| 中文摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 本文縮写符号 | 第11-14页 |
| 目录 | 第14-17页 |
| 1. 绪论 | 第17-37页 |
| 1.1 杆状病毒概述 | 第17-28页 |
| 1.1.1 两相复制周期 | 第18-21页 |
| 1.1.2 基因表达调控 | 第21-23页 |
| 1.1.3 同源重复区和IE1 | 第23-25页 |
| 1.1.4 抗细胞凋亡基因 | 第25-27页 |
| 1.1.5 杆状病毒的应用 | 第27-28页 |
| 1.2 颗粒体病毒 | 第28-31页 |
| 1.2.1 β-杆状病毒 | 第28-30页 |
| 1.2.2 β-杆状病毒的离体复制 | 第30-31页 |
| 1.3 杆状病毒基因操作 | 第31-35页 |
| 1.3.1 早期研究使用的方法 | 第31页 |
| 1.3.2 bacmid构建方法与Bac-to-Bac系统 | 第31-35页 |
| 1.3.3 λ-Red重组技术 | 第35页 |
| 1.4 研究目的和意义 | 第35-37页 |
| 2. 小菜蛾颗粒体病毒荧光报告Bacmid的构建 | 第37-58页 |
| 2.1 引言 | 第37页 |
| 2.2 材料 | 第37-41页 |
| 2.2.1 大肠杆菌菌株 | 第37-38页 |
| 2.2.2 细胞系和病毒株 | 第38页 |
| 2.2.3 常用质粒 | 第38页 |
| 2.2.4 培养基和抗生素 | 第38-39页 |
| 2.2.5 酶,化学试剂和试剂盒 | 第39-40页 |
| 2.2.6 常用缓冲液及溶液 | 第40页 |
| 2.2.7 引物 | 第40-41页 |
| 2.3 实验方法 | 第41-49页 |
| 2.3.1 常规分子生物学实验方法 | 第41-44页 |
| 2.3.2 Bacmid相关实验方法 | 第44-47页 |
| 2.3.3 质粒和bacmids构建 | 第47-48页 |
| 2.3.4 细菌菌株构建 | 第48页 |
| 2.3.5 细胞培养、转染和感染 | 第48-49页 |
| 2.4 结果 | 第49-57页 |
| 2.4.1 PlxyGV bacmid vPxG的构建 | 第49-55页 |
| 2.4.2 荧光报告PlxyGV bacmids的构建 | 第55页 |
| 2.4.3 PlxyGV bacmid对三种昆虫细胞系的转染-感染实验分析 | 第55-57页 |
| 2.5 讨论 | 第57-58页 |
| 3. 小菜蛾颗粒体病毒在三种昆虫细胞系中的基因表达分析 | 第58-81页 |
| 3.1 引言 | 第58-59页 |
| 3.2 材料 | 第59-60页 |
| 3.2.1 大肠杆菌菌株 | 第59页 |
| 3.2.2 细胞系和病毒株 | 第59页 |
| 3.2.3 常用质粒 | 第59页 |
| 3.2.4 培养基和抗生素 | 第59页 |
| 3.2.5 酶,化学试剂和试剂盒 | 第59页 |
| 3.2.6 常用缓冲液及溶液 | 第59页 |
| 3.2.7 引物 | 第59-60页 |
| 3.3 实验方法 | 第60-63页 |
| 3.3.1 常规分子生物学实验方法 | 第60页 |
| 3.3.2 瞬时表达质粒构建 | 第60-63页 |
| 3.3.3 瞬时表达实验 | 第63页 |
| 3.4 结果 | 第63-78页 |
| 3.4.1 PlxyGV早、晚期启动子和hr序列的转录因子结合位点 | 第63-66页 |
| 3.4.2 PlxyGV早、晚期启动子在三种昆虫细胞系中转录活性分析 | 第66-68页 |
| 3.4.3 PlxyGV hrs对早期启动子转录活性的影响 | 第68-73页 |
| 3.4.4 iel蛋白对早期启动子转录活性的影响 | 第73-78页 |
| 3.5 讨论 | 第78-81页 |
| 4. AcMNPV p35、iel和gp64基因对PlxyGV重组体的功能拯救 | 第81-98页 |
| 4.1 引言 | 第81-82页 |
| 4.2 材料 | 第82-84页 |
| 4.2.1 大肠杆菌菌株 | 第82页 |
| 4.2.2 细胞系和病毒株 | 第82页 |
| 4.2.3 常用质粒 | 第82页 |
| 4.2.4 培养基和抗生素 | 第82页 |
| 4.2.5 酶,化学试剂和试剂盒 | 第82-83页 |
| 4.2.6 常用缓冲液及溶液 | 第83页 |
| 4.2.7 引物 | 第83-84页 |
| 4.3 方法 | 第84-86页 |
| 4.3.1 常规分子生物学实验方法 | 第84页 |
| 4.3.2 Bacmid相关实验方法 | 第84页 |
| 4.3.3 质粒和bacmids构建 | 第84-86页 |
| 4.3.4 细菌菌株构建 | 第86页 |
| 4.3.5 细胞培养、转染和感染 | 第86页 |
| 4.3.6 透射电子显微镜分析 | 第86页 |
| 4.4 结果 | 第86-96页 |
| 4.4.1 PlxyGVf不能功能性替代AcMNPV gp64 | 第86-88页 |
| 4.4.2 PlxyGV iap1和iap2不能功能性替代AcMNPVp35 | 第88-91页 |
| 4.4.3 AcMNPV p35和ie1基因对PlxyGV离体复制的拯救 | 第91-96页 |
| 4.5 讨论 | 第96-98页 |
| 总结 | 第98-99页 |
| 参考文献 | 第99-109页 |
| 在校期间发表的论文、科研成果等 | 第109-110页 |
| 为本论文提供支持的国家自然科学基金项目 | 第110-111页 |
| 致谢 | 第111页 |
