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基于噬菌体随机肽库研制新型酿酒酵母表面吸附剂

摘要第4-5页
ABSTRACT第5-6页
1 引言第9-17页
    1.1 重金属镉污染的研究进展第9-10页
    1.2 噬菌体展示肽库第10-13页
        1.2.1 肽库的分类以及构建原理第10-11页
        1.2.2 噬菌体展示文库的筛选第11-12页
        1.2.3 噬菌体展示技术的发展与应用第12-13页
    1.3 酿酒酵母(S.cerevisiae)表面展示系统以及其固定化第13-16页
        1.3.1 酿酒酵母(S.cerevisiae)表面展示系统第13-14页
        1.3.2 酿酒酵母(S. cerevisiae)的固定化第14-15页
        1.3.3 细胞固定化技术的应用第15-16页
    1.4 立题依据和研究意义第16-17页
2 材料与方法第17-31页
    2.1 实验材料第17-22页
        2.1.1 实验菌株第17页
        2.1.2 供试质粒第17-18页
        2.1.3 实验所用引物第18页
        2.1.4 培养基第18-19页
        2.1.6 试剂第19-22页
    2.2 实验方法第22-31页
        2.2.1 镉离子螯合数脂的制备第22-23页
        2.2.2 噬菌体文库的生物淘洗第23-24页
        2.2.3 洗脱液的扩增第24-25页
        2.2.4 噬菌体滴度的测定第25页
        2.2.5 噬菌斑的扩增第25-26页
        2.2.6 酿酒酵母(S. cerevisiae)EBY100生长曲线的测定第26页
        2.2.7 酿酒酵母(S. cerevisiae) EBY100热击感受态的制备第26页
        2.2.8 酿酒酵母(S. cerevisiae)的热激转化第26-27页
        2.2.9 大肠杆菌(E.coli) 116热击感受态的制备第27页
        2.2.10 大肠杆菌(E.coli)质粒小量抽提第27-28页
        2.2.11 验证试验第28页
        2.2.12 DNA的纯化回收第28-29页
        2.2.13 镉离子标准曲线的测定第29页
        2.2.14 吸附效率的测定第29-30页
        2.2.15 酿酒酵母(S.cerevisiae)的固定化第30-31页
3 结果与分析第31-45页
    3.1 噬菌体肽库的筛选第31-35页
        3.1.1 螯合树脂的洗涤第31页
        3.1.2 镉离子螯合树脂的制备第31-32页
        3.1.3 噬菌体滴度的测定第32-35页
        3.1.4 特异性噬菌体结合肽的序列分析第35页
    3.2 酿酒酵母(S. cerevisiae) EBY100的转化第35-38页
        3.2.1 酿酒酵母(S.cerevisiae)生长曲线的测定第35-36页
        3.2.2 重组pYD1质粒构建及验证结果第36-37页
        3.2.3 重组pYD1质粒热激转酿酒酵母(S. cerevisiae)第37-38页
    3.3 重组酿酒酵母(S.cerevisiae)吸附效率的测定第38-39页
        3.3.1 镉离子标准曲线的测定第38页
        3.3.2 吸附效率测定第38-39页
    3.4 酿酒酵母(S. cerevisiae)固定化条件的研究第39-42页
        3.4.1 氯化钙浓度对固定化S.cerevisiae吸附能力的影响第39-40页
        3.4.2 海藻酸钠浓度对固定化S. cerevisiae吸附能力的影响第40页
        3.4.3 温度对固定化酿酒酵母(S.cerevisiae)吸附能力的影响第40-41页
        3.4.4 酿酒酵母(S.cerevisiae)固定化条件优化第41-42页
    3.5 固定化的酿酒酵母(S. cerevisiae)及其镉离子吸附效率测定第42-45页
        3.5.1 固定化酿酒酵母(S. cerevisiae)第42-43页
        3.5.2 对镉离子吸附效率测定第43-45页
4 结论第45-47页
5 讨论第47-49页
6 展望第49-51页
参考文献第51-57页
致谢第57-59页
攻读学位期间发表的论文第59-61页

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