摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
英文缩略词表 | 第12-13页 |
第一章 引言 | 第13-15页 |
第二章 研究内容 | 第15-19页 |
2.1 研究目的和意义 | 第15页 |
2.2 研究方法、思路 | 第15-16页 |
2.2.1 研究方法 | 第15页 |
2.2.2 研究思路 | 第15-16页 |
2.3 技术路线 | 第16-19页 |
2.3.1 miR-1271 在SKOV3及SKOV3/DDP细胞株之间差异表达的研究 | 第16页 |
2.3.2 miR-1271 对卵巢癌细胞耐药表型的影响 | 第16-17页 |
2.3.3 miR-1271 调控卵巢癌细胞耐药表型的分子机制研究 | 第17-19页 |
第三章 miR-1271 在SKOV3及SKOV3/DDP细胞株之间差异表达的研究 | 第19-27页 |
3.1 实验材料与仪器 | 第19-21页 |
3.1.1 细胞株 | 第19页 |
3.1.2 引物 | 第19页 |
3.1.3 主要试剂 | 第19-20页 |
3.1.4 主要仪器 | 第20页 |
3.1.5 主要溶液的配置 | 第20-21页 |
3.2 实验方法 | 第21-25页 |
3.2.1 细胞的培养与传代 | 第21-22页 |
3.2.2 细胞冻存与复苏 | 第22页 |
3.2.3 细胞总RNA提取 | 第22-23页 |
3.2.4 RNA浓度测定 | 第23页 |
3.2.5 miRNA的逆转录 | 第23-24页 |
3.2.6 Real-time PCR扩增 | 第24-25页 |
3.2.7 统计分析 | 第25页 |
3.3 实验结果 | 第25-26页 |
3.3.1 卵巢癌SKOV3/DDP细胞和卵巢癌SKOV3中miR-1271 的表达差异 | 第25-26页 |
3.4 讨论 | 第26-27页 |
第四章 miR-1271 对卵巢癌细胞耐药表型的影响的研究 | 第27-34页 |
4.1 实验仪器与材料 | 第27-28页 |
4.1.1 细胞株 | 第27页 |
4.1.2 寡核苷酸模拟物及对照序列 | 第27页 |
4.1.3 主要试剂 | 第27-28页 |
4.1.4 主要仪器 | 第28页 |
4.2 实验方法 | 第28-30页 |
4.2.1 细胞转染 | 第28-29页 |
4.2.2 体外药物敏感性实验(MTT) | 第29页 |
4.2.3 流式细胞术检测耐药细胞的凋亡 | 第29-30页 |
4.2.4 统计分析 | 第30页 |
4.3 实验结果 | 第30-32页 |
4.3.1 上调miR-1271 对SKOV3/DDP耐药性的影响 | 第30-31页 |
4.3.2 上调miR-1271 对SKOV3/DDP细胞凋亡的影响 | 第31-32页 |
4.4 讨论 | 第32-34页 |
第五章 miR-1271 调控卵巢癌细胞耐药表型的分子机制研究 | 第34-46页 |
5.1 实验材料与仪器 | 第34-37页 |
5.1.1 细胞株 | 第34页 |
5.1.2 寡核苷酸模拟物及对照序列 | 第34页 |
5.1.3 主要试剂 | 第34-35页 |
5.1.4 主要仪器 | 第35页 |
5.1.5 各种溶液的配置 | 第35-37页 |
5.2 实验方法 | 第37-41页 |
5.2.1 miR-1271 调控卵巢癌耐药相关靶基因的预测 | 第37-38页 |
5.2.2 荧光素酶实验 | 第38-39页 |
5.2.3 总蛋白提取 | 第39-40页 |
5.2.4 免疫印迹(Western blot) | 第40-41页 |
5.2.5 统计分析 | 第41页 |
5.3 实验结果 | 第41-43页 |
5.3.1 上调miR-1271 对SKOV3/DDP细胞荧光素酶质粒活性的影响 | 第41-42页 |
5.3.2 抗凋亡蛋白XIAP在卵巢癌SKOV3/DDP细胞中的表达 | 第42-43页 |
5.3.3 上调miR-1271 对抗凋亡蛋白XIAP表达水平的影响 | 第43页 |
5.4 讨论 | 第43-46页 |
第六章 主要结论和展望 | 第46-47页 |
6.1 主要结论 | 第46页 |
6.2 展望 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-50页 |
综述 miRNA与卵巢癌及卵巢癌耐药 | 第50-61页 |
参考文献 | 第57-61页 |
致谢 | 第61-62页 |
攻读硕士学位期间发表论文及学术交流 | 第62页 |