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PCSK9/LRP1介导Ox-LDL促神经细胞凋亡作用与机制研究

摘要第4-8页
Abstract第8-11页
主要英文缩略词索引第15-16页
第1章 绪论第16-20页
第2章 实验材料第20-24页
    2.1 细胞和主要试剂第20-21页
    2.2 主要仪器设备第21-24页
第3章 实验方法第24-32页
    3.1 细胞培养第24-27页
        3.1.1 细胞复苏第24页
        3.1.2 细胞传代第24页
        3.1.3 细胞换液第24-25页
        3.1.4 细胞冻存第25页
        3.1.5 实验分组第25-27页
    3.2 常用液体的配制第27页
    3.3 油红O染色第27-28页
    3.4 Hoechest33258染色第28页
    3.5 AnnexinV-FITC/PI双染第28页
    3.6 Western blot第28-30页
        3.6.1 贴壁细胞蛋白质提取第28-29页
        3.6.2 SDS-PAGE凝胶配制第29页
        3.6.3 电泳第29-30页
        3.6.4 转膜(湿转膜法)第30页
        3.6.5 封闭第30页
        3.6.6 一抗孵育第30页
        3.6.7 二抗孵育第30页
        3.6.8 ECL化学发光检测第30页
    3.7 siRNA转染第30-31页
    3.8 ELISA检测Aβ40及Aβ42含量第31页
    3.9 统计分析第31-32页
第4章 实验结果第32-46页
    4.1 Ox-LDL增加PC12细胞内脂质蓄积第32页
    4.2 Ox-LDL促进PC12细胞的凋亡第32-34页
        4.2.1 Hoechst33258染色观察不同浓度Ox-LDL对PC12细胞凋亡的影响第32-33页
        4.2.2 流式细胞计数检测不同浓度的Ox-LDL对PC12细胞凋亡的影响第33-34页
    4.3 Ox-LDL增加PC12细胞中SREBP2和PCSK9表达减少LRP1表达第34-37页
        4.3.1 不同浓度的Ox-LDL对PC12细胞中SREBP2,PCSK9及LRP1表达的影响第34-36页
        4.3.2 75mg/L Ox-LDL处理PC12细胞不同时间对其SREBP2,PCSK9及LRP1表达的影响第36-37页
    4.4 Ox-LDL减少PC12细胞Aβ的分泌第37页
    4.5 PCSK9 siRNA转染的结果鉴定第37-38页
    4.6 PCSK9 siRNA部分抑制Ox-LDL诱导的PC12细胞凋亡第38-40页
        4.6.1 Hoechst33258染色观察PCSK9 siRNA对Ox-LDL诱导的PC12细胞凋亡的影响第38-39页
        4.6.2 流式细胞计数检测PCSK9 siRNA对Ox-LDL诱导的PC12细胞凋亡的影响第39-40页
    4.7 PCSK9 siRNA部分抑制Ox-LDL诱导的PC12细胞中PCSK9表达增加和LRP1表达减少第40-41页
    4.8 PCSK9 siRNA对PC12细胞中PI3K,Akt,P-PI3K及P-Akt表达的影响第41-43页
    4.9 PCSK9 siRNA对PC12细胞中NF-κB,Caspase3,Caspase9,Bax及Bcl-2 表达的影响第43-44页
    4.10 PCSK9 siRNA增加Ox-LDL处理的PC12细胞分泌的Aβ第44-46页
第5章 讨论第46-50页
第6章 结论第50-52页
参考文献第52-56页
文献综述第56-76页
    References第70-76页
攻读学位期间的科研成果第76-77页
课题资助第77-78页
致谢第78页

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