| 中文摘要 | 第8-12页 |
| ABSTRACT | 第12-16页 |
| 本论文的主要创新点 | 第17-18页 |
| 第一章 绪论 | 第18-69页 |
| 1.1 生物质谱技术概述 | 第18-23页 |
| 1.1.1 质谱技术的发展 | 第18-19页 |
| 1.1.2 质谱仪的工作原理 | 第19-20页 |
| 1.1.3 质谱的分类 | 第20页 |
| 1.1.4 基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF MS) | 第20-23页 |
| 1.2 蛋白质组学研究概述 | 第23-35页 |
| 1.2.1 蛋白质与蛋白质组学 | 第23-26页 |
| 1.2.2 蛋白质组学研究 | 第26-30页 |
| 1.2.3 蛋白质翻译后修饰(Post-translational modification,PTM) | 第30-31页 |
| 1.2.4 基于生物质谱技术的蛋白质组学研究 | 第31-35页 |
| 1.3 磷酸化蛋白质/多肽组学研究概述 | 第35-45页 |
| 1.3.1 磷酸化蛋白/多肽的分离与富集技术策略 | 第36-43页 |
| 1.3.2 磷酸化蛋白质/多肽的识别与位点的鉴定 | 第43-44页 |
| 1.3.3 磷酸化蛋白质/多肽组学研究 | 第44-45页 |
| 1.4 磁性亲和探针材料及其在磷酸化蛋白/多肽富集中的应用 | 第45-53页 |
| 1.4.1 磁性金属氧化物(MOs)亲和探针对磷酸化肽的富集 | 第46-49页 |
| 1.4.2 磁性无机盐类亲和探针对磷酸化肽的富集 | 第49页 |
| 1.4.3 氨基功能化的磁性亲和探针对磷酸化肽的富集 | 第49-50页 |
| 1.4.4 固定金属离子的磁性亲和探针对磷酸化肽的富集 | 第50-52页 |
| 1.4.5 其它平台结合磁性亲和探针富集磷酸化肽 | 第52-53页 |
| 1.5 本论文的主要研究内容 | 第53-55页 |
| 参考文献 | 第55-69页 |
| 第一篇 基于磁性尖晶石类亲和探针的制备及生物富集应用 | 第69-165页 |
| 第二章 低廉的磁性Fe_3O_4纳米簇亲和探针应用于人唾液样中内源性磷酸化肽的富集 | 第69-104页 |
| 2.1 引言 | 第69-72页 |
| 2.2 实验部分 | 第72-76页 |
| 2.2.1 材料和试剂 | 第72页 |
| 2.2.2 Fe_3O_4 MNCs亲和探针的合成和表征 | 第72-74页 |
| 2.2.3 蛋白酶解 | 第74页 |
| 2.2.4 内源性磷酸化肽的选择性富集 | 第74-75页 |
| 2.2.5 磷酸化蛋白的选择性富集 | 第75页 |
| 2.2.6 MALDI-TOF MS和MS/MS分析 | 第75页 |
| 2.2.7 ATP考察富集回收率 | 第75-76页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第76-98页 |
| 2.3.1 Fe_3O_4 MNCs的制备及其形貌和结构表征 | 第76-79页 |
| 2.3.2 条件优化 | 第79-84页 |
| 2.3.3 标准磷酸化蛋白的胰酶解液中选择性富集磷酸化肽 | 第84-91页 |
| 2.3.4 选择性富集脱脂牛奶样中的磷酸化肽 | 第91-92页 |
| 2.3.5 富集人唾液样中的内源性磷酸化肽 | 第92-97页 |
| 2.3.6 蛋白混合样中富集磷酸化蛋白 | 第97-98页 |
| 2.3.7 与其它亲和探针作对照 | 第98页 |
| 2.4 结论 | 第98-100页 |
| 参考文献 | 第100-104页 |
| 第三章 磁性锰尖晶石(MnFe_2O_4):一种新型的亲和探针应用于磷酸化肽富集的研究 | 第104-132页 |
| 3.1 引言 | 第104-106页 |
| 3.2 实验部分 | 第106-109页 |
| 3.2.1 试剂和材料 | 第106页 |
| 3.2.2 MnFe_2O_4 MAMSs材料的合成 | 第106-107页 |
| 3.2.3 MnFe_2O_4 MAMSs材料的表征 | 第107-108页 |
| 3.2.4 胰蛋白酶解样的制备 | 第108页 |
| 3.2.5 MnFe_2O_4 MAMSs对pNPP的吸附 | 第108-109页 |
