| 摘要 | 第7-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 缩略词表 | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第11-23页 |
| 1.1 菘蓝遗传转化研究进展 | 第11-14页 |
| 1.1.1 菘蓝的组织培养 | 第11-13页 |
| 1.1.2 农杆菌介导的菘蓝遗传转化 | 第13-14页 |
| 1.2 转基因材料的鉴定 | 第14-19页 |
| 1.2.1 核酸水平 | 第15-16页 |
| 1.2.2 蛋白质水平 | 第16-17页 |
| 1.2.3 转Bar基因的抗除草剂性的鉴定 | 第17-18页 |
| 1.2.4 转Bt基因的抗虫性的鉴定 | 第18-19页 |
| 1.3 Bt蛋白与菘蓝育种 | 第19-20页 |
| 1.4 病程相关蛋白与菘蓝育种 | 第20-22页 |
| 1.4.1 病程相关蛋白 | 第20页 |
| 1.4.2 病程相关蛋白的分类 | 第20-22页 |
| 1.5 本研究的目的和意义 | 第22-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-32页 |
| 2.1 材料 | 第23-26页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第23页 |
| 2.1.2 培养基 | 第23页 |
| 2.1.3 质粒和菌株 | 第23-24页 |
| 2.1.4 试剂盒、引物 | 第24-25页 |
| 2.1.5 其他材料 | 第25-26页 |
| 2.1.6 主要仪器设备 | 第26页 |
| 2.2 方法 | 第26-32页 |
| 2.2.1 菘蓝遗传转化体系的探讨 | 第26-27页 |
| 2.2.2 农杆菌介导pBar-P35-Iap和pBar-Ace-Tlp转化菘蓝 | 第27页 |
| 2.2.3 转基因菘蓝PCR检测 | 第27页 |
| 2.2.4 转基因菘蓝RT-PCR检测 | 第27-28页 |
| 2.2.5 转基因菘蓝Southern杂交 | 第28页 |
| 2.2.6 转Bar基因菘蓝Bar试纸条检测 | 第28页 |
| 2.2.7 转Bar基因菘蓝Basta抗性检测 | 第28-29页 |
| 2.2.8 转基因菘蓝CryIC蛋白含量检测 | 第29-30页 |
| 2.2.9 转基因菘蓝室内抗虫实验 | 第30页 |
| 2.2.10 转基因菘蓝抗病性鉴定 | 第30页 |
| 2.2.11 数据处理及统计 | 第30-32页 |
| 3 结果与分析 | 第32-54页 |
| 3.1 影响菘蓝遗传转化几个因素的探讨 | 第32-36页 |
| 3.1.1 遗传转化外植体的获得 | 第32-33页 |
| 3.1.2 不同浸染时间对菘蓝遗传转化的影响 | 第33页 |
| 3.1.3 不同共培养时间对菘蓝遗传转化的影响 | 第33-34页 |
| 3.1.4 不同AS浓度对菘蓝遗传转化的影响 | 第34-35页 |
| 3.1.5 生根与移栽 | 第35-36页 |
| 3.2 农杆菌介导pBar-P35-Iap和pBar-Ace-Tlp转化菘蓝 | 第36页 |
| 3.3 转P35-Iap和Ace-Tlp基因T0代菘蓝的分子检测 | 第36-38页 |
| 3.3.1 PCR | 第36-37页 |
| 3.3.2 RT-PCR | 第37-38页 |
| 3.3.3 Southern blot | 第38页 |
| 3.4 转CryIC基因T1代菘蓝的分子检测 | 第38-41页 |
| 3.4.1 PCR | 第38-40页 |
| 3.4.2 RT-PCR | 第40页 |
| 3.4.3 Southern blot | 第40-41页 |
| 3.5 Bar试纸条检测 | 第41-43页 |
| 3.6 转Bar基因菘蓝Basta抗性检测 | 第43-47页 |
| 3.6.1 菘蓝抗Basta临界浓度的确定 | 第43-45页 |
| 3.6.2 转基因菘蓝Basta抗性检测 | 第45-47页 |
| 3.7 转基因菘蓝Cry1C蛋白含量检测 | 第47-48页 |
| 3.8 转基因菘蓝室内抗虫实验 | 第48-50页 |
| 3.9 转基因菘蓝抗病性鉴定 | 第50-54页 |
| 4 讨论 | 第54-59页 |
| 4.1 影响菘蓝遗传转化的因素 | 第54-56页 |
| 4.1.1 浸染时间 | 第54页 |
| 4.1.2 共培养时间 | 第54-55页 |
| 4.1.3 AS浓度 | 第55页 |
| 4.1.4 转基因苗的移栽与养护 | 第55-56页 |
| 4.2 转基因菘蓝的检测 | 第56-57页 |
| 4.2.1 抗除草剂性检测 | 第56页 |
| 4.2.2 抗虫性能检测 | 第56-57页 |
| 4.2.3 Southern杂交 | 第57页 |
| 4.3 展望及创新之处 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-66页 |
| 附录1 质粒提取操作步骤 | 第66-67页 |
| 附录2 CTAB小样法提取菘蓝全基因组DNA | 第67-68页 |
| 附录3 CTAB大样法提取菘蓝全基因组DNA | 第68-69页 |
| 附录4 Southern杂交过程 | 第69-72页 |
| 附录5 菘蓝农杆菌介导转化的操作流程 | 第72-73页 |
| 附录6 Trizol法提取RNA | 第73-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
