| 摘要 | 第7-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 缩略词表(Abbreviation) | 第10-12页 |
| 1 文献综述 | 第12-24页 |
| 1.1 猪传染性胸膜肺炎的危害及流行特点 | 第12-13页 |
| 1.2 猪传染性胸膜肺炎的诊断 | 第13页 |
| 1.3 猪传染性胸膜肺炎的防治 | 第13-14页 |
| 1.4 胸膜肺炎放线杆菌的特征 | 第14-16页 |
| 1.5 胸膜肺炎放线杆菌的致病因子 | 第16-18页 |
| 1.5.1 荚膜多糖 | 第16页 |
| 1.5.2 脂多糖 | 第16页 |
| 1.5.3 外膜蛋白 | 第16-17页 |
| 1.5.4 转铁结合蛋白 | 第17页 |
| 1.5.5 Apx外毒素 | 第17-18页 |
| 1.6 胸膜肺炎放线杆菌Apx外毒素的结构与功能 | 第18-21页 |
| 1.6.1 胸膜肺炎放线杆菌Apx外毒素的操纵子结构 | 第18-19页 |
| 1.6.2 胸膜肺炎放线杆菌Apx外毒素的蛋白结构 | 第19-20页 |
| 1.6.3 胸膜肺炎放线杆菌Apx外毒素的功能 | 第20-21页 |
| 1.7 细胞凋亡 | 第21-24页 |
| 1.7.1 细胞凋亡的特征 | 第21-22页 |
| 1.7.2 细胞凋亡的检测方法 | 第22-24页 |
| 2 研究目的与意义 | 第24-25页 |
| 3 材料和方法 | 第25-40页 |
| 3.1 材料 | 第25-31页 |
| 3.1.1 菌株、质粒和细胞 | 第25-26页 |
| 3.1.2 酶、相关试剂、抗生素和试剂盒 | 第26页 |
| 3.1.3 引物 | 第26-27页 |
| 3.1.4 主要溶液的配制 | 第27-29页 |
| 3.1.5 培养基及抗生素的配制 | 第29-30页 |
| 3.1.6 仪器设备 | 第30-31页 |
| 3.2 方法 | 第31-40页 |
| 3.2.1 细菌的活化 | 第31页 |
| 3.2.2 细菌基因组DNA的提取 | 第31页 |
| 3.2.3 重组质粒的构建 | 第31-34页 |
| 3.2.4 重组蛋白ApxⅣA的表达与纯化 | 第34-35页 |
| 3.2.5 重组蛋白ApxⅣA的Western-blot验证 | 第35-36页 |
| 3.2.6 重组蛋白ApxⅣA溶血活性检测 | 第36-37页 |
| 3.2.7 猪肺上皮细胞系SJPL细胞的培养 | 第37页 |
| 3.2.8 重组蛋白ApxⅣA对SJPL细胞的影响 | 第37-38页 |
| 3.2.9 重组蛋白ApxⅣA对SJPL细胞凋亡的影响 | 第38-40页 |
| 4 结果与分析 | 第40-54页 |
| 4.1 重组质粒的构建 | 第40-43页 |
| 4.1.1 PCR扩增 | 第40-41页 |
| 4.1.2 重组质粒的鉴定 | 第41-43页 |
| 4.2 重组蛋白ApxⅣA的表达纯化 | 第43-45页 |
| 4.2.1 重组蛋白ApxⅣA的表达 | 第43-44页 |
| 4.2.2 重组蛋白ApxⅣA的纯化 | 第44页 |
| 4.2.3 重组蛋白ApxⅣA的Western-Blot检测 | 第44-45页 |
| 4.3 重组蛋白ApxⅣA溶血活性的测定 | 第45-49页 |
| 4.3.1 重组蛋白ApxⅣA溶血试验 | 第45-46页 |
| 4.3.2 重组蛋白ApxⅣA协同溶血试验 | 第46-49页 |
| 4.4 重组蛋白ApxⅣA对SJPL细胞的影响 | 第49-53页 |
| 4.4.1 重组蛋白ApxⅣA浓度与SJPL细胞活性的关系 | 第49-50页 |
| 4.4.2 重组蛋白ApxⅣA的作用时间与SJPL细胞活性的关系 | 第50-51页 |
| 4.4.3 重组蛋白ApxⅣA对SJPL细胞生长的影响 | 第51-52页 |
| 4.4.4 重组蛋白ApxⅣA对SJPL细胞形态的影响 | 第52-53页 |
| 4.5 重组蛋白ApxⅣA对SJPL细胞凋亡的影响 | 第53-54页 |
| 5 讨论 | 第54-59页 |
| 5.1 重组质粒的构建及重组蛋白ApxⅣA的表达纯化 | 第54-55页 |
| 5.2 重组蛋白ApxⅣA的溶血活性检测 | 第55-56页 |
| 5.3 重组蛋白ApxⅣA对SJPL细胞的影响 | 第56-57页 |
| 5.4 重组蛋白ApxⅣA对SJPL细胞凋亡的影响 | 第57-59页 |
| 6 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
