| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 前言 | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-18页 |
| 1.1 DHAV-1病毒学分类 | 第12页 |
| 1.2 病毒理化与生物学特性 | 第12页 |
| 1.3 基因组结构 | 第12-14页 |
| 1.3.1 开放阅读框 | 第13页 |
| 1.3.2 DHAV-3 5'UTR | 第13页 |
| 1.3.3 DHAV 3'UTR | 第13-14页 |
| 1.4 基因表达蛋白及功能 | 第14页 |
| 1.4.1 结构蛋白 | 第14页 |
| 1.4.2 非结构蛋白 | 第14页 |
| 1.5 鸭肝炎病毒检测方法 | 第14-16页 |
| 1.5.1 病原分离 | 第15页 |
| 1.5.2 清学诊断技术 | 第15-16页 |
| 1.5.3 分子生物学诊断技术 | 第16页 |
| 1.6 鸭甲型肝炎的防治 | 第16-17页 |
| 1.7 展望 | 第17-18页 |
| 第二章 DHAV-3 LS株分离鉴定及遗传进化分析 | 第18-33页 |
| 2.1 实验材料与方法 | 第18-25页 |
| 2.1.1 材料 | 第18-19页 |
| 2.1.2 方法 | 第19-25页 |
| 2.2 实验结果 | 第25-31页 |
| 2.2.1 病毒分离和传代结果 | 第25页 |
| 2.2.2 LS株F2代鸭胚尿囊液ELD_(50)测定结果 | 第25-26页 |
| 2.2.3 动物回归试验结果 | 第26-28页 |
| 2.2.4 RT-PCR结果 | 第28页 |
| 2.2.5 特异性实验 | 第28-29页 |
| 2.2.6 LS分离株病毒全基因组序列扩增与质粒酶切鉴定 | 第29页 |
| 2.2.7 LS株全基因组序列测定分析 | 第29-31页 |
| 2.3 讨论 | 第31-33页 |
| 第三章 3型鸭甲肝病毒截短VP1蛋白的原核表达 | 第33-41页 |
| 3.1 材料与方法 | 第33-35页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第33页 |
| 3.1.2 方法 | 第33-35页 |
| 3.2 结果 | 第35-40页 |
| 3.2.1 对VP1蛋白氨基酸序列比对 | 第35-36页 |
| 3.2.2 LS株VP1蛋白基本性质及二级结构预测 | 第36页 |
| 3.2.3 VP1蛋白抗原性预测分析 | 第36-37页 |
| 3.2.4 重组表达质粒的构建与鉴定 | 第37-38页 |
| 3.2.5 重组蛋白的诱导表达 | 第38页 |
| 3.2.6 融合蛋白表达形式 | 第38-39页 |
| 3.2.7 融合蛋白分离纯化与Western blot分析 | 第39-40页 |
| 3.3 讨论 | 第40-41页 |
| 第四章 荧光定量PCR溶解曲线法鉴别DHAV血清型方法的初步建立及应用 | 第41-52页 |
| 4.1 实验材料与方法 | 第41-44页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第41-42页 |
| 4.1.2 方法 | 第42-44页 |
| 4.2 结果与分析 | 第44-50页 |
| 4.2.1 阳性标准品的制备 | 第44页 |
| 4.2.2 荧光定量分型PCR法的优化 | 第44-46页 |
| 4.2.3 PCR熔解曲线法检测DHAV血清型图谱 | 第46页 |
| 4.2.4 荧光定量RT-PCR标准曲线的建立及检测极限 | 第46-48页 |
| 4.2.5 荧光定量RT-PCR分型法的特异性检测结果 | 第48页 |
| 4.2.6 荧光定量RT-PCR分型法的重复性检测 | 第48-49页 |
| 4.2.7 样品检测结果 | 第49-50页 |
| 4.3 讨论 | 第50-52页 |
| 第五章 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 个人简历 | 第58-59页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第59页 |
