中文摘要 | 第3-4页 |
英文摘要 | 第4-5页 |
1 绪论 | 第10-20页 |
1.1 问题的提出与研究的意义 | 第10-14页 |
1.1.1 问题的提出 | 第10-13页 |
1.1.2 研究的意义 | 第13-14页 |
1.2 研究现状 | 第14-17页 |
1.2.1 关节软骨的结构及功能 | 第14-15页 |
1.2.2 关节软骨的国内外研究现状 | 第15-17页 |
1.3 研究目的和研究内容 | 第17-20页 |
1.3.1 本文的研究目的 | 第17页 |
1.3.2 本文的研究内容 | 第17页 |
1.3.3 本文的创新点 | 第17-20页 |
2 力生长因子(MGF)对间充质干细胞(MSCs)影响的实验研究 | 第20-34页 |
2.1 引言 | 第20-22页 |
2.2 实验材料及仪器试剂 | 第22-24页 |
2.2.1 细胞来源 | 第22页 |
2.2.2 主要实验仪器及耗材 | 第22页 |
2.2.3 主要药品及试剂 | 第22-23页 |
2.2.4 主要试剂配置 | 第23-24页 |
2.3 实验方法 | 第24-26页 |
2.3.1 实验技术路线 | 第24页 |
2.3.2 细胞培养 | 第24页 |
2.3.3 hMSCs对MGF的吸附研究 | 第24-25页 |
2.3.4 MGF对hMSCs增殖作用的影响 | 第25页 |
2.3.5 MGF对hMSCs迁移作用的研究 | 第25-26页 |
2.3.6 MGF对hMSCs软骨分化作用的影响 | 第26页 |
2.4 实验结果 | 第26-32页 |
2.4.1 hMSCs对MGF的吸附研究 | 第26-27页 |
2.4.2 MGF对hMSCs增殖作用的影响 | 第27-28页 |
2.4.3 MGF对hMSCs迁移作用的影响 | 第28-29页 |
2.4.4 MGF对hMSCs软骨分化作用的影响 | 第29-32页 |
2.5 讨论 | 第32-33页 |
2.6 本章小结 | 第33-34页 |
3 用于软骨修复的三维丝素支架的制备 | 第34-42页 |
3.1 引言 | 第34-35页 |
3.2 实验材料及仪器试剂 | 第35-36页 |
3.2.1 蚕丝 | 第35页 |
3.2.2 主要实验仪器及耗材 | 第35-36页 |
3.2.3 主要试剂药品 | 第36页 |
3.3 实验方法 | 第36-38页 |
3.3.1 丝素水溶液制备 | 第36页 |
3.3.2 丝素溶液制备及浓缩 | 第36-37页 |
3.3.3 三维(3D)丝素支架制备 | 第37页 |
3.3.4 3D支架的软硬度分析 | 第37页 |
3.3.5 3D支架表面形态结构的电子扫描显微镜分析 | 第37页 |
3.3.6 3D支架的红外光谱分析 | 第37页 |
3.3.7 3D支架的降解速率分析 | 第37-38页 |
3.3.8 3D功能支架药物可持续释放的分析 | 第38页 |
3.4 结果 | 第38-40页 |
3.4.1 3D丝素支架的制备 | 第38页 |
3.4.2 3D支架的软硬度分析 | 第38页 |
3.4.3 3D支架的表面特征 | 第38-39页 |
3.4.4 3D支架的傅里叶红外光谱分析 | 第39页 |
3.4.5 3D支架的降解速率分析 | 第39页 |
3.4.6 3D支架的药物释放效率 | 第39-40页 |
3.5 讨论 | 第40-41页 |
3.6 本章小结 | 第41-42页 |
4 功能化丝素支架移植对细胞种类和分布的作用 | 第42-52页 |
4.1 引言 | 第42页 |
4.2 主要实验试剂及耗材 | 第42-44页 |
4.2.1 实验动物 | 第42页 |
4.2.2 主要实验仪器及耗材 | 第42-43页 |
4.2.3 主要实验试剂 | 第43页 |
4.2.4 主要试剂/溶液配制 | 第43-44页 |
4.3 实验方法 | 第44-46页 |
4.3.1 皮下移植外科手术 | 第44页 |
4.3.2 体外分离细胞 | 第44页 |
4.3.3 体外细胞水平鉴定细胞种类 | 第44-45页 |
4.3.4 组织水平样品处理及细胞种类鉴定 | 第45-46页 |
4.4 结果 | 第46-49页 |
4.4.1 体外细胞分离的形态特征 | 第46页 |
4.4.2 细胞水平对分离细胞的鉴定 | 第46-48页 |
4.4.3 组织水平对细胞的鉴定 | 第48-49页 |
4.5 讨论 | 第49-50页 |
4.6 本章小结 | 第50-52页 |
5 MGF功能化丝素支架皮下移植对组织形成和分布的研究 | 第52-60页 |
5.1 引言 | 第52页 |
5.2 主要实验仪器、耗材及试剂 | 第52-53页 |
5.2.1 主要实验仪器及耗材 | 第52页 |
5.2.2 主要药品及试剂 | 第52-53页 |
5.2.3 主要试剂配方 | 第53页 |
5.3 实验方法与步骤 | 第53-55页 |
5.3.1 皮下移植外科手术的 | 第53页 |
5.3.2 取材及样品处理 | 第53页 |
5.3.3 HE染色对丝素支架皮下移植后的组织分析 | 第53-54页 |
5.3.4 Safranin O/Fast green染色对皮下新生组织中类软骨基质的分布 | 第54页 |
5.3.5 Masson`s染色对皮下新生组织中纤维种类的鉴定 | 第54-55页 |
5.4 结果 | 第55-58页 |
5.4.1 取材组织形态观察 | 第55页 |
5.4.2 皮下新生组织的组成分布 | 第55-56页 |
5.4.3 皮下新生组织的鉴定 | 第56-58页 |
5.5 讨论 | 第58页 |
5.6 本章小结 | 第58-60页 |
6 MGF功能化丝素支架对关节软骨缺损修复的研究 | 第60-76页 |
6.1 引言 | 第60页 |
6.2 主要实验仪器、耗材及试剂 | 第60-61页 |
6.2.1 主要实验仪器及耗材 | 第60-61页 |
6.2.2 主要药品及试剂 | 第61页 |
6.2.3 主要试剂/溶液配方 | 第61页 |
6.3 实验方法与步骤 | 第61-65页 |
6.3.1 关节软骨缺损模型 | 第61-62页 |
6.3.2 取材及样品处理 | 第62页 |
6.3.3 免疫荧光法对材料支架免疫原性的检测 | 第62-63页 |
6.3.4 免疫荧光法对细胞种类的鉴定 | 第63页 |
6.3.5 原位组织学评估 | 第63-65页 |
6.3.6 免疫荧光法对关节软骨修复的检测 | 第65页 |
6.4 实验结果 | 第65-74页 |
6.4.1 兔关节软骨缺损模型的建立 | 第65-66页 |
6.4.2 取材组织的形态观察 | 第66-67页 |
6.4.3 材料支架免疫原性的检测 | 第67页 |
6.4.4 关节材料支架内细胞种类的鉴定 | 第67-68页 |
6.4.5 关节软骨的原位修复评估 | 第68-74页 |
6.5 讨论 | 第74-75页 |
6.6 本章小结 | 第75-76页 |
7 结论与展望 | 第76-78页 |
7.1 本文主要结论 | 第76页 |
7.2 后续工作展望 | 第76-78页 |
致谢 | 第78-80页 |
参考文献 | 第80-98页 |