摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
第一章 文献综述 | 第12-20页 |
1.1 葡萄风信子概述 | 第12页 |
1.2 黄酮类物质研究进展 | 第12-16页 |
1.2.1 葡萄风信子黄酮类物质的化学成分 | 第13页 |
1.2.2 黄酮类物质的理化性质 | 第13页 |
1.2.3 环境因素对黄酮类化合物的调控 | 第13-14页 |
1.2.4 内源因子对黄酮类化合物的调控 | 第14页 |
1.2.5 黄酮类化合物的功能 | 第14-16页 |
1.3 黄酮醇合成酶(FLS)研究进展 | 第16-18页 |
1.4 转录组测序及其意义 | 第18页 |
1.4.1 转录组 | 第18页 |
1.4.2 转录组测序的意义 | 第18页 |
1.5 本研究目的意义及设计思路 | 第18-20页 |
1.5.1 本研究的目的意义 | 第18-19页 |
1.5.2 技术路线 | 第19-20页 |
第二章 材料与方法 | 第20-31页 |
2.1 实验材料 | 第20-21页 |
2.1.1 植物材料 | 第20-21页 |
2.1.2 菌株及质粒 | 第21页 |
2.2 酶及化学试剂 | 第21页 |
2.3 实验仪器 | 第21页 |
2.4 引物 | 第21-22页 |
2.5 方法 | 第22-31页 |
2.5.1 RNA的提取及检测 | 第22页 |
2.5.2 First-Strand cDNA合成 | 第22-23页 |
2.5.3 引物设计 | 第23页 |
2.5.4 葡萄风信子FLS基因的全长序列扩增 | 第23-24页 |
2.5.5 PCR扩增产物回收与连接 | 第24-25页 |
2.5.6 大肠杆菌的转化 | 第25页 |
2.5.7 菌液PCR鉴定 | 第25页 |
2.5.8 重组质粒的提取 | 第25-26页 |
2.5.9 重组质粒的酶切鉴定 | 第26页 |
2.5.10 生物信息学分析 | 第26-27页 |
2.5.11 亚细胞定位载体的构建 | 第27-28页 |
2.5.12 亚细胞定位 | 第28页 |
2.5.13 原核表达载体构建 | 第28-29页 |
2.5.14 pET-Ma FLS-a在大肠杆菌中的诱导表达 | 第29页 |
2.5.15 FLS基因的表达模式分析 | 第29-30页 |
2.5.16 黄酮醇含量测定 | 第30-31页 |
第三章 结果与分析 | 第31-47页 |
3.1 RNA的提取 | 第31-32页 |
3.2 葡萄风信子MaFLS-a、MaFLS-b基因全长的克隆与序列特征 | 第32-35页 |
3.3 葡萄风信子MaFLS-a、MaFLS-b编码的蛋白同源性及其进化分析 | 第35-38页 |
3.4 葡萄风信子FLS蛋白的生物信息学分析 | 第38-39页 |
3.4.1 葡萄风信子FLS蛋白亲水性/疏水性、跨膜结构域、信号肽以及磷酸化位点分析 | 第38页 |
3.4.2 葡萄风信子FLS保守结构域分析 | 第38页 |
3.4.3 葡萄风信子FLS二级结构和三级结构分析 | 第38-39页 |
3.5 葡萄风信子FLS基因的亚细胞定位 | 第39-41页 |
3.5.1 葡萄风信子FLS基因亚细胞定位表达载体的构建 | 第39-41页 |
3.5.2 葡萄风信子FLS基因亚细胞定位 | 第41页 |
3.6 MaFLS-a在大肠杆菌BL21(DE3)中的诱导表达 | 第41-43页 |
3.6.1 葡萄风信子原核表达载体pET-MaFLS-a的构建 | 第41-42页 |
3.6.2 pET-MaFLS-a在大肠杆菌中的诱导表达 | 第42-43页 |
3.7 葡萄风信子FLS的表达模式分析 | 第43-46页 |
3.7.1 葡萄风信子FLS基因在不同品种中的时空表达模式分析 | 第43-45页 |
3.7.2 葡萄风信子FLS基因对胁迫处理的应答 | 第45-46页 |
3.8 葡萄风信子不同器官黄酮醇含量测定分析 | 第46-47页 |
第四章 讨论 | 第47-49页 |
第五章 结论 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-54页 |
致谢 | 第54-55页 |
作者简介 | 第55页 |