| 中文摘要 | 第4-8页 |
| ABSTRACT | 第8-12页 |
| 综述:心肌程序分化过程中的信号通路密码 | 第15-24页 |
| 1 前言 | 第15页 |
| 2 转化生长因子(Tgf-β)信号通路 | 第15-17页 |
| 3 wnt信号通路 | 第17-19页 |
| 4 Notch信号通路 | 第19-20页 |
| 5 Hedgehog信号通路 | 第20-21页 |
| 6 MAPK信号通路 | 第21页 |
| 7 其他信号通路 | 第21-22页 |
| 8 小结 | 第22-24页 |
| 缩略词表 | 第24-26页 |
| 1 背景 | 第26-30页 |
| 2 实验材料 | 第30-35页 |
| 2.1 细胞 | 第30页 |
| 2.2 质粒 | 第30页 |
| 2.3 引物及合成序列 | 第30-32页 |
| 2.4 试剂和材料 | 第32-33页 |
| 2.4.1 抗体 | 第32页 |
| 2.4.2 试剂盒 | 第32页 |
| 2.4.3 工具酶、分子量标准 | 第32页 |
| 2.4.4 其他试剂和材料 | 第32-33页 |
| 2.5 溶液的配制 | 第33-34页 |
| 2.5.1 Western blotting试剂 | 第33页 |
| 2.5.2 免疫荧光试剂 | 第33-34页 |
| 2.6 仪器设备 | 第34-35页 |
| 3 实验方法 | 第35-41页 |
| 3.1 细胞培养和细胞诱导分化 | 第35页 |
| 3.1.1 细胞培养 | 第35页 |
| 3.1.2 ES细胞定向诱导向心肌细胞的分化 | 第35页 |
| 3.2 细胞转染 | 第35-36页 |
| 3.3 Real-time RT-PCR | 第36-37页 |
| 3.3.1 细胞总RNA提取 | 第36页 |
| 3.3.2 逆转录反应合成cDNA | 第36-37页 |
| 3.3.3 Real-time RT-PCR | 第37页 |
| 3.4 Western blotting | 第37-39页 |
| 3.4.1 细胞总蛋白提取 | 第37-38页 |
| 3.4.2 蛋白浓度测定 | 第38页 |
| 3.4.3 蛋白免疫印迹 | 第38-39页 |
| 3.5 细胞免疫荧光 | 第39-40页 |
| 3.6 质粒扩增 | 第40-41页 |
| 3.6.1 培养基配制 | 第40页 |
| 3.6.2 转化 | 第40页 |
| 3.6.3 挑单克隆摇菌 | 第40-41页 |
| 3.6.4 质粒提取 | 第41页 |
| 3.7 统计学分析 | 第41页 |
| 4 实验结果 | 第41-55页 |
| 4.1 心肌细胞分化模型的建立 | 第41-44页 |
| 4.1.1 小鼠胚胎干细胞(R1)诱导为心肌细胞 | 第41-42页 |
| 4.1.2 免疫荧光检测诱导细胞α-肌辅蛋白(α-actinin)的表达 | 第42页 |
| 4.1.3 心肌特异性分子表达检测 | 第42-44页 |
| 4.2 内质网应激相关基因以及乙酰化修饰相关基因检测 | 第44-46页 |
| 4.3 4-苯基丁酸(4-PBA)对ESCs (R1)向心肌分化的影响 | 第46-51页 |
| 4.3.1 不同阶段加药时间的确定 | 第46页 |
| 4.3.2 早期加4-PBA对小鼠ESCs (R1)向心肌分化的影响 | 第46页 |
| 4.3.3 中期加4-PBA对小鼠ESCs (R1)向心肌分化的影响 | 第46-49页 |
| 4.3.4 晚期加4-PBA对小鼠ESCs (R1)向心肌分化的影响 | 第49-50页 |
| 4.3.5 不同时间段加4-PBA对MF20的影响 | 第50-51页 |
| 4.4 4-PBA影响小鼠ESCs (R1)向心肌细胞分化的作用机制 | 第51-55页 |
| 4.4.1 内质网应激激动剂衣霉素(TM)对心肌分化的影响 | 第51-53页 |
| 4.4.2 组蛋白去乙酰化酶抑制剂丁酸钠(NaB)对心肌分化的影响 | 第53-54页 |
| 4.4.3 早期转染内质网应激标志分子pRK-ATF4对心肌分化的影响 | 第54-55页 |
| 5. 讨论 | 第55-58页 |
| 6. 结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第71-73页 |
