| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 绪论 | 第13-29页 |
| 1. 阿尔茨海默病 | 第13页 |
| 2. 临床症状和神经病理学 | 第13-15页 |
| 3. APP切割及Aβ形成 | 第15-16页 |
| 4. Aβ聚集及神经毒性 | 第16-18页 |
| 5. 遗传因子和风险因子 | 第18-20页 |
| 6. 淀粉样蛋白级联假说 | 第20-21页 |
| 7. AD 的诊断和治疗 | 第21页 |
| 8. 构象依赖性抗体 | 第21-22页 |
| 9. 治疗 AD 的 scFv | 第22-29页 |
| 9.1 人工scFv | 第23-24页 |
| 9.2 天然重链抗体 | 第24-25页 |
| 9.3 scFv的脑转运机制 | 第25-29页 |
| 第二章 人源性的单链抗体库的构建、鉴定及抗 Aβ42 寡聚体特异性单链抗体的筛选 | 第29-47页 |
| 引言 | 第29页 |
| 2.1 实验材料 | 第29-30页 |
| 2.1.1 质粒载体与菌株 | 第29页 |
| 2.1.2 工具酶及主要试剂 | 第29-30页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第30页 |
| 2.2 方法 | 第30-40页 |
| 2.2.1 外周血淋巴细胞 RNA 提取及反转录合成 cDNA | 第30-31页 |
| 2.2.2 编码 VH 与 VL 的 DNA 片段扩增 | 第31-32页 |
| 2.2.3 编码 scFv 的 DNA 片段的拼接和扩增 | 第32-33页 |
| 2.2.4 编码 scFv 的 DNA 片段与原核表达载体连接 | 第33-34页 |
| 2.2.5 大肠杆菌感受态细胞的制备（氯化钙法） | 第34页 |
| 2.2.6 质粒的转化 | 第34页 |
| 2.2.7 阳性克隆的筛选 | 第34-35页 |
| 2.2.8 单链抗体基因的 DNA 序列测定 | 第35页 |
| 2.2.9 单链抗体的诱导表达 | 第35页 |
| 2.2.10 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE） | 第35-36页 |
| 2.2.11 表达产物的纯化 | 第36页 |
| 2.2.12 蛋白印迹（Western blotting） | 第36-40页 |
| 2.3 实验结果 | 第40-45页 |
| 2.3.1 人源性单链抗体库的构建 | 第40-42页 |
| 2.3.2 阳性克隆的筛选 | 第42-43页 |
| 2.3.3 单链抗体的表达和制备 | 第43-45页 |
| 本章小结 | 第45-47页 |
| 第三章 抗 Aβ42 寡聚体特异性单链抗体的功能研究 | 第47-73页 |
| 引言 | 第47页 |
| 3.1 实验材料 | 第47-48页 |
| 3.1.1 细胞株 | 第47页 |
| 3.1.2 试剂 | 第47页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第47-48页 |
| 3.2 实验方法 | 第48-55页 |
| 3.2.1 细胞培养 | 第48-50页 |
| 3.2.2 Dot-blot 检测单链抗体与 Aβ42 寡聚体的结合特异性 | 第50页 |
| 3.2.3 Western blot 检测单链抗体对 Aβ42 寡聚体的识别 | 第50页 |
| 3.2.4 单链抗体对 Aβ42 寡聚体结合力的检测 | 第50-51页 |
| 3.2.5 单链抗体亲和力常数的测定 | 第51-52页 |
| 3.2.6 单链抗体对 Aβ42 聚集的抑制作用 | 第52页 |
| 3.2.7 透射电镜观察单链抗体对 Aβ42 聚集过程及聚集体形态的变化的影响 | 第52页 |
| 3.2.8 四唑盐（MTT）法检测单链抗体抑制 Aβ42 对细胞的毒性作用 | 第52-53页 |
| 3.2.9 单链抗体对 Aβ42 细胞毒性的抑制和中和作用 | 第53页 |
| 3.2.10 LDH 法检测单链抗体抑制 Aβ42 对细胞的毒性作用 | 第53-54页 |
| 3.2.11 体外血脑屏障模型建立及单链抗体穿透血脑屏障的检测 | 第54-55页 |
| 3.3 实验结果 | 第55-72页 |
| 3.3.1 Dot-blot 检测四种单链抗体与 Aβ42 寡聚体的结合特异性的分析 | 第55页 |
| 3.3.2 Western blot 检测单链抗体对 Aβ42 寡聚体识别的分析 | 第55-57页 |
| 3.3.3 单链抗体对 Aβ42 寡聚体结合力的检测 | 第57页 |
| 3.3.4 单链抗体亲和力的测定 | 第57-59页 |
| 3.3.5 单链抗体对 Aβ42 聚集抑制作用的分析 | 第59-60页 |
| 3.3.6 单链抗体对 Aβ42 聚集抑制作用的形态学分析 | 第60-61页 |
| 3.3.7 单链抗体抑制 Aβ42 对细胞的毒性作用 | 第61-65页 |
| 3.3.8 单链抗体对 Aβ42 细胞毒性的抑制和中和作用分析 | 第65-69页 |
| 3.3.9 单链抗体抑制 Aβ42 毒性作用的细胞形态学分析 | 第69-70页 |
| 3.3.10 单链抗体跨体外血脑屏障模型效应的分析 | 第70-72页 |
| 本章小结 | 第72-73页 |
| 讨论 | 第73-78页 |
| 全文总结 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-91页 |
| 作者简介 | 第91页 |
| 博士期间发表的学术论文及其他科研成果 | 第91-93页 |
| 致谢 | 第93页 |
