| 摘要 | 第4-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-22页 |
| 1.1 核黄素的胞内积累 | 第10-12页 |
| 1.1.1 ribC基因的结构与功能 | 第11页 |
| 1.1.2 ribC 基因点突变的研究 | 第11-12页 |
| 1.2 rib操纵子的多拷贝及其关键酶基因 | 第12-14页 |
| 1.2.1 rib操纵子基因剂量与核黄素积累的关系 | 第12-14页 |
| 1.2.2 rib操纵子中关键酶基因与核黄素过量合成的关系 | 第14页 |
| 1.3 枯草芽孢杆菌中木糖的吸收及代谢 | 第14-17页 |
| 1.3.1 木糖代谢与核黄素过量合成的关系 | 第15页 |
| 1.3.2 木糖运输蛋白及其调控机制 | 第15-16页 |
| 1.3.3 木糖操纵子结构及其调控机制 | 第16页 |
| 1.3.4 木糖作为碳源的研究现状 | 第16-17页 |
| 1.4 cdd基因启动子的应用 | 第17-20页 |
| 1.4.1 P_(cdd)的应用优势 | 第17-18页 |
| 1.4.2 P_(cdd)启动子的优化 | 第18-20页 |
| 1.4.3 cdd基因前导区优化 | 第20页 |
| 1.5 本文的研究目的和意义 | 第20-22页 |
| 第二章 材料与方法 | 第22-38页 |
| 2.1 实验材料 | 第22-29页 |
| 2.1.1 菌株和质粒 | 第22-23页 |
| 2.1.2 PCR引物及合成序列 | 第23-24页 |
| 2.1.3 主要药品 | 第24-25页 |
| 2.1.4 主要试剂 | 第25-27页 |
| 2.1.5 培养基 | 第27页 |
| 2.1.6 主要仪器 | 第27-29页 |
| 2.2 实验方法 | 第29-38页 |
| 2.2.1 枯草芽孢杆菌染色体的提取 | 第29页 |
| 2.2.2 质粒提取方法 | 第29-30页 |
| 2.2.3 DNA片段的普通PCR扩增 | 第30页 |
| 2.2.4 重叠延伸PCR拼接反应 | 第30-31页 |
| 2.2.5 琼脂糖凝胶电泳 | 第31-32页 |
| 2.2.6 枯草芽孢杆菌的感受态转化 | 第32页 |
| 2.2.7 DNA片段的合成与测序 | 第32页 |
| 2.2.8 无标记基因修饰方法 | 第32-33页 |
| 2.2.9 菌种的保藏 | 第33-34页 |
| 2.2.10 枯草芽孢杆菌总RNA提取方法 | 第34页 |
| 2.2.11 cDNA的合成及qRT-PCR | 第34-36页 |
| 2.2.12 胞内代谢物的质谱检测方法 | 第36页 |
| 2.2.13 发酵培养 | 第36页 |
| 2.2.14 定量分析方法 | 第36-38页 |
| 第三章 结果与分析 | 第38-69页 |
| 3.1 ribC基因点突变的引入及效应 | 第38-41页 |
| 3.1.1 S-Em-R片段的拼接及转化子筛选 | 第38-40页 |
| 3.1.2 ribC基因点突变对核黄素积累的影响 | 第40-41页 |
| 3.2 rib操纵子关键基因单独表达及表型效应 | 第41-48页 |
| 3.2.1 ribA基因的高表达 | 第41-45页 |
| 3.2.2 ribH基因的高表达 | 第45-46页 |
| 3.2.3 P_(cdd)启动子启动效率分析 | 第46-47页 |
| 3.2.4 LXZ-2 菌株的核黄素发酵 | 第47-48页 |
| 3.3 ribA基因同其它基因共同高表达 | 第48-57页 |
| 3.3.1 ribA和ribH基因共同过表达 | 第49-50页 |
| 3.3.2 ribA和ribE基因共同过表达 | 第50-52页 |
| 3.3.3 ribA和ribD基因共同过表达 | 第52-53页 |
| 3.3.4 重组菌核黄素发酵 | 第53-54页 |
| 3.3.5 ribD基因与ribA、ribH基因共同过表达 | 第54-57页 |
| 3.4 木糖/蔗糖共代谢对核黄素发酵的影响 | 第57-61页 |
| 3.4.1 红霉素抗性基因的敲除 | 第57-59页 |
| 3.4.2 木糖作为碳源发酵对核黄素产量的影响 | 第59-60页 |
| 3.4.3 木糖/蔗糖混合碳源发酵对核黄素产量的影响 | 第60页 |
| 3.4.4 发酵罐中木糖/蔗糖共代谢的核黄素发酵 | 第60-61页 |
| 3.5 木糖代谢相关基因修饰及对核黄素发酵的影响 | 第61-69页 |
| 3.5.1 araE基因的整合表达 | 第62-63页 |
| 3.5.2 xyl操纵子启动子和前导区的替换 | 第63-65页 |
| 3.5.3 rpe基因的整合表达 | 第65-66页 |
| 3.5.4 P_(AE)启动子启动效率分析 | 第66-67页 |
| 3.5.5 木糖代谢相关基因的过表达对核黄素发酵的影响 | 第67-69页 |
| 第四章 结论与展望 | 第69-71页 |
| 4.1 主要结论 | 第69页 |
| 4.2 创新点 | 第69页 |
| 4.3 展望 | 第69-71页 |
| 参考文献 | 第71-76页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第76-77页 |
| 致谢 | 第77-78页 |
