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百脉根LjPP2C蛋白磷酸酶负调控MPK6信号转导途径

摘要第6-7页
Abstract第7页
缩略语表第8-10页
1 前言第10-22页
    1.1 共生关系第10-13页
        1.1.1 共生固氮的意义第10页
        1.1.2 根瘤共生第10-12页
        1.1.3 根瘤形成的机制第12-13页
    1.2 SymRk的结构和功能第13-14页
    1.3 MAPK信号途径第14-17页
        1.3.1 植物中MAPK信号途径第14-16页
        1.3.2 SIP2 的结构与功能第16-17页
    1.4 2C类蛋白磷酸酶第17-21页
    1.5 研究的目的和意义第21-22页
2 材料与方法第22-43页
    2.1 材料第22-26页
        2.1.1 质粒和菌株第22-24页
        2.1.2 植物材料第24页
        2.1.3 分子生物学和植物转化相关试剂第24页
        2.1.4 所用培养基第24-26页
    2.2 方法第26-43页
        2.2.1 酵母双杂交筛选MPK6 相互作用蛋白第26-30页
        2.2.2 β-半乳糖苷酶活性检测第30-31页
        2.2.3 体外蛋白Pull-down分析蛋白质之间的相互作用第31-35页
        2.2.4 双分子荧光互补(BiFC)分析第35-36页
        2.2.5 体外蛋白磷酸化分析第36-37页
        2.2.6 表达分析第37-39页
        2.2.7 亚细胞定位分析第39-40页
        2.2.8 毛根转化和鉴定第40-41页
        2.2.9 突变体鉴定第41-43页
3 结果与分析第43-56页
    3.1 诱饵质粒的构建和鉴定第43-44页
    3.2 百脉根AD-cDNA文库筛选第44-45页
    3.3 百脉根蛋白磷酸酶基因LjPP2C的结构分析第45-47页
        3.3.1 LjPP2C基因的结构第45页
        3.3.2 LjPP2C进化树分析第45-46页
        3.3.3 植物B类PP2C进化树分析第46-47页
    3.4 百脉根LjPP2C与MPK6 相互作用的鉴定第47-50页
        3.4.1 在酵母体内验证LjPP2C和MPK6 的相互作用第47-48页
        3.4.2 体外蛋白pull-down验证两个蛋白的相互作用第48-49页
        3.4.3 BiFC验证两个蛋白的相互作用第49-50页
    3.5 百脉根LjPP2C的亚细胞定位第50-51页
    3.6 百脉根LjPP2C表达特性分析第51-53页
    3.7 百脉根LjPP2C具有除去MPK6 磷酸化的功能第53-54页
    3.8 LjPP2C在百脉根中超量表达第54-56页
4 总结、讨论及展望第56-59页
    4.1 总结第56页
    4.2 讨论第56-58页
    4.3 展望第58-59页
参考文献第59-68页
附录1本实验所用引物第68-69页
致谢第69页

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