| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第一章 绪论 | 第12-28页 |
| 1.1 引言 | 第12-13页 |
| 1.2 研究背景 | 第13-22页 |
| 1.2.1 生物柴油 | 第13-16页 |
| 1.2.1.1 简介 | 第13-14页 |
| 1.2.1.2 生物柴油的历史与应用 | 第14-15页 |
| 1.2.1.3 发展生物柴油的必要性以及局限性 | 第15-16页 |
| 1.2.2 酶工程 | 第16页 |
| 1.2.3 脂肪酶 | 第16-19页 |
| 1.2.3.1 脂肪酶简介 | 第16-18页 |
| 1.2.3.2 微生物来源脂肪酶 | 第18-19页 |
| 1.2.4 固定化酶 | 第19-21页 |
| 1.2.4.1 酶固定化的方法 | 第20-21页 |
| 1.2.5 复合酶体系 | 第21页 |
| 1.2.6 热纤梭菌纤维小体 | 第21-22页 |
| 1.3 本课题的研究意义及方法 | 第22-28页 |
| 1.3.1 研究意义 | 第22-23页 |
| 1.3.2 课题研究方法 | 第23-28页 |
| 第二章 脂肪酶在毕赤酵母中的重组表达研究 | 第28-46页 |
| 2.1 引言 | 第28页 |
| 2.2 实验材料 | 第28页 |
| 2.3 实验方法 | 第28-37页 |
| 2.3.1 假丝酵母Candida sp. 99-125基因组DNA的提取 | 第28-29页 |
| 2.3.2 pPICZαA重组质粒的构建 | 第29-35页 |
| 2.3.3 pPICZαA-LipX、pPICZαA-CALB、Rd在毕赤酵母X33中的转化 | 第35-36页 |
| 2.3.4 重组毕赤酵母验证 | 第36-37页 |
| 2.4 实验结果与讨论 | 第37-45页 |
| 2.4.1 Lip2-19、CALB及Rd基因的扩增 | 第37-39页 |
| 2.4.2 pPICZα A重组子的验证 | 第39-43页 |
| 2.4.3 pPICZαA-LipX及pPICZαA-CALB、Rd在毕赤酵母X33中的转化 | 第43-44页 |
| 2.4.4 重组毕赤酵母生产脂肪酶平板初筛 | 第44-45页 |
| 2.5 本章小结 | 第45-46页 |
| 第三章 脂肪酶的表达以及脂肪酶系的筛选 | 第46-64页 |
| 3.1 引言 | 第46页 |
| 3.2 实验材料 | 第46-47页 |
| 3.3 实验方法 | 第47-49页 |
| 3.3.1 脂肪酶的表达及水解酶活的测定 | 第47-48页 |
| 3.3.2 毕赤酵母的高密度发酵及酯化酶活的测定 | 第48-49页 |
| 3.4 实验结果与讨论 | 第49-62页 |
| 3.5 本章小结 | 第62-64页 |
| 第四章 结论及展望 | 第64-66页 |
| 4.1 结论 | 第64-65页 |
| 4.2 展望 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-72页 |
| 附录1 | 第72-76页 |
| 附录2 | 第76-78页 |
| 附录3 | 第78-84页 |
| 致谢 | 第84-86页 |
| 研究成果及发表的学术论文 | 第86-88页 |
| 作者及导师简历 | 第88-89页 |
| 附件 | 第89-90页 |
