| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 符号说明 | 第14-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-23页 |
| 1.1 结构生物学简介 | 第15-17页 |
| 1.1.1 X-射线晶体学 | 第15-16页 |
| 1.1.2 核磁共振波谱法 | 第16页 |
| 1.1.3 同步辐射光源 | 第16-17页 |
| 1.2 拟南芥硫苷代谢相关的蛋白ESP和NSP | 第17-18页 |
| 1.2.1 硫苷简介 | 第17-18页 |
| 1.2.2 芥子油苷-黑芥子酶系统 | 第18页 |
| 1.3 免疫信号水杨酸的一种潜在受体NPR4 | 第18-22页 |
| 1.3.1 SA信号传导途径 | 第19-20页 |
| 1.3.2 NPR起源 | 第20页 |
| 1.3.3 NPR4与NPR1的关系 | 第20-21页 |
| 1.3.4 SA和NPR1,NPR3,NPR4的关系 | 第21-22页 |
| 1.4 本文研究概况和目的 | 第22-23页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第23-47页 |
| 2.1 主要仪器 | 第23-24页 |
| 2.2 实验试剂 | 第24-27页 |
| 2.2.1 实验用菌种 | 第24页 |
| 2.2.2 实验用载体 | 第24页 |
| 2.2.3 实验用培养基的配制 | 第24-25页 |
| 2.2.4 常用储液的配制 | 第25页 |
| 2.2.5 蛋白纯化缓冲液 | 第25-26页 |
| 2.2.6 结晶条件筛选试剂盒 | 第26-27页 |
| 2.2.7 其他 | 第27页 |
| 2.3 实验方法 | 第27-47页 |
| 2.3.1 分子克隆 | 第27-33页 |
| 2.3.2 蛋白的表达 | 第33-35页 |
| 2.3.3 蛋白纯化 | 第35-42页 |
| 2.3.4 蛋白结晶 | 第42-45页 |
| 2.3.5 晶体相位信息的获得 | 第45页 |
| 2.3.6 晶体衍射数据的收集、处理和结构解析 | 第45-47页 |
| 第三章 ESP和NSP的结构生物学研究 | 第47-59页 |
| 3.1 ESP和NSP的克隆 | 第47页 |
| 3.2 ESP和NSP的表达与纯化 | 第47-50页 |
| 3.2.1 ESP的表达与纯化 | 第47-48页 |
| 3.2.2 NSP的表达与纯化 | 第48-50页 |
| 3.3 ESP蛋白晶体及结构解析 | 第50-57页 |
| 3.3.1 ESP晶体情况 | 第50-51页 |
| 3.3.2 ESP硒代蛋白纯化、结晶 | 第51页 |
| 3.3.3 ESP的结构解析 | 第51-53页 |
| 3.3.4 ESP的晶体结构分析 | 第53-57页 |
| 3.4 NSP蛋白晶体情况 | 第57页 |
| 3.5 本章小结 | 第57-59页 |
| 第四章 NPR4的表达纯化与结晶 | 第59-79页 |
| 4.1 NPR4的克隆 | 第59页 |
| 4.2 NPR4的表达与纯化 | 第59-73页 |
| 4.2.1 pET28a-NPR4(1-574aa)的表达纯化 | 第60-63页 |
| 4.2.2 pET28a-SUMO-NPR4(1-574aa)的表达纯化 | 第63-67页 |
| 4.2.3 pET22b-NPR4(362-574aa)的表达纯化 | 第67-70页 |
| 4.2.4 pET28a-NPR4(53-554aa)的表达纯化 | 第70-73页 |
| 4.2.5 其他 | 第73页 |
| 4.3 NPR4蛋白结晶 | 第73-78页 |
| 4.3.1 NPR4(1-574aa)晶体的发现 | 第73-75页 |
| 4.3.2 NPR4(1-574aa)晶体的优化 | 第75-76页 |
| 4.3.3 提高NPR4(1-574aa)晶体质量的方法 | 第76-78页 |
| 4.3.4 NPR4(362-574aa)结晶情况 | 第78页 |
| 4.4 本章小结 | 第78-79页 |
| 第五章 小结与讨论 | 第79-81页 |
| 5.1 结果 | 第79页 |
| 5.2 讨论 | 第79-81页 |
| 参考文献 | 第81-85页 |
| 附录 SDS-PAGE配方 | 第85-87页 |
| 致谢 | 第87-89页 |
| 研究成果及发表的学术论文 | 第89-91页 |
| 作者和导师简介 | 第91-92页 |
| 北京化工大学硕士研究生学位论文答辩委员会决议书 | 第92-93页 |
