摘要 | 第9-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
1 引言 | 第12-24页 |
1.1 马铃薯Y病毒属病毒的危害 | 第12-13页 |
1.2 马铃薯Y病毒属病毒基因组结构 | 第13-14页 |
1.3 HC-Pro的功能 | 第14-23页 |
1.3.1 抑制RNA沉默 | 第14-17页 |
1.3.2 参与病毒的致病力 | 第17-21页 |
1.3.3 参与病毒的协生作用 | 第21-23页 |
1.4 利用交叉保护作用防治植物病毒病 | 第23页 |
1.5 本研究的目的及意义 | 第23-24页 |
2 材料与方法 | 第24-41页 |
2.1 实验材料 | 第24-25页 |
2.1.1 植物材料 | 第24页 |
2.1.2 菌株、质粒 | 第24页 |
2.1.3 酶与试剂 | 第24-25页 |
2.1.4 寡聚核苷酸引物 | 第25页 |
2.1.5 主要实验仪器 | 第25页 |
2.2 实验方法 | 第25-41页 |
2.2.1 植物总RNA提取 | 第25-26页 |
2.2.2 反转录PCR | 第26页 |
2.2.3 突变引物设计 | 第26-28页 |
2.2.4 突变体构建 | 第28-32页 |
2.2.5 基因枪接种 | 第32页 |
2.2.6 农杆菌感受态的制备及转化 | 第32-33页 |
2.2.7 农杆菌共浸润试验及荧光观察 | 第33-34页 |
2.2.8 实时荧光定量PCR | 第34-36页 |
2.2.9 Western blot | 第36-39页 |
2.2.10 RNA沉默抑制活性检测 | 第39-41页 |
2.2.11 序列测定 | 第41页 |
3 实验结果 | 第41-61页 |
3.1 确定TVBMV自发突变体中起作用的突变位点 | 第41-44页 |
3.2 TVBMV R126L突变体影响病毒RNA沉默抑制活性 | 第44-46页 |
3.3 马铃薯Y病毒属病毒HC-Pro保守基序 | 第46-47页 |
3.4 PVY K124L突变体影响病毒致病力 | 第47-49页 |
3.5 PVY K124L突变体影响病毒RNA沉默抑制活性 | 第49-50页 |
3.6 TVBMV HC-Pro IGDR基序影响病毒致病力 | 第50-54页 |
3.7 TVBMV HC-Pro IGDR基序影响病毒RNA沉默抑制活性 | 第54-56页 |
3.8 TVBMV R126L突变体影响病毒与PVX协生 | 第56-59页 |
3.9 TVBMV R126L和PVY K124L的交叉保护效果 | 第59-61页 |
4 讨论 | 第61-63页 |
5 结论 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-71页 |
致谢 | 第71-72页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第72页 |