| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 符号说明 | 第9-10页 |
| 第1章 前言 | 第10-18页 |
| 1.1 叶酸 | 第10-11页 |
| 1.2 叶酸受体α | 第11-14页 |
| 1.3 叶酸受体α与结直肠癌风险 | 第14-18页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第18-36页 |
| 2.1 实验材料与试剂 | 第18-22页 |
| 2.1.1 细胞株及其选取 | 第18页 |
| 2.1.2 主要实验仪器设备 | 第18-19页 |
| 2.1.3 主要实验试剂 | 第19-20页 |
| 2.1.4 无叶酸培养基配制 | 第20-22页 |
| 2.2 细胞培养 | 第22-25页 |
| 2.2.1 常规培养 | 第22-24页 |
| 2.2.2 干预培养 | 第24-25页 |
| 2.3 实时荧光定量PCR测定FOLR1 mRNA表达 | 第25-28页 |
| 2.3.1 Trizol法提取细胞样品总RNA | 第25-26页 |
| 2.3.2 FOLR1 mRNA的cDNA第一链合成 | 第26页 |
| 2.3.3 实时荧光定量PCR | 第26-28页 |
| 2.4 Western blotting测定FOLR1蛋白表达 | 第28-34页 |
| 2.4.1 RIPA提取细胞样品总蛋白 | 第28页 |
| 2.4.2 Western blotting测定FOLR1蛋白表达 | 第28-34页 |
| 2.4.3 Image J测定蛋白条带灰度值 | 第34页 |
| 2.5 CBMN微核试验检测细胞染色体不稳定性 | 第34-35页 |
| 2.5.1 细胞材料获取及CB处理 | 第34页 |
| 2.5.2 细胞涂片 | 第34-35页 |
| 2.5.3 微核显微计数 | 第35页 |
| 2.6 数据统计分析方法 | 第35-36页 |
| 第3章 实验结果 | 第36-50页 |
| 3.1 不同氧化态叶酸对COLO205和CCD细胞 FOLR1mRNA表达影响 | 第36-42页 |
| 3.1.1 样本基因的扩增曲线结果 | 第36-37页 |
| 3.1.2 样本基因的熔解曲线结果 | 第37页 |
| 3.1.3 不同氧化态叶酸对COLO205细胞FOLR1 mRNA表达的影响 | 第37-40页 |
| 3.1.4 不同氧化态叶酸对CCD细胞FOLR1 mRNA表达水平影响 | 第40-42页 |
| 3.2 不同氧化态叶酸对COLO205和CCD细胞FOLR1蛋白表达影响 | 第42-47页 |
| 3.2.1 总蛋白质浓度测定结果 | 第42-43页 |
| 3.2.2 正常培养中CCD和COLO205细胞FOLR1蛋白表达量比较 | 第43-44页 |
| 3.2.3 不同氧化态叶酸对COLO205细胞FOLR1蛋白水平的影响 | 第44-45页 |
| 3.2.4 不同氧化态叶酸对CCD细胞FOLR1蛋白水平的影响 | 第45-47页 |
| 3.3 不同氧化态叶酸对COLO205和CCD细胞染色体不稳定性的影响 | 第47-50页 |
| 第4章 讨论 | 第50-55页 |
| 参考文献 | 第55-63页 |
| 附录A 自配试剂和溶液配方 | 第63-67页 |
| 攻读学位期间完成的学术论文和研究成果 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
