| 摘要 | 第8-9页 |
| 英文摘要 | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第11-20页 |
| 1.1 低温对植物的伤害 | 第11-13页 |
| 1.1.1 低温对植物的伤害与机制 | 第11-12页 |
| 1.1.2 植物响应低温的生理生化变化 | 第12页 |
| 1.1.3 植物响应低温的转录因子 | 第12-13页 |
| 1.2 miRNA对植物抗寒性的影响 | 第13-16页 |
| 1.2.1 miRNA简介 | 第13-14页 |
| 1.2.2 miRNA与植物低温胁迫 | 第14-15页 |
| 1.2.3 miRNA与靶基因的研究方法 | 第15-16页 |
| 1.3 小麦遗传转化的研究 | 第16-18页 |
| 1.3.1 冬小麦抗寒性的研究 | 第16-17页 |
| 1.3.2 小麦遗传转化体系的研究 | 第17-18页 |
| 1.3.3 小麦遗传转化研究目前存在的问题与展望 | 第18页 |
| 1.4 本研究的目的和意义 | 第18-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-31页 |
| 2.1 试验材料 | 第20页 |
| 2.2 测试设计与取样 | 第20页 |
| 2.3 实验仪器与试剂 | 第20-21页 |
| 2.3.1 实验仪器 | 第20-21页 |
| 2.3.2 主要试剂 | 第21页 |
| 2.4 试验方法 | 第21-30页 |
| 2.4.1 生物信息学数据库和软件 | 第21-22页 |
| 2.4.2 4 种miRNAs的克隆与转化 | 第22-26页 |
| 2.4.3 miRNA及靶基因的表达模式分析 | 第26-28页 |
| 2.4.4 pre-tae-miR156在东农冬麦1号中过表达 | 第28-29页 |
| 2.4.5 实验数据分析 | 第29-30页 |
| 2.5 技术路线 | 第30-31页 |
| 3 结果与分析 | 第31-44页 |
| 3.1 4 种miRNA靶基因的功能预测 | 第31页 |
| 3.2 4 种tae-pre-miRNA的克隆及过表达载体的构建 | 第31-35页 |
| 3.2.1 4 种tae-pre-miRNA的克隆 | 第31-33页 |
| 3.2.2 4 种tae-pre-miRNA植物表达载体的构建 | 第33-34页 |
| 3.2.3 4 种tae-pre-miRNA重组质粒的检测 | 第34-35页 |
| 3.3 miR156在东农冬麦1号中过表达 | 第35-38页 |
| 3.3.1 冬小麦成熟胚组织培养 | 第35页 |
| 3.3.2 冬小麦愈伤组织遗传转化共培养 | 第35-36页 |
| 3.3.3 卡那霉素浓度的筛选 | 第36页 |
| 3.3.4 小麦转化植株的获得与外源基因检测 | 第36-38页 |
| 3.4 miRNA及靶基因在低温胁迫下的表达模式 | 第38-44页 |
| 3.4.1 低温胁迫下冬小麦中4种miRNA及靶基因的表达模式 | 第38-41页 |
| 3.4.2 低温胁迫下拟南芥中4种miRNA及靶基因的表达模式 | 第41-44页 |
| 4 讨论 | 第44-48页 |
| 4.1 miRNAs及其靶基因在低温下的功能分析 | 第44-47页 |
| 4.1.1 miR156及其靶基因与低温胁迫 | 第44页 |
| 4.1.2 miR160及其靶基因与低温胁迫 | 第44-45页 |
| 4.1.3 miR398及其靶基因与低温胁迫 | 第45页 |
| 4.1.4 miR444b及其靶基因与低温胁迫 | 第45-46页 |
| 4.1.5 4种miRNA与其靶基可能存在的调控关系 | 第46-47页 |
| 4.2 农杆菌介导的小麦遗传转化 | 第47-48页 |
| 4.2.1 抗生素浓度对转化效率的影响 | 第47页 |
| 4.2.2 抗性再生植株的获得 | 第47-48页 |
| 5 结论 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-56页 |
| 附录 | 第56-57页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第57页 |
