| 摘要 | 第8-11页 |
| ABSTRACT | 第11-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-24页 |
| 1.1 家蚕及其它昆虫变态发育的激素调节 | 第14-16页 |
| 1.1.1 家蚕及其它昆虫保幼激素和蜕皮激素的滴度变化规律 | 第14-15页 |
| 1.1.2 家蚕及其它昆虫蜕皮激素的信号传导 | 第15-16页 |
| 1.1.3 家蚕及其它昆虫保幼激素的信号传导 | 第16页 |
| 1.2 转录因子BR-C在家蚕及其它昆虫变态发育中的功能 | 第16-20页 |
| 1.2.1 BR-C属于BTB-ZF类转录因子家族 | 第16-17页 |
| 1.2.2 BR-C参与20E和JH的信号传导 | 第17页 |
| 1.2.3 昆虫BR-C调节目标基因表达并参与多种生物学过程 | 第17-18页 |
| 1.2.4 家蚕BR-C基因的功能研究 | 第18-20页 |
| 1.3 酵母双杂交技术 | 第20-24页 |
| 1.3.1 酵母双杂交技术的原理 | 第20-22页 |
| 1.3.2 利用酵母双杂交技术鉴定目标蛋白的相互作用蛋白 | 第22-24页 |
| 第二章 引言 | 第24-28页 |
| 2.1 研究背景及目的意义 | 第24-25页 |
| 2.2 研究内容 | 第25-26页 |
| 2.2.1 构建家蚕丝腺组织酵母双杂交cDNA文库 | 第25页 |
| 2.2.2 构建家蚕BR-C蛋白BTB结构域为基础的诱饵质粒 | 第25页 |
| 2.2.3 家蚕BR-C相互作用蛋白的酵母双杂交筛选 | 第25页 |
| 2.2.4 候选互作蛋白RACK1与BR-C的相互作用分析 | 第25-26页 |
| 2.3 技术路线 | 第26-28页 |
| 第三章 家蚕丝腺酵母双杂交cDNA文库的构建 | 第28-44页 |
| 3.1 实验材料与试剂 | 第28-29页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第28页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第28-29页 |
| 3.2 实验方法和步骤 | 第29-36页 |
| 3.2.1 家蚕丝腺组织BR-C基因表达谱分析 | 第29-31页 |
| 3.2.2 cDNA的合成与纯化 | 第31-34页 |
| 3.2.3 cDNA转化Y187感受态细胞 | 第34-36页 |
| 3.2.4 cDNA文库质量检测 | 第36页 |
| 3.3 实验结果与分析 | 第36-41页 |
| 3.3.1 家蚕丝腺组织BR-C基因表达谱分析 | 第36-37页 |
| 3.3.2 家蚕丝腺总RNA的提取 | 第37-39页 |
| 3.3.3 cDNA的合成与纯化 | 第39页 |
| 3.3.4 cDNA文库构建及质量检测 | 第39-41页 |
| 3.4 讨论 | 第41-44页 |
| 第四章 家蚕BR-C蛋白BTB结构域为基础的诱饵质粒构建 | 第44-56页 |
| 4.1 实验材料与试剂 | 第44-46页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第44页 |
| 4.1.2 实验试剂 | 第44-46页 |
| 4.2 实验方法和步骤 | 第46-52页 |
| 4.2.1 诱饵质粒的构建 | 第46-49页 |
| 4.2.2 诱饵质粒毒性效应检测 | 第49-51页 |
| 4.2.3 诱饵质粒自激活效应检测 | 第51-52页 |
| 4.3 实验结果与分析 | 第52-54页 |
| 4.3.1 诱饵质粒的构建 | 第52-53页 |
| 4.3.2 诱饵质粒毒性效应检测 | 第53页 |
| 4.3.3 诱饵质粒自激活效应检测 | 第53-54页 |
| 4.4 讨论 | 第54-56页 |
| 第五章 家蚕BR-C相互作用蛋白的酵母双杂交筛选 | 第56-72页 |
| 5.1 实验材料与试剂 | 第56-57页 |
| 5.1.1 实验材料 | 第56页 |
| 5.1.2 实验试剂 | 第56-57页 |
| 5.2 实验方法和步骤 | 第57-62页 |
| 5.2.1 酵母双杂交对照实验 | 第57-58页 |
| 5.2.2 诱饵质粒与文库酵母双杂交筛选 | 第58-60页 |
| 5.2.3 阳性克隆的鉴定 | 第60-62页 |
| 5.2.4 候选基因生物信息学分析 | 第62页 |
| 5.3 实验结果与分析 | 第62-69页 |
| 5.3.1 酵母双杂交对照实验 | 第62-64页 |
| 5.3.2 诱饵质粒与文库酵母双杂交筛选 | 第64-66页 |
| 5.3.3 阳性克隆的鉴定 | 第66-67页 |
| 5.3.4 候选互作蛋白的生物信息学分析 | 第67-68页 |
| 5.3.5 候选互作蛋白编码基因的组织表达特征分析 | 第68-69页 |
| 5.4 讨论 | 第69-72页 |
| 第六章 BR-C与RACK1的相互作用分析 | 第72-84页 |
| 6.1 实验材料与试剂 | 第72-73页 |
| 6.1.1 实验材料 | 第72页 |
| 6.1.2 实验试剂 | 第72-73页 |
| 6.2 实验方法与步骤 | 第73-79页 |
| 6.2.1 LR反应载体的构建 | 第73-76页 |
| 6.2.2 BR-C与RACK1亚细胞定位分析 | 第76-77页 |
| 6.2.3 BR-C与RACK1的相互作用验证 | 第77-79页 |
| 6.3 实验结果与分析 | 第79-83页 |
| 6.3.1 LR反应载体构建 | 第79-80页 |
| 6.3.2 BR-C与RACK1的亚细胞定位 | 第80-81页 |
| 6.3.3 BR-C与RACK1的原核表达 | 第81-82页 |
| 6.3.4 BR-C与R ACK1相互作用验证 | 第82-83页 |
| 6.4 讨论 | 第83-84页 |
| 第七章 综合与结论 | 第84-86页 |
| 参考文献 | 第86-92页 |
| 附件 | 第92-102页 |
| 硕士在读期间发表的论文及参研课题 | 第102-104页 |
| 致谢 | 第104-105页 |
