| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-24页 |
| ·糖组与糖组学 | 第11-12页 |
| ·糖链的分类及特点 | 第12-14页 |
| ·糖链的分类 | 第12-13页 |
| ·N-糖链 | 第12-13页 |
| ·高甘露糖型(High-mannose type) | 第12页 |
| ·复杂型(Complex type) | 第12-13页 |
| ·杂合型(Hybrid type) | 第13页 |
| ·O-糖链 | 第13页 |
| ·糖链的特点 | 第13-14页 |
| ·表象——微不均一性(Microheterogeneity) | 第13-14页 |
| ·本质——非模板式合成 | 第14页 |
| ·糖链——一种潜在的生物标志物分子(Biomarker moleculer) | 第14-15页 |
| ·糖链与恶性疾病的关系 | 第14-15页 |
| ·生物标志物分子 | 第15页 |
| ·糖链是一种潜在的生物标志物分子 | 第15页 |
| ·N-糖链的解离方法 | 第15-17页 |
| ·糖蛋白的前处理 | 第15-16页 |
| ·糖蛋白的变性(Denaturation) | 第15-16页 |
| ·蛋白酶酶解成糖肽 | 第16页 |
| ·N-糖链的释放 | 第16-17页 |
| ·N-糖链的酶解离方法 | 第16-17页 |
| ·N-糖链的化学解离法 | 第17页 |
| ·N-糖链的富集纯化方法 | 第17-20页 |
| ·凝集素亲和层析(Affinity chromatography) | 第17-18页 |
| ·凝胶过滤层析(Gel filtration chromatography,GFC) | 第18页 |
| ·高效阴离子交换色谱-脉冲安培检测法(HPAEC-PAD) | 第18页 |
| ·固相萃取技术 | 第18-19页 |
| ·C18小柱 | 第18-19页 |
| ·活性炭柱 | 第19页 |
| ·阳离子交换层析 | 第19页 |
| ·微晶纤维素柱法 | 第19-20页 |
| ·膜分离技术——滤纸片法 | 第20页 |
| ·糖链的质谱检测方法 | 第20-22页 |
| ·电喷雾电离质谱仪 | 第20-21页 |
| ·基质辅助激光解吸离子化质谱仪 | 第21页 |
| ·纳升电喷雾电离质谱仪 | 第21页 |
| ·傅里叶变换离子回旋共振质谱仪 | 第21-22页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第22-24页 |
| 第二章 糖蛋白N-糖链解离、富集纯化方法的考察 | 第24-38页 |
| ·引言 | 第24页 |
| ·实验部分 | 第24-27页 |
| ·实验试剂及仪器 | 第24-25页 |
| ·试剂 | 第24-25页 |
| ·仪器 | 第25页 |
| ·实验条件 | 第25页 |
| ·实验方法 | 第25-27页 |
| ·N-糖链解离方法 | 第25-26页 |
| ·方法1 | 第25页 |
| ·方法2 | 第25-26页 |
| ·方法3 | 第26页 |
| ·N-糖链富集纯化方法的考察 | 第26-27页 |
| ·活性炭柱纯化方法 | 第26页 |
| ·C18柱纯化方法 | 第26页 |
| ·C18粉末装柱纯化方法 | 第26页 |
| ·微晶纤维素柱纯化方法 | 第26页 |
| ·阳离子交换树脂柱纯化方法 | 第26页 |
| ·微晶纤维素"串联"阳离子交换树脂柱纯化方法 | 第26-27页 |
| ·ESI-MS分析 | 第27页 |
| ·实验结果与分析 | 第27-37页 |
| ·N-糖链解离方法 | 第27-29页 |
| ·N-糖链富集纯化方法 | 第29-34页 |
| ·N-糖链富集纯化方法的单独使用 | 第29-32页 |
| ·活性炭柱方法 | 第29-30页 |
| ·C18小柱方法 | 第30页 |
| ·C18粉末装柱方法 | 第30页 |
| ·微晶纤维素柱方法 | 第30-31页 |
| ·阳离子交换树脂柱方法 | 第31-32页 |
| ·小结 | 第32页 |
| ·N-糖链富集纯化方法的联合使用 | 第32-34页 |
| ·ESI-MS分析 | 第34-37页 |
| ·牛胰核糖核酸酶B N-糖链 | 第34-35页 |
| ·鸡卵清白蛋白N-糖链 | 第35-37页 |
| ·本章小结 | 第37-38页 |
| 第三章 微量复杂生物样品糖蛋白中N-糖链解离、富集纯化方法的建立 | 第38-59页 |
| ·引言 | 第38页 |
| ·实验部分 | 第38-40页 |
| ·实验试剂与仪器 | 第38-39页 |
| ·试剂 | 第38-39页 |
| ·仪器 | 第39页 |
| ·实验条件 | 第39页 |
| ·实验方法 | 第39-40页 |
| ·N-糖链解离方法的改进 | 第39页 |
| ·N-糖链富集纯化方法 | 第39-40页 |
| ·微晶纤维素柱结合阳离子交换树脂柱 | 第39页 |
| ·C18柱结合阳离子交换树脂柱 | 第39页 |
| ·C18柱结合活性炭柱 | 第39页 |
| ·活性炭柱联合微晶纤维素柱富集纯化方法的改进 | 第39-40页 |
| ·ESI-MS分析 | 第40页 |
| ·结果与讨论 | 第40-57页 |
| ·实验方法的改进 | 第40-43页 |
| ·微量复杂生物样品糖蛋白N-糖链解离方法的改进 | 第40-41页 |
| ·微量复杂生物样品糖蛋白N-糖链的富集纯化方法 | 第41-43页 |
| ·质谱检测结果比较 | 第41-42页 |
| ·操作方法的比较和分析 | 第42-43页 |
| ·活性炭柱结合微晶纤维素柱方法的改进 | 第43页 |
| ·微量复杂生物样品来源糖蛋白N-糖链的ESI-MS分析 | 第43-57页 |
| ·胎牛血清样品 | 第43-47页 |
| ·健康小鼠血清样品 | 第47-51页 |
| ·健康人血清样品 | 第51-55页 |
| ·小鼠HAbI8 IgG和HAbI8 IgG(腹水法)样品 | 第55-57页 |
| ·本章小结 | 第57-59页 |
| 结论 | 第59-61页 |
| 参考文献 | 第61-70页 |
| 攻读硕士学位期间取得的学术成果 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
