摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4页 |
目录 | 第5-8页 |
第一章 绪论 | 第8-14页 |
1.1 丝素蛋白 | 第8-9页 |
1.2 酪氨酸酶 | 第9-11页 |
1.2.1 酪氨酸酶简介 | 第9-10页 |
1.2.2 酪氨酸酶的应用进展 | 第10页 |
1.2.3 酪氨酸酶催化蛋白改性机理及应用 | 第10-11页 |
1.3 过氧化氢酶及其固定化 | 第11-12页 |
1.4 本课题研究的目的、意义和内容 | 第12-14页 |
1.4.1 研究的目的和意义 | 第12页 |
1.4.2 研究内容 | 第12-14页 |
第二章 实验材料、仪器和方法 | 第14-20页 |
2.1 实验材料与试剂 | 第14-15页 |
2.1.1 实验材料 | 第14页 |
2.1.2 实验试剂 | 第14-15页 |
2.2 实验仪器 | 第15页 |
2.3 实验方法 | 第15-16页 |
2.3.1 丝素蛋白溶液制备 | 第15页 |
2.3.2 丝素蛋白冷冻干燥膜制备及醇化处理 | 第15页 |
2.3.3 酪氨酸酶催化氧化丝素蛋白溶液 | 第15-16页 |
2.3.4 酪氨酸酶催化氧化过氧化氢酶溶液 | 第16页 |
2.3.5 酪氨酸酶催化氧化丝素蛋白/过氧化氢酶混合溶液 | 第16页 |
2.3.6 酪氨酸酶催化氧化丝素蛋白冷冻干燥膜接枝过氧化氢酶 | 第16页 |
2.4 测试方法 | 第16-20页 |
2.4.1 称重法标定丝素蛋白溶液浓度 | 第16页 |
2.4.2 紫外光谱分析 | 第16页 |
2.4.3 多巴含量分析 | 第16-17页 |
2.4.4 多巴醌含量分析 | 第17页 |
2.4.5 氨基酸组分含量分析 | 第17页 |
2.4.6 丝素蛋白游离氨基含量分析 | 第17-18页 |
2.4.7 凝胶过滤层析 | 第18页 |
2.4.8 SDS-PAGE | 第18页 |
2.4.9 DSC | 第18页 |
2.4.10 ATR-FTIR | 第18页 |
2.4.11 XRD | 第18页 |
2.4.12 SEM | 第18页 |
2.4.13 SEC-HPLC | 第18页 |
2.4.14 游离及固定化过氧化氢酶的酶活测定 | 第18-19页 |
2.4.15 固定化过氧化氢酶 pH 稳定性 | 第19页 |
2.4.16 固定化过氧化氢酶温度稳定性 | 第19页 |
2.4.17 固定化过氧化氢酶重复使用性 | 第19-20页 |
第三章 酪氨酸酶催化氧化丝素蛋白的研究 | 第20-28页 |
3.1 酪氨酸酶对丝素蛋白的催化氧化作用 | 第20-24页 |
3.1.1 酪氨酸酶处理对丝素蛋白溶液吸光度的变化 | 第20-21页 |
3.1.2 酶催化时间对丝素蛋白溶液吸光度的影响 | 第21-22页 |
3.1.3 酪氨酸酶催化丝素蛋白氧化产物分析 | 第22-23页 |
3.1.4 酪氨酸酶催化氧化丝素蛋白的氨基含量变化 | 第23-24页 |
3.2 酪氨酸酶催化对丝素蛋白氨基酸组成及分子量的影响 | 第24-25页 |
3.2.1 酶促氧化对丝素蛋白氨基酸组成的影响 | 第24-25页 |
3.2.2 凝胶过滤层析 | 第25页 |
3.3 酪氨酸酶催化氧化对丝素膜结构和形态的影响 | 第25-27页 |
3.4 本章小结 | 第27-28页 |
第四章 酪氨酸酶催化氧化丝素蛋白接枝过氧化氢酶的研究 | 第28-36页 |
4.1 酪氨酸酶对过氧化氢酶的催化氧化作用 | 第28-32页 |
4.1.1 酪氨酸酶对过氧化氢酶溶液吸光度的影响 | 第29页 |
4.1.2 酪氨酸酶对过氧化氢酶作用体系中多巴含量分析 | 第29-30页 |
4.1.3 酪氨酸酶处理对过氧化氢酶分子量的影响 | 第30-32页 |
4.2 酶促丝素蛋白接枝过氧化氢酶可行性分析 | 第32-35页 |
4.2.1 酪氨酸酶用量对溶液体系中蛋白分子量分布的影响 | 第33-34页 |
4.2.2 丝素蛋白浓度对溶液体系中蛋白分子量分布的影响 | 第34-35页 |
4.3 本章小结 | 第35-36页 |
第五章 酶促丝素蛋白固定过氧化氢酶的制备及性能表征 | 第36-44页 |
5.1 溶液体系下酶促丝素固定化过氧化氢酶酶活及重复使用性 | 第36-37页 |
5.2 非均相体系下酶促丝素膜固定化过氧化氢酶酶活及重复使用性 | 第37-39页 |
5.3 酶促丝素接枝固定过氧化氢酶的性能表征 | 第39-43页 |
5.3.1 DSC | 第40页 |
5.3.2 ATR-FTIR | 第40-41页 |
5.3.3 pH 及温度稳定性 | 第41-43页 |
5.4 本章小结 | 第43-44页 |
第六章 主要结论 | 第44-46页 |
6.1 主要结论 | 第44页 |
6.2 问题与不足 | 第44-46页 |
致谢 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-50页 |
附录: 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第50页 |