摘要 | 第5-8页 |
Abstract | 第8-11页 |
第1章 绪论 | 第14-42页 |
1.1 周期蛋白和周期蛋白依赖性激酶 | 第14-22页 |
1.1.1 周期蛋白和周期蛋白依赖蛋白激酶概述 | 第14页 |
1.1.2 周期蛋白和周期蛋白依赖性激酶复合物 | 第14-15页 |
1.1.3 Cyclins/CdKs蛋白复合物的功能 | 第15-22页 |
1.2 精子发生过程 | 第22-36页 |
1.2.1 小鼠雄性生殖系统 | 第22-23页 |
1.2.2 小鼠睾丸结构及生精小管的组成 | 第23-25页 |
1.2.3 精子的生成过程 | 第25-29页 |
1.2.4 精子发生的调控 | 第29-33页 |
1.2.5 不同类型的生殖细胞的特点及分选 | 第33-36页 |
1.3 精子的结构 | 第36-40页 |
1.4 受精过程及雄性不育 | 第40-42页 |
第2章 Ccnyl1在精子发生过程中的作用研究 | 第42-96页 |
2.1 实验方法与材料 | 第42-63页 |
2.1.1 细胞系及培养 | 第42页 |
2.1.2 小鼠模型 | 第42-43页 |
2.1.3 Western Blot实验 | 第43-46页 |
2.1.4 RNA的抽提及Realtime-PCR实验 | 第46-48页 |
2.1.5 细胞和组织的Co-IP实验 | 第48-49页 |
2.1.6 激酶活性检测实验 | 第49-50页 |
2.1.7 分离睾丸中的生殖细胞、流式细胞仪分选或检测和Ca~(2+)、pH检测 | 第50-51页 |
2.1.8 组织石蜡切片、免疫组化、HE染色及免疫荧光 | 第51-54页 |
2.1.9 芯片和质谱实验 | 第54页 |
2.1.10 Testis和Sperm透射电镜实验 | 第54-55页 |
2.1.11 精子活力检测实验(CASA)、精子计数、和精子获能实验 | 第55-57页 |
2.1.12 小鼠基因型鉴定 | 第57-58页 |
2.1.13 精子涂片 | 第58页 |
2.1.14 Testis、Germ cells、Sperm的G/F-Actin分离实验 | 第58-59页 |
2.1.15 RhoA/Cdc42/Rac1活性检测 | 第59页 |
2.1.16 血清中睾酮和促卵泡素含量检测 | 第59-60页 |
2.1.17 体外受精实验 | 第60页 |
2.1.18 其他实验试剂、仪器和抗体 | 第60-63页 |
2.2 实验结果 | 第63-92页 |
2.2.1 Ccnyl1与Ccny蛋白具有高度同源性 | 第63页 |
2.2.2 Ccnyl1和Ccny基因表达图谱 | 第63-65页 |
2.2.3 Ccnyl1主要表达于减数分裂的生精细胞以及圆形精子和延长形精子中 | 第65-67页 |
2.2.4 Ccnyl1定位在细胞膜上 | 第67-68页 |
2.2.5 Ccnyl1基因敲除小鼠构建及鉴定 | 第68-69页 |
2.2.6 Ccnyl1敲除小鼠表现为雄性不育 | 第69-71页 |
2.2.7 Ccnyl1-/-小鼠体重和生殖器官重量正常 | 第71-72页 |
2.2.8 Ccnyl1基因敲除小鼠的雄性激素水平正常 | 第72-73页 |
2.2.9 Ccnyl1不影响精子发生 | 第73-74页 |
2.2.10 Ccnyl1-/-小鼠精子活力下降 | 第74-75页 |
2.2.11 Ccnyl1-/-小鼠精子获能正常和体外受精能力严重下降 | 第75-76页 |
2.2.12 Ccnyl1-/-小鼠精子形态异常 | 第76-80页 |
2.2.13 Ccnyl1不通过经典的Wnt信号通路发挥作用 | 第80-81页 |
2.2.14 Cdk16在睾丸组织中特异高表达,Ccnyl1缺失导致Cdk16蛋白水平下降 | 第81-83页 |
2.2.15 Cdk16与Ccnyl1之间存在相互作用 | 第83-85页 |
2.2.16 Ccnyll和CMkl6的相互作巧影响两者的蛋白稳定性 | 第85-87页 |
2.2.17 Ccnyl1与Cdk16相互作用调节Cdk16磷酸化修饰及激酶活性 | 第87-92页 |
2.3 结论与讨论 | 第92-96页 |
参考文献 | 第96-108页 |
附录 | 第108-116页 |
致谢 | 第116-118页 |
在读期间发表的学术论文与取得的研究成果 | 第118页 |