| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-15页 |
| 1. 20S核心颗粒 | 第10-11页 |
| 2. 蛋白酶体激活因子 | 第11-12页 |
| 2.1 ATP非依赖的激活因子 | 第11页 |
| 2.2 ATP依赖的激活因子 | 第11-12页 |
| 3. 蛋白酶体激活因子-20S蛋白酶体复合物 | 第12-14页 |
| 3.1 PA26-20S复合物 | 第12-13页 |
| 3.2 Blm10-20S复合物 | 第13页 |
| 3.3 19S-20S复合物 | 第13-14页 |
| 4. REGγ研究进展 | 第14页 |
| 5. 本研究的目的和意义 | 第14-15页 |
| 第二章 材料与方法 | 第15-32页 |
| 1. 材料 | 第15-19页 |
| 1.1 菌株和细胞 | 第15页 |
| 1.2 质粒和抗体 | 第15-16页 |
| 1.3 蛋白纯化所用试剂和层析柱 | 第16页 |
| 1.4 其它主要试剂 | 第16-17页 |
| 1.5 蛋白纯化相关溶液配制 | 第17-19页 |
| 2. 方法 | 第19-32页 |
| 2.1 克隆构建 | 第19-24页 |
| 2.2 酵母菌株AH109复苏及pGAD-PSMA1-PSMA7/pGBK-REG γ的转化 | 第24-25页 |
| 2.3 免疫共沉淀检测REGγ与PSMA1-PSMA7之间的相互作用 | 第25-26页 |
| 2.4 免疫印迹实验 | 第26-27页 |
| 2.5 无标签PEGγ蛋白纯化 | 第27-30页 |
| 2.6 GST-REGγ纯化流程 | 第30-31页 |
| 2.7 TNT体外翻译系统 | 第31页 |
| 2.8 体外降解体系 | 第31-32页 |
| 第三章 实验结果与分析 | 第32-54页 |
| 1. 蛋白酶体激活因子REGγ特异性结合20S蛋白酶体α7亚基 | 第32-36页 |
| 2. REGγC末端的第245位的脯氨酸和第254位的酪氨酸对REGγ-20S的结合是不可或缺的 | 第36-44页 |
| 3. 推测REGγC末端结合至α7第66位精氨酸上 | 第44-45页 |
| 4. 推测REG γ活性环结合至α7 N端的第8位酪氨酸和第9位天冬氨酸 | 第45-50页 |
| 5. REGγ20S结合模型预测 | 第50-51页 |
| 6. 无标签REG γ蛋白纯化以及低温冷冻电镜图像采集 | 第51-54页 |
| 第四章 全文总结 | 第54-56页 |
| 1. 本文主要研究成果 | 第54页 |
| 2. 本文主要创新之处 | 第54-55页 |
| 3. 本论文需要进一步研究的工作 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-61页 |
| 附录Ⅰ(溶液配方) | 第61-63页 |
| 附录Ⅱ | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64页 |
