摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第1章 引言 | 第12-28页 |
1.1 马蓝研究概况 | 第12-16页 |
1.1.1 马蓝的本草考证、植物形态与资源分布 | 第12页 |
1.1.2 马蓝的药效及活性成分 | 第12-14页 |
1.1.3 马蓝种质研究现状 | 第14-16页 |
1.2 药用植物生物碱次生代谢研究进展 | 第16-23页 |
1.2.1 生物碱的合成途径 | 第16-17页 |
1.2.2 吲哚生物碱的次生代谢工程研究 | 第17-19页 |
1.2.3 生物碱代谢工程的调控策略 | 第19-22页 |
1.2.4 生物碱功能基因研究 | 第22-23页 |
1.3 药用植物有效成分生物合成途径研究体系与技术的进展 | 第23-26页 |
1.3.1 高通量核酸测序技术在药用植物研究中的应用 | 第23-24页 |
1.3.2 功能基因组学在药用植物中的应用 | 第24页 |
1.3.3 利用功能基因组学研究活性成分生物合成 | 第24-25页 |
1.3.4 药用植物的代谢组研究 | 第25页 |
1.3.5 植物激素在药用植物次生代谢研究中的作用 | 第25-26页 |
1.4 研究内容和技术路线 | 第26-28页 |
第2章 马蓝快繁与菘蓝再生植株体系研究 | 第28-43页 |
2.1 材料与试剂 | 第28-29页 |
2.1.1 植物材料 | 第28页 |
2.1.2 菌株和质粒 | 第28-29页 |
2.1.3 试剂和药品 | 第29页 |
2.1.4 主要仪器设备 | 第29页 |
2.2 实验方法 | 第29-36页 |
2.2.1 试剂配制 | 第29-31页 |
2.2.2 马蓝无菌苗培养 | 第31-32页 |
2.2.3 马蓝愈伤组织诱导尝试 | 第32-34页 |
2.2.4 马蓝毛状根诱导尝试 | 第34页 |
2.2.5 马蓝快速繁殖技术 | 第34-35页 |
2.2.6 菘蓝再生植株体系构建 | 第35-36页 |
2.3 结果与分析 | 第36-41页 |
2.3.1 马蓝无菌苗的获得 | 第36-37页 |
2.3.2 马蓝愈伤组织诱导 | 第37页 |
2.3.3 马蓝毛状根诱导 | 第37-38页 |
2.3.4 马蓝快繁体系的建立 | 第38-39页 |
2.3.5 菘蓝再生植株体系的建立 | 第39-41页 |
2.4 小结与讨论 | 第41-43页 |
第3章 基于Illumina平台的马蓝器官转录组学研究 | 第43-63页 |
3.1 材料与试剂 | 第43-44页 |
3.1.1 植物材料 | 第43页 |
3.1.2 主要仪器设备 | 第43页 |
3.1.3 试剂和药品 | 第43-44页 |
3.2 实验方法 | 第44-49页 |
3.2.1 RNA提取及cDNA文库构建 | 第44-47页 |
3.2.2 测序及数据组装 | 第47-48页 |
3.2.3 转录组注释 | 第48页 |
3.2.4 差异表达基因分析 | 第48页 |
3.2.5 共表达网络分析 | 第48-49页 |
3.3 结果与分析 | 第49-60页 |
3.3.1 测序与序列组装 | 第49页 |
3.3.2 转录本的基因注释 | 第49页 |
3.3.3 转录本的GO注释 | 第49-50页 |
3.3.4 转录本的COG注释 | 第50页 |
3.3.5 转录本的KEGG分析 | 第50页 |
3.3.6 马蓝不同器官的转录表达谱分析 | 第50-56页 |
3.3.7 吲哚合成途径部分候选基因鉴定及表达分析 | 第56-59页 |
3.3.8 共表达分析 | 第59-60页 |
3.4 小结与讨论 | 第60-63页 |
第4章 马蓝稳定内参基因的筛选 | 第63-83页 |
4.1 材料与试剂 | 第63-65页 |
4.1.1 植物材料 | 第63-64页 |
4.1.2 主要仪器设备 | 第64页 |
4.1.3 试剂和药品 | 第64-65页 |
4.2 实验方法 | 第65-70页 |
4.2.1 植物总RNA、DNA的提取及cDNA的合成 | 第65-66页 |
4.2.2 候选内参基因相关数据挖掘 | 第66-67页 |
4.2.3 RT-qPCR引物设计及其扩增效率验证 | 第67-68页 |
4.2.4 RT-PCR检验扩增引物特异性 | 第68页 |
4.2.5 RT-qPCR检测各候选内参基因表达水平 | 第68-69页 |
4.2.6 基因表达稳定性的统计分析 | 第69-70页 |
4.3 结果与分析 | 第70-80页 |
4.3.1 基于转录组数据库获得候选内参基因序列 | 第70页 |
4.3.2 扩增引物的表现 | 第70-73页 |
4.3.3 内参基因的表达稳定性 | 第73-78页 |
4.3.4 内参基因稳定性的验证 | 第78-80页 |
4.4 小结与讨论 | 第80-83页 |
第5章 BcSK基因的克隆与功能研究 | 第83-123页 |
5.1 材料与试剂 | 第84-86页 |
5.1.1 植物材料 | 第84页 |
5.1.2 菌株和质粒 | 第84页 |
5.1.3 试剂和药品 | 第84-85页 |
5.1.4 主要仪器设备 | 第85-86页 |
5.2 实验方法 | 第86-107页 |
5.2.1 试剂配制 | 第86-88页 |
5.2.2 植物总RNA提取、cDNA合成及基因组DNA提取 | 第88页 |
5.2.3 基因克隆 | 第88-90页 |
5.2.4 基因基本特征研究 | 第90-95页 |
5.2.5 生物学功能研究 | 第95-107页 |
5.3 结果与分析 | 第107-122页 |
5.3.1 基因克隆 | 第107页 |
5.3.2 基因基本特征 | 第107-113页 |
5.3.3 生物学功能 | 第113-122页 |
5.4 小结与讨论 | 第122-123页 |
第6章 BcDXR基因的克隆与功能研究 | 第123-143页 |
6.1 材料与试剂 | 第125页 |
6.1.1 植物材料 | 第125页 |
6.1.2 菌株和质粒 | 第125页 |
6.1.3 试剂和药品 | 第125页 |
6.1.4 主要仪器设备 | 第125页 |
6.2 实验方法 | 第125-131页 |
6.2.1 试剂配制 | 第125页 |
6.2.2 植物总RNA提取、cDNA合成及基因组DNA提取 | 第125页 |
6.2.3 基因克隆 | 第125-127页 |
6.2.4 基因基本特征研究 | 第127-128页 |
6.2.5 生物学功能 | 第128-131页 |
6.3 结果与分析 | 第131-140页 |
6.3.1 基因克隆 | 第131页 |
6.3.2 基因基本特征 | 第131-136页 |
6.3.3 生物学功能 | 第136-140页 |
6.4 小结与讨论 | 第140-143页 |
总结与展望 | 第143-147页 |
参考文献 | 第147-157页 |
致谢 | 第157-159页 |
附录A | 第159-187页 |
附录B | 第187-191页 |
个人简历、在学期间发表的学术论文及研究成果 | 第191-192页 |