摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-10页 |
文献综述 | 第11-20页 |
1 隐孢子虫简介 | 第11-13页 |
2 隐孢子虫的分类学和遗传多态性 | 第13-14页 |
3 隐孢子虫的分子鉴定方法 | 第14-16页 |
4 野生动物隐孢子虫研究现状 | 第16-17页 |
5 骆驼隐孢子虫研究进展 | 第17-18页 |
6 竹鼠隐孢子虫研究进展 | 第18-20页 |
第一章 野生动物隐孢子虫的检测与分离 | 第20-24页 |
1 材料和方法 | 第20-21页 |
1.1 主要试剂和仪器 | 第20页 |
1.2 粪便样品采集 | 第20页 |
1.3 检测方法 | 第20-21页 |
2 实验结果 | 第21-22页 |
2.1 隐孢子虫检出率 | 第21-22页 |
2.2 隐孢子虫卵囊形态观察 | 第22页 |
3 讨论 | 第22-24页 |
第二章 骆驼源隐孢子虫种系发育分析和动物交叉感染实验 | 第24-44页 |
1 材料和方法 | 第24-32页 |
1.1 主要试剂和仪器 | 第24-25页 |
1.2 骆驼源隐孢子虫样品收集和处理 | 第25页 |
1.3 卵囊DNA提取 | 第25-27页 |
1.4 18S rRNA、COWP、CpA135基因PCR扩增 | 第27-29页 |
1.4.1 PCR引物的设计与合成 | 第27页 |
1.4.2 PCR反应体系与反应条件 | 第27-28页 |
1.4.3 PCR扩增产物检测 | 第28-29页 |
1.4.4 PCR扩增产物测序及序列提交 | 第29页 |
1.5 MLST技术亚型鉴定 | 第29-31页 |
1.5.1 PCR引物设计与合成 | 第29-30页 |
1.5.2 PCR反应体系与反应条件 | 第30-31页 |
1.5.3 PCR扩增产物检测及测序 | 第31页 |
1.6 序列分析及进化树的构建 | 第31页 |
1.6.1 Genbank相关序列搜索与下载 | 第31页 |
1.6.2 进化树的构建 | 第31页 |
1.7 骆驼源隐孢子虫的动物交叉感染试验 | 第31-32页 |
1.7.1 交叉感染实验动物 | 第31-32页 |
1.7.2 接种方法与接种剂量 | 第32页 |
1.7.3 粪便监测 | 第32页 |
2 实验结果 | 第32-42页 |
2.1 PCR扩增产物结果 | 第32-36页 |
2.2 测序结果 | 第36页 |
2.3 交叉感染实验结果 | 第36-37页 |
2.4 同源性分析 | 第37-38页 |
2.5 系统发育分析 | 第38-42页 |
3 讨论 | 第42-44页 |
第三章 竹鼠源隐孢子虫的分离鉴定和种系发育分析 | 第44-63页 |
1 材料和方法 | 第44-48页 |
1.1 主要试剂和仪器 | 第44页 |
1.2 竹鼠源隐孢子虫样品收集和处理 | 第44页 |
1.3 卵囊DNA提取 | 第44页 |
1.4 18S rRNA、COWP、HSP70、CpA135、gp60、actin基因PCR扩增 | 第44-48页 |
1.4.1 PCR引物的设计与合成 | 第44-45页 |
1.4.2 PCR反应体系及与反应条件 | 第45页 |
1.4.3 PCR扩增产物检测 | 第45页 |
1.4.4 PCR扩增产物测序 | 第45页 |
1.4.5 actin位点克隆 | 第45-48页 |
1.4.6 序列分析及进化树的构建 | 第48页 |
2 实验结果 | 第48-61页 |
2.1 PCR扩增产物结果 | 第48-51页 |
2.2 actin克隆结果 | 第51-52页 |
2.3 测序结果 | 第52页 |
2.4 同源性分析 | 第52-55页 |
2.5 系统发育分析 | 第55-61页 |
3 讨论 | 第61-63页 |
参考文献 | 第63-69页 |
致谢 | 第69-71页 |
附录一 | 第71-73页 |
附录二 | 第73-83页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第83页 |