| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-19页 |
| 1.1 前言 | 第10页 |
| 1.2 不饱和脂肪酸的生理功能 | 第10-11页 |
| 1.3 牛乳中脂肪酸的简介 | 第11-12页 |
| 1.3.1 牛乳中脂肪酸的组成特点 | 第11页 |
| 1.3.2 牛乳中脂肪酸的来源 | 第11-12页 |
| 1.4 脂肪酸转运蛋白简介 | 第12-16页 |
| 1.4.1 脂肪酸转运蛋白家族 | 第12-14页 |
| 1.4.2 脂肪酸转位酶 | 第14-15页 |
| 1.4.3 膜脂肪酸结合蛋白 | 第15-16页 |
| 1.4.4 Caveolin-1 蛋白 | 第16页 |
| 1.5 乳腺上皮细胞原代培养简述 | 第16-18页 |
| 1.5.1 乳腺上皮细胞研究概况 | 第16-17页 |
| 1.5.2 牛乳腺上皮细胞的培养进展 | 第17-18页 |
| 1.6 研究目的与意义 | 第18-19页 |
| 第二章 转运蛋白CD36编码区序列克隆及生物信息学分析 | 第19-34页 |
| 2.1 材料与方法 | 第19-24页 |
| 2.1.1 试验动物 | 第19页 |
| 2.1.2 菌种与质粒 | 第19页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第19页 |
| 2.1.4 试剂及配制 | 第19-20页 |
| 2.1.5 CD36基因克隆 | 第20-24页 |
| 2.2 结果 | 第24-32页 |
| 2.2.1 奶牛乳腺总RNA的提取 | 第24-25页 |
| 2.2.2 RT-PCR扩增CD36基因中间片段 | 第25-26页 |
| 2.2.3 CD36基因序列分析 | 第26-32页 |
| 2.3 讨论 | 第32-34页 |
| 第三章 奶牛乳腺上皮细胞原代培养及鉴定 | 第34-46页 |
| 3.1 材料与方法 | 第34-40页 |
| 3.1.1 细胞来源 | 第34页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第34页 |
| 3.1.3 试剂及配制 | 第34-35页 |
| 3.1.4 上皮细胞分离培养 | 第35-37页 |
| 3.1.5 乳腺上皮细胞的鉴定 | 第37-40页 |
| 3.2 结果 | 第40-44页 |
| 3.2.1 组织块培养法 | 第40-41页 |
| 3.2.2 胶原酶Ⅱ培养法 | 第41-42页 |
| 3.2.3 乳腺上皮细胞免疫化学鉴定 | 第42-43页 |
| 3.2.4 RT-PCR法鉴定上皮细胞酪蛋白 | 第43-44页 |
| 3.3 讨论 | 第44-46页 |
| 第四章 CD36基因的亚细胞定位 | 第46-53页 |
| 4.1 材料与方法 | 第46-50页 |
| 4.1.1 质粒 | 第46页 |
| 4.1.2 主要仪器 | 第46页 |
| 4.1.3 试剂及配制 | 第46页 |
| 4.1.4 融合质粒CD36-pEGFP-C3的构建 | 第46-50页 |
| 4.1.5 转染乳腺上皮细胞 | 第50页 |
| 4.2 结果与分析 | 第50-51页 |
| 4.2.1 含限制性内切酶CD36目的片段 | 第50-51页 |
| 4.2.2 融合质粒双酶切检测 | 第51页 |
| 4.2.3 荧光显微镜结果 | 第51页 |
| 4.3 讨论 | 第51-53页 |
| 第五章 牛乳腺上皮细胞的脂肪酸转运研究 | 第53-62页 |
| 5.1 材料与方法 | 第53-57页 |
| 5.1.1 试验材料 | 第53页 |
| 5.1.2 油酸转运的饱和性(时间依赖性)试验 | 第53-54页 |
| 5.1.3 油酸转运饱和性(浓度依赖性)试验 | 第54-55页 |
| 5.1.4 不同转运抑制剂对牛乳腺上皮油酸和亚油酸跨膜转运的影响 | 第55-57页 |
| 5.2 结果与分析 | 第57-60页 |
| 5.2.1 油酸转运饱和性(时间依赖性)结果 | 第57-58页 |
| 5.2.2 油酸转运饱和性(浓度依赖性)结果 | 第58-59页 |
| 5.2.3 不同转运抑制剂对乳腺上皮油酸和亚油酸转运的影响 | 第59-60页 |
| 5.3 讨论 | 第60-62页 |
| 第六章 结论 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-70页 |
| 附录 | 第70-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 作者简介 | 第73页 |
