产纤溶酶微生物的筛选、鉴定及其纤溶酶特性研究
| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 英文缩写词表 | 第13-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-22页 |
| 1.1 前言 | 第14页 |
| 1.2 血栓性疾病 | 第14-17页 |
| 1.2.1 血栓形成与溶栓机制 | 第14-16页 |
| 1.2.2 血栓形成的原因 | 第16页 |
| 1.2.3 常见的血栓性疾病 | 第16页 |
| 1.2.4 血栓性疾病的治疗 | 第16-17页 |
| 1.3 溶栓药物的研究进展 | 第17-18页 |
| 1.4 纤溶酶的来源及微生物产纤溶酶的研究现状 | 第18-19页 |
| 1.4.1 纤溶酶的来源 | 第18-19页 |
| 1.5 本研究的立题意义和主要内容 | 第19-22页 |
| 1.5.1 立题意义 | 第19-20页 |
| 1.5.2 主要内容 | 第20-22页 |
| 第二章 产纤溶酶菌株的筛选与鉴定 | 第22-35页 |
| 2.1 材料与方法 | 第22-29页 |
| 2.1.1 实验标本 | 第22页 |
| 2.1.2 主要实验试剂 | 第22页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第22-23页 |
| 2.1.4 培养基和主要试剂的配制 | 第23-25页 |
| 2.1.5 实验方法 | 第25-29页 |
| 2.2 实验结果与讨论 | 第29-35页 |
| 2.2.1 初筛结果 | 第29-31页 |
| 2.2.2 复筛结果 | 第31-32页 |
| 2.2.3 菌株HS-387 的形态学鉴定 | 第32-33页 |
| 2.2.4 菌株HS-387 的分子生物学鉴定 | 第33-34页 |
| 2.2.5 讨论 | 第34-35页 |
| 第三章 菌株HS-387 产纤溶酶发酵条件的优化 | 第35-43页 |
| 3.1 材料与方法 | 第35-37页 |
| 3.1.1 材料 | 第35-36页 |
| 3.1.2 实验方法 | 第36-37页 |
| 3.2 产酶发酵条件的优化 | 第37-38页 |
| 3.2.1 发酵液初始pH值对产酶的影响 | 第37页 |
| 3.2.2 孢子接种量对产酶的影响 | 第37页 |
| 3.2.3 发酵液装液量对产酶的影响 | 第37-38页 |
| 3.2.4 培养温度对产酶的影响 | 第38页 |
| 3.2.5 培养时间对产酶的影响 | 第38页 |
| 3.2.6 培养转速对产酶的影响 | 第38页 |
| 3.3 实验结果与讨论 | 第38-43页 |
| 3.3.1 发酵液初始pH值对产酶的影响 | 第38-39页 |
| 3.3.2 孢子接种量对产酶的影响 | 第39-40页 |
| 3.3.3 发酵液装液量对产酶的影响 | 第40-41页 |
| 3.3.4 均匀实验设计 | 第41-42页 |
| 3.3.5 讨论 | 第42-43页 |
| 第四章 纤溶酶的分离与纯化 | 第43-63页 |
| 4.1 材料与方法 | 第43-44页 |
| 4.1.1 主要试剂 | 第43页 |
| 4.1.2 仪器设备 | 第43-44页 |
| 4.2 实验方法 | 第44-46页 |
| 4.2.1 配制溶液 | 第44-45页 |
| 4.2.2 蛋白质浓度的测定 | 第45页 |
| 4.2.3 纤溶酶酶活测定方法 | 第45-46页 |
| 4.3 纤溶酶的分离纯化 | 第46-56页 |
| 4.3.1 发酵液的预处理 | 第46页 |
| 4.3.2 硫酸铵分级沉淀原理 | 第46-48页 |
| 4.3.3 透析脱盐 | 第48-49页 |
| 4.3.4 离子交换层析 | 第49-51页 |
| 4.3.5 疏水层析 | 第51-52页 |
| 4.3.6 样品纯度鉴定 | 第52-55页 |
| 4.3.7 QE质谱鉴定 | 第55-56页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第56-63页 |
| 4.4.1 硫酸铵分级沉淀 | 第56-57页 |
| 4.4.2 离子交换层析结果 | 第57-59页 |
| 4.4.3 疏水层析结果 | 第59-60页 |
| 4.4.4 样品纯度鉴定 | 第60页 |
| 4.4.5 样品切胶回收活性验证 | 第60-61页 |
| 4.4.6 QE质谱鉴定 | 第61页 |
| 4.4.7 讨论 | 第61-63页 |
| 第五章 纤溶酶酶学特性的分析 | 第63-79页 |
| 5.1 实验材料 | 第63-64页 |
| 5.1.1 主要仪器 | 第63页 |
| 5.1.2 主要试剂 | 第63-64页 |
| 5.2 实验方法 | 第64-71页 |
| 5.2.1 分子量的测定 | 第64-65页 |
| 5.2.2 等电点的测定 | 第65-67页 |
| 5.2.3 温度对酶促反应及稳定性的影响 | 第67-68页 |
| 5.2.4 pH对酶活力的影响 | 第68页 |
| 5.2.5 蛋白酶抑制剂对酶活力的影响 | 第68-69页 |
| 5.2.6 金属离子对酶活力的影响 | 第69-70页 |
| 5.2.7 纤维蛋白原和纤维蛋白水解活性分析 | 第70页 |
| 5.2.8 激酶活性及纤溶活力的检测 | 第70-71页 |
| 5.3 实验结果与讨论 | 第71-78页 |
| 5.3.1 SDS-PAGE凝胶电泳测分子量 | 第71-72页 |
| 5.3.2 等电点 | 第72页 |
| 5.3.3 温度对酶促反应和及酶稳定性的影响 | 第72-73页 |
| 5.3.4 缓冲液pH值对酶活性的影响 | 第73-74页 |
| 5.3.5 蛋白酶抑制剂对酶活性的影响 | 第74页 |
| 5.3.6 金属离子对酶活性的影响 | 第74-75页 |
| 5.3.7 纤维蛋白原和纤维蛋白水解活性分析 | 第75-76页 |
| 5.3.8 激酶活性及纤溶活性的检测 | 第76-77页 |
| 5.3.9 讨论 | 第77-78页 |
| 5.4 展望 | 第78-79页 |
| 第六章 结论 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-86页 |
| 作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第86-87页 |
| 致谢 | 第87页 |
