        3.4 猪瘟病毒感染对PK-15细胞中STAT-1α蛋白表达的影响第47-49页
三、实验结果及分析第49-62页
    1. STAT-1α基因的克隆第49-51页
    2. STAT-1α原核表达载体的构建第51-52页
    3. 重组蛋白的表达和鉴定第52-54页
    4. 重组蛋白的纯化和复性第54-55页
    5. 多克隆抗体的效价测定与反应性验证第55-58页
    6. 猪瘟病毒感染对PK-15细胞中STAT-1α蛋白表达的影响第58-62页
四、讨论第62-66页
    1. 目的蛋白表达系统的选择第62页
    2. 构建原核表达载体的策略第62-63页
    3. STAT-1α重组蛋白表达、纯化条件的摸索第63-64页
    4. 鼠抗猪STAT-1α多克隆抗体的制备与鉴定第64页
    5. CSFV感染PK-15细胞后STAT-1α的表达变化第64-66页
五、结论第66-67页
参考文献第67-78页
致谢第78-79页
攻读硕士学位期间发表的论文第79页

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