| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 第一章 引言 | 第8-25页 |
| 1.1 油菜素甾醇的合成和信号途径的研究 | 第8-13页 |
| 1.1.1 油菜素甾醇的研究简史 | 第8-9页 |
| 1.1.2 油菜素甾醇的生理功能 | 第9-10页 |
| 1.1.3 油菜素甾醇的合成途径 | 第10-12页 |
| 1.1.4 油菜素甾醇水平的调控 | 第12页 |
| 1.1.5 油菜素甾醇的信号通路 | 第12-13页 |
| 1.2 ABA信号转导的研究进展 | 第13-14页 |
| 1.3 BR与ABA互作的研究进展及研究意义 | 第14-15页 |
| 1.3.1 研究进展 | 第14-15页 |
| 1.3.2 研究意义 | 第15页 |
| 1.4 BRI1突变体抑制子的筛选介绍 | 第15-18页 |
| 1.4.1 膜受体BRI1的详述以及不同的等位基因 | 第15-17页 |
| 1.4.2 bri1突变体背景下的抑制子筛选历史 | 第17页 |
| 1.4.3 bri1-301的获得和生理表型 | 第17-18页 |
| 1.5 本论文进行遗传筛选的初衷 | 第18页 |
| 1.6 PHYB参与的光信号途径的研究进展 | 第18-21页 |
| 1.6.1 光敏色素PHYB的介绍 | 第18-19页 |
| 1.6.2 PHYB参与的光形态建成的信号通路 | 第19-21页 |
| 1.7 BR与光信号互作的研究进展 | 第21-24页 |
| 1.8 本论文利用PHYB的缺失突变体研究光信号与BR的关系 | 第24-25页 |
| 第二章 材料与方法 | 第25-34页 |
| 2.1 材料 | 第25-28页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第25页 |
| 2.1.2 菌株 | 第25页 |
| 2.1.3 载体(图谱见附录) | 第25-26页 |
| 2.1.4 试剂盒 | 第26页 |
| 2.1.5 主要的化学品 | 第26页 |
| 2.1.6 酶及其它 | 第26-27页 |
| 2.1.7 抗生素 | 第27页 |
| 2.1.8 抗体 | 第27页 |
| 2.1.9 图像及数据分析软件 | 第27页 |
| 2.1.10 主要的仪器设备 | 第27-28页 |
| 2.2 方法 | 第28-34页 |
| 2.2.1 植物材料的种植和生长 | 第28页 |
| 2.2.2 EMS诱变 | 第28页 |
| 2.2.3 候选突变体的筛选 | 第28页 |
| 2.2.4 拟南芥的杂交 | 第28-29页 |
| 2.2.5 图位克隆 | 第29页 |
| 2.2.6 二代测序DNA样品准备 | 第29页 |
| 2.2.7 感受态的制备 | 第29页 |
| 2.2.8 载体构建 | 第29-30页 |
| 2.2.9 农杆菌介导的拟南芥的转化 | 第30页 |
| 2.2.10 T-DNA Line鉴定 | 第30页 |
| 2.2.11 植物材料的激素处理 | 第30-31页 |
| 2.2.12 Realtime PCR | 第31页 |
| 2.2.13 BESI的磷酸化状态检测 | 第31-32页 |
| 2.2.14 双突变的构建 | 第32-33页 |
| 2.2.15 BR/BRZ220敏感性的实验 | 第33-34页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第34-55页 |
| 3.1 bri1-301抑制子的筛选 | 第34-38页 |
| 3.1.1 技术路线 | 第34页 |
| 3.1.2 筛选浓度的选择及种子数量的计算 | 第34-35页 |
| 3.1.3 初筛结果 | 第35-36页 |
| 3.1.4 突变体显隐性的分析 | 第36页 |
| 3.1.5 已知ABA相关突变体的排除 | 第36-38页 |
| 3.2 bri1-301抑制子的表型分析 | 第38-47页 |
| 3.2.1 根长 | 第38-39页 |
| 3.2.2 根毛 | 第39-40页 |
| 3.2.3 候选突变体分类 | 第40-47页 |
| 3.4 功能研究 | 第47-53页 |
| 3.4.1 phyB-69的表型分析 | 第47-48页 |
| 3.4.2 phyB-69中BR信号输出放大 | 第48页 |
| 3.4.3 phyB-69中BR合成和代谢基因的转录水平受到影响 | 第48-49页 |
| 3.4.4 phyB-69对eBL更敏感 | 第49-53页 |
| 3.5 讨论 | 第53-55页 |
| 3.5.1 EMS筛选的思考 | 第53页 |
| 3.5.2 确定突变基因 | 第53页 |
| 3.5.3 phyB-69中BR信号输出的检测 | 第53-54页 |
| 3.5.4 phyB-69对BR合成和代谢的影响 | 第54页 |
| 3.5.5 phyB-69对BR合成和信号的影响 | 第54页 |
| 3.5.6 phyB-69对eBL的敏感性 | 第54-55页 |
| 第四章 结论与展望 | 第55-56页 |
| 4.1 结论 | 第55页 |
| 4.2 展望 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-65页 |
| 附录 | 第65-74页 |
| 附录A 本文中用到的引物列表 | 第65-68页 |
| 附录B 常用试剂的配方 | 第68-71页 |
| 附录C 常用培养基的配方 | 第71-73页 |
| 附录D pCAMBIA2300载体图谱 | 第73-74页 |
| 后记 | 第74-76页 |
