摘要 | 第4-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
1 引言 | 第9-17页 |
1.1 重金属镉污染的研究进展 | 第9-10页 |
1.2 噬菌体展示肽库 | 第10-13页 |
1.2.1 肽库的分类以及构建原理 | 第10-11页 |
1.2.2 噬菌体展示文库的筛选 | 第11-12页 |
1.2.3 噬菌体展示技术的发展与应用 | 第12-13页 |
1.3 酿酒酵母(S.cerevisiae)表面展示系统以及其固定化 | 第13-16页 |
1.3.1 酿酒酵母(S.cerevisiae)表面展示系统 | 第13-14页 |
1.3.2 酿酒酵母(S. cerevisiae)的固定化 | 第14-15页 |
1.3.3 细胞固定化技术的应用 | 第15-16页 |
1.4 立题依据和研究意义 | 第16-17页 |
2 材料与方法 | 第17-31页 |
2.1 实验材料 | 第17-22页 |
2.1.1 实验菌株 | 第17页 |
2.1.2 供试质粒 | 第17-18页 |
2.1.3 实验所用引物 | 第18页 |
2.1.4 培养基 | 第18-19页 |
2.1.6 试剂 | 第19-22页 |
2.2 实验方法 | 第22-31页 |
2.2.1 镉离子螯合数脂的制备 | 第22-23页 |
2.2.2 噬菌体文库的生物淘洗 | 第23-24页 |
2.2.3 洗脱液的扩增 | 第24-25页 |
2.2.4 噬菌体滴度的测定 | 第25页 |
2.2.5 噬菌斑的扩增 | 第25-26页 |
2.2.6 酿酒酵母(S. cerevisiae)EBY100生长曲线的测定 | 第26页 |
2.2.7 酿酒酵母(S. cerevisiae) EBY100热击感受态的制备 | 第26页 |
2.2.8 酿酒酵母(S. cerevisiae)的热激转化 | 第26-27页 |
2.2.9 大肠杆菌(E.coli) 116热击感受态的制备 | 第27页 |
2.2.10 大肠杆菌(E.coli)质粒小量抽提 | 第27-28页 |
2.2.11 验证试验 | 第28页 |
2.2.12 DNA的纯化回收 | 第28-29页 |
2.2.13 镉离子标准曲线的测定 | 第29页 |
2.2.14 吸附效率的测定 | 第29-30页 |
2.2.15 酿酒酵母(S.cerevisiae)的固定化 | 第30-31页 |
3 结果与分析 | 第31-45页 |
3.1 噬菌体肽库的筛选 | 第31-35页 |
3.1.1 螯合树脂的洗涤 | 第31页 |
3.1.2 镉离子螯合树脂的制备 | 第31-32页 |
3.1.3 噬菌体滴度的测定 | 第32-35页 |
3.1.4 特异性噬菌体结合肽的序列分析 | 第35页 |
3.2 酿酒酵母(S. cerevisiae) EBY100的转化 | 第35-38页 |
3.2.1 酿酒酵母(S.cerevisiae)生长曲线的测定 | 第35-36页 |
3.2.2 重组pYD1质粒构建及验证结果 | 第36-37页 |
3.2.3 重组pYD1质粒热激转酿酒酵母(S. cerevisiae) | 第37-38页 |
3.3 重组酿酒酵母(S.cerevisiae)吸附效率的测定 | 第38-39页 |
3.3.1 镉离子标准曲线的测定 | 第38页 |
3.3.2 吸附效率测定 | 第38-39页 |
3.4 酿酒酵母(S. cerevisiae)固定化条件的研究 | 第39-42页 |
3.4.1 氯化钙浓度对固定化S.cerevisiae吸附能力的影响 | 第39-40页 |
3.4.2 海藻酸钠浓度对固定化S. cerevisiae吸附能力的影响 | 第40页 |
3.4.3 温度对固定化酿酒酵母(S.cerevisiae)吸附能力的影响 | 第40-41页 |
3.4.4 酿酒酵母(S.cerevisiae)固定化条件优化 | 第41-42页 |
3.5 固定化的酿酒酵母(S. cerevisiae)及其镉离子吸附效率测定 | 第42-45页 |
3.5.1 固定化酿酒酵母(S. cerevisiae) | 第42-43页 |
3.5.2 对镉离子吸附效率测定 | 第43-45页 |
4 结论 | 第45-47页 |
5 讨论 | 第47-49页 |
6 展望 | 第49-51页 |
参考文献 | 第51-57页 |
致谢 | 第57-59页 |
攻读学位期间发表的论文 | 第59-61页 |