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Ccnyl1在精子发生过程中的功能研究

摘要第5-8页
Abstract第8-11页
第1章 绪论第14-42页
    1.1 周期蛋白和周期蛋白依赖性激酶第14-22页
        1.1.1 周期蛋白和周期蛋白依赖蛋白激酶概述第14页
        1.1.2 周期蛋白和周期蛋白依赖性激酶复合物第14-15页
        1.1.3 Cyclins/CdKs蛋白复合物的功能第15-22页
    1.2 精子发生过程第22-36页
        1.2.1 小鼠雄性生殖系统第22-23页
        1.2.2 小鼠睾丸结构及生精小管的组成第23-25页
        1.2.3 精子的生成过程第25-29页
        1.2.4 精子发生的调控第29-33页
        1.2.5 不同类型的生殖细胞的特点及分选第33-36页
    1.3 精子的结构第36-40页
    1.4 受精过程及雄性不育第40-42页
第2章 Ccnyl1在精子发生过程中的作用研究第42-96页
    2.1 实验方法与材料第42-63页
        2.1.1 细胞系及培养第42页
        2.1.2 小鼠模型第42-43页
        2.1.3 Western Blot实验第43-46页
        2.1.4 RNA的抽提及Realtime-PCR实验第46-48页
        2.1.5 细胞和组织的Co-IP实验第48-49页
        2.1.6 激酶活性检测实验第49-50页
        2.1.7 分离睾丸中的生殖细胞、流式细胞仪分选或检测和Ca~(2+)、pH检测第50-51页
        2.1.8 组织石蜡切片、免疫组化、HE染色及免疫荧光第51-54页
        2.1.9 芯片和质谱实验第54页
        2.1.10 Testis和Sperm透射电镜实验第54-55页
        2.1.11 精子活力检测实验(CASA)、精子计数、和精子获能实验第55-57页
        2.1.12 小鼠基因型鉴定第57-58页
        2.1.13 精子涂片第58页
        2.1.14 Testis、Germ cells、Sperm的G/F-Actin分离实验第58-59页
        2.1.15 RhoA/Cdc42/Rac1活性检测第59页
        2.1.16 血清中睾酮和促卵泡素含量检测第59-60页
        2.1.17 体外受精实验第60页
        2.1.18 其他实验试剂、仪器和抗体第60-63页
    2.2 实验结果第63-92页
        2.2.1 Ccnyl1与Ccny蛋白具有高度同源性第63页
        2.2.2 Ccnyl1和Ccny基因表达图谱第63-65页
        2.2.3 Ccnyl1主要表达于减数分裂的生精细胞以及圆形精子和延长形精子中第65-67页
        2.2.4 Ccnyl1定位在细胞膜上第67-68页
        2.2.5 Ccnyl1基因敲除小鼠构建及鉴定第68-69页
        2.2.6 Ccnyl1敲除小鼠表现为雄性不育第69-71页
        2.2.7 Ccnyl1-/-小鼠体重和生殖器官重量正常第71-72页
        2.2.8 Ccnyl1基因敲除小鼠的雄性激素水平正常第72-73页
        2.2.9 Ccnyl1不影响精子发生第73-74页
        2.2.10 Ccnyl1-/-小鼠精子活力下降第74-75页
        2.2.11 Ccnyl1-/-小鼠精子获能正常和体外受精能力严重下降第75-76页
        2.2.12 Ccnyl1-/-小鼠精子形态异常第76-80页
        2.2.13 Ccnyl1不通过经典的Wnt信号通路发挥作用第80-81页
        2.2.14 Cdk16在睾丸组织中特异高表达,Ccnyl1缺失导致Cdk16蛋白水平下降第81-83页
        2.2.15 Cdk16与Ccnyl1之间存在相互作用第83-85页
        2.2.16 Ccnyll和CMkl6的相互作巧影响两者的蛋白稳定性第85-87页
        2.2.17 Ccnyl1与Cdk16相互作用调节Cdk16磷酸化修饰及激酶活性第87-92页
    2.3 结论与讨论第92-96页
参考文献第96-108页
附录第108-116页
致谢第116-118页
在读期间发表的学术论文与取得的研究成果第118页

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