摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-7页 |
英文缩略表 | 第10-12页 |
第1章 前言 | 第12-14页 |
第2章 材料与方法 | 第14-25页 |
2.1 实验材料 | 第14-16页 |
2.1.1 实验细胞 | 第14页 |
2.1.2 主要试剂 | 第14-15页 |
2.1.3 主要仪器设备 | 第15-16页 |
2.2 实验方法 | 第16-25页 |
2.2.1 重组质粒构建及鉴定 | 第16页 |
2.2.2 Ishikawa细胞的培养 | 第16-17页 |
2.2.3 pGPU6/GFP/neo-DJ-1-shRNA转染Ishikawa细胞 | 第17-18页 |
2.2.4 Real time-PCR检测干扰质粒对DJ-1 mRNA表达的影响 | 第18-21页 |
2.2.5 Western blot检测pGPU6/GFP/neo-DJ-1-sh-RNA对DJ-1蛋白表达的影响 | 第21-22页 |
2.2.6 MTT检测pGPU6/GFP/neo-DJ-1-sh-RNA 1对Ishikawa细胞增殖的抑制作用 | 第22-24页 |
2.2.7 Annexin V/PI双染流式细胞术检测各组Ishikawa细胞凋亡率的改变 | 第24页 |
2.2.8 统计学处理 | 第24-25页 |
第3章 结果 | 第25-33页 |
3.1 重组质粒测序鉴定 | 第25页 |
3.2 重组质粒转染Ishikawa细胞 | 第25页 |
3.3 重组质粒对Ishikawa细胞DJ-1 mRNA表达的影响 | 第25-28页 |
3.3.1 RNA纯度鉴定 | 第25页 |
3.3.2 RNA完整性鉴定 | 第25-26页 |
3.3.3 Real time-PCR测定DJ-1 mRNA的熔解曲线 | 第26页 |
3.3.4 Real time-PCR测定DJ-1 mRNA的扩增曲线 | 第26-27页 |
3.3.5 重组质粒对Ishikawa细胞DJ-1 mRNA表达的影响 | 第27-28页 |
3.4 重组质粒对Ishikawa细胞DJ-1蛋白表达的影响 | 第28-29页 |
3.5 pGPU6/GFP/neo-DJ-1-shRNAl对Ishikawa细胞增殖的抑制作用 | 第29-30页 |
3.6 Annexin V/PI双染流式细胞术检测pGPU6/GFP/neo-DJ-1-shR-NA1对Ishikawa细胞的凋亡率的影响 | 第30-33页 |
第4章 讨论 | 第33-36页 |
第5章 结论 | 第36-37页 |
致谢 | 第37-38页 |
参考文献 | 第38-40页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第40-41页 |
综述 | 第41-44页 |
参考文献 | 第43-44页 |