| 摘要 | 第9-12页 |
| ABSTRACT | 第12-14页 |
| 缩略语表 | 第15-17页 |
| 1 前言 | 第17-28页 |
| 1.1 立题依据 | 第17-18页 |
| 1.2 国内外研究进展 | 第18-27页 |
| 1.2.1 饲用益生菌应用现状 | 第18-19页 |
| 1.2.2 益生菌安全性研究进展 | 第19-21页 |
| 1.2.3 益生菌安全性评价主要方法 | 第21-23页 |
| 1.2.4 益生枯草芽孢杆菌在食品安全性方面的研究进展 | 第23-24页 |
| 1.2.5 微生物代谢组学在益生菌安全性评价的应用 | 第24-27页 |
| 1.3 研究内容和目标 | 第27-28页 |
| 1.3.1 研究内容 | 第27页 |
| 1.3.2 研究目标 | 第27-28页 |
| 2 材料与方法 | 第28-48页 |
| 2.1 药品与试剂 | 第28-32页 |
| 2.1.1 药品 | 第28页 |
| 2.1.2 主要试剂及溶液配制 | 第28-32页 |
| 2.2 主要仪器与设备 | 第32-33页 |
| 2.3 实验菌株与实验动物 | 第33页 |
| 2.3.1 实验菌株 | 第33页 |
| 2.3.2 实验动物 | 第33页 |
| 2.4 菌株纯化鉴定及常规活性测定 | 第33-38页 |
| 2.4.1 菌株的分离与活菌数测定 | 第33页 |
| 2.4.2 菌体形态试验 | 第33-34页 |
| 2.4.3 生理生化试验 | 第34-35页 |
| 2.4.4 PCR鉴定 | 第35-36页 |
| 2.4.5 生长曲线测定 | 第36页 |
| 2.4.6 抗菌活性评价 | 第36-37页 |
| 2.4.7 常见药物敏感性试验 | 第37-38页 |
| 2.5 益生枯草芽孢杆菌对仔猪肠道菌群及血清生化和免疫指标影响研究 | 第38-42页 |
| 2.5.1 标准菌株的复苏与培养 | 第38页 |
| 2.5.2 肠道菌群实时荧光定量PCR方法建立 | 第38-40页 |
| 2.5.3 动物试验 | 第40-42页 |
| 2.5.4 肠内容物和粪便样品采集及总DNA提取 | 第42页 |
| 2.5.5 肠内容物及粪便中菌群的RT-PCR测定 | 第42页 |
| 2.5.6 血清生化指标和免疫指标的测定 | 第42页 |
| 2.6 益生枯草芽孢杆菌体外代谢研究 | 第42-45页 |
| 2.6.1 试验菌株的扩大培养及发酵上清液的预处理 | 第42-43页 |
| 2.6.2 枯草芽孢杆菌代谢物组LC/MS-IT-TOF检测方法建立 | 第43-45页 |
| 2.6.3 试验菌株体外培养发酵上清液代谢物提取及检测 | 第45页 |
| 2.6.4 半体内模型建立 | 第45页 |
| 2.6.5 半体内模型试验样品前处理及检测 | 第45页 |
| 2.6.6 数据分析及差异代谢物筛选 | 第45页 |
| 2.7 益生枯草芽孢杆菌对猪消化道及可食性组织代谢影响研究 | 第45-47页 |
| 2.7.1 肠液、血浆及可食性组织代谢物组LC/MS-IT-TOF检测方法建立 | 第45-46页 |
| 2.7.2 动物试验 | 第46页 |
| 2.7.3 样品采集 | 第46-47页 |
| 2.7.4 动物试验样品前处理及检测分析 | 第47页 |
| 2.7.5 数据分析及差异代谢物筛选 | 第47页 |
| 2.8 数据处理 | 第47-48页 |
| 3 结果与分析 | 第48-79页 |
| 3.1 试验菌株的分离纯化鉴定及相关活性测定 | 第48-52页 |
| 3.1.1 样品活菌数 | 第48页 |
| 3.1.2 菌落形态 | 第48-49页 |
| 3.1.3 生理生化鉴定结果 | 第49页 |
| 3.1.4 特异性基因rpoA的PCR鉴定结果 | 第49-50页 |
| 3.1.5 生长曲线测定 | 第50页 |
| 3.1.6 抗菌活性评价 | 第50-51页 |
| 3.1.7 常见抗菌药物敏感性试验 | 第51-52页 |
| 3.2 益生枯草芽孢杆菌对仔猪肠道菌群及血清生化和免疫指标影响研究 | 第52-65页 |
| 3.2.1 标准菌株基因组DNA提取 | 第52-53页 |
| 3.2.2 引物特异性 | 第53页 |
| 3.2.3 标准曲线 | 第53-59页 |
| 3.2.4 实时荧光PCR法定量肠道及粪便主要菌群结果 | 第59-63页 |
| 3.2.5 枯草芽孢杆菌对血清生化和免疫指标的影响 | 第63-65页 |
| 3.3 益生枯草芽孢杆菌体外代谢研究 | 第65-72页 |
| 3.3.1 枯草芽孢杆菌代谢物组的LC/MS-IT-TOF方法 | 第65-67页 |
| 3.3.2 方法重复性考察 | 第67-68页 |
| 3.3.3 试验菌株体外纯培养差异代谢物离子信息 | 第68-70页 |
| 3.3.4 半体内模型差异代谢离子信息 | 第70-72页 |
| 3.4 益生芽孢杆菌对猪消化道及可食性组织代谢影响研究 | 第72-79页 |
| 3.4.1 方法重复性考察 | 第72-74页 |
| 3.4.2 肠液及血浆样品差异代谢物 | 第74-77页 |
| 3.4.3 组织样品差异代谢物 | 第77-79页 |
| 4 讨论 | 第79-87页 |
| 4.1 分离菌株的基本生理生化特性 | 第79-80页 |
| 4.2 瘘管模型的建立 | 第80-81页 |
| 4.3 肠道菌群分析 | 第81-83页 |
| 4.4 血清生化指标及免疫指标分析 | 第83-84页 |
| 4.5 差异代谢物分析 | 第84-87页 |
| 5 全文总结 | 第87-88页 |
| 6 文献综述 | 第88-97页 |
| 6.1 益生菌的概念 | 第88页 |
| 6.2 饲用益生菌的筛选标准 | 第88-89页 |
| 6.3 饲用益生菌的作用 | 第89-91页 |
| 6.3.1 动物肠道的正常菌群 | 第89-90页 |
| 6.3.2 微生态失调与动物健康 | 第90-91页 |
| 6.4 益生菌的作用机理 | 第91-92页 |
| 6.4.1 加强胃粘膜屏障 | 第91页 |
| 6.4.2 影响肠道免疫系统 | 第91-92页 |
| 6.4.3 其他作用机理 | 第92页 |
| 6.5 饲用益生菌的应用 | 第92-96页 |
| 6.5.1 养猪业中的应用 | 第92-93页 |
| 6.5.2 禽类生产中的应用 | 第93-94页 |
| 6.5.3 反刍动物中的应用 | 第94-95页 |
| 6.5.4 水产养殖中的应用 | 第95-96页 |
| 6.6 小结 | 第96-97页 |
| 参考文献 | 第97-111页 |
| 致谢 | 第111-112页 |
| 附录 | 第112-118页 |
| 附录Ⅰ 研究生简介 | 第112-113页 |
| 附录Ⅱ 相关数据 | 第113-118页 |
| 答辩委员提问及回答 | 第118-121页 |