| 3.2.6 MnFe_2O_4 MAMSs从标准磷酸化蛋白和脱脂牛奶酶解液以及人体血清样中选择性富集磷酸化肽 | 第109页 |
| 3.2.7 MALDI-TOFMS分析 | 第109页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第109-128页 |
| 3.3.1 MnFe_2O_4 MMSs的元素组成及其形貌和结构表征 | 第109-114页 |
| 3.3.2 MnFe_2O_4 MMSs的可能形成机理 | 第114-115页 |
| 3.3.3 从β-casein胰蛋白酶酶解液中高特异性选择富集磷酸化肽 | 第115-124页 |
| 3.3.4 从脱脂牛奶胰蛋白酶酶解液和人体血清中特异性选择富集磷酸化肽 | 第124-128页 |
| 3.4 结论 | 第128-129页 |
| 参考文献 | 第129-132页 |
| 第四章 新型多功能磁性铜锰尖晶石(CuFeMnO_4)亲和探针分别对低丰度肽和磷酸化肽的富集研究 | 第132-165页 |
| 4.1 引言 | 第132-133页 |
| 4.2 实验部分 | 第133-137页 |
| 4.2.1 材料和试剂 | 第133-134页 |
| 4.2.2 CuFeMnO_4 NSAP的合成 | 第134页 |
| 4.2.3 制备蛋白质的胰蛋白酶酶解液 | 第134-135页 |
| 4.2.4 从蛋白质的胰蛋白酶酶解液中分别富集磷酸化肽/低丰度肽 | 第135-136页 |
| 4.2.5 MALDI-TOF质谱分析条件 | 第136-137页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第137-160页 |
| 4.3.1 CuFeMnO_4NSAP的制备和性质表征 | 第137-141页 |
| 4.3.2 形成CuFeMnO_4 NSAP的可能机制 | 第141-143页 |
| 4.3.3 对来自不同样品中低丰度肽的富集 | 第143-149页 |
| 4.3.4 对来自不同样品中磷酸化肽的高度特异性富集 | 第149-160页 |
| 4.4 结论 | 第160页 |
| 参考文献 | 第160-165页 |
| 第二篇 基于新型稀土基磁性亲和探针的设计及应用 | 第165-219页 |
| 第五章 新型核壳结构Fe_3O_4@LuPO_4磁球选择性富集及鉴定磷酸化肽段 | 第165-193页 |
| 5.1 引言 | 第165-167页 |
| 5.2 实验部分 | 第167-171页 |
| 5.2.1 材料和试剂 | 第167页 |
| 5.2.2 制备Fe_3O_4@LuPO_4微球 | 第167-168页 |
| 5.2.3 制备蛋白质的胰蛋白酶酶解液 | 第168-169页 |
| 5.2.4 磷酸化肽的富集 | 第169页 |
| 5.2.5 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)分析 | 第169-170页 |
| 5.2.6 数据库搜索和数据分析 | 第170-171页 |
| 5.2.7 表征 | 第171页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第171-189页 |
| 5.3.1 Fe_3O_4@LuPO_4微球形态和结构的表征 | 第171-176页 |
| 5.3.2 Fe_3O_4@LuPO_4微球的磁性 | 第176-177页 |
| 5.3.3 Fe_3O_4@LuPO_4微球选择性富集,分离和鉴定磷酸化肽 | 第177-189页 |
| 5.4 结论 | 第189页 |
| 参考文献 | 第189-193页 |
| 第六章 两种新型的Ce基亲和探针纳米复合材料应用组合策略选择性富集单/多磷酸化肽的质谱分析 | 第193-219页 |
| 6.1 引言 | 第193-195页 |
| 6.2 实验部分 | 第195-198页 |
| 6.2.1 材料和试剂 | 第195页 |
| 6.2.2 样品制备 | 第195-196页 |
| 6.2.3 从混合标准蛋白(α-/β-酪蛋白)和脱脂牛奶样胰蛋白酶酶解液及人血清中选择性富集磷酸化肽 | 第196-197页 |
| 6.2.4 MALDI-TOF MS分析 | 第197页 |
| 6.2.5 材料的表征 | 第197-198页 |
| 6.3 结果与讨论 | 第198-215页 |
| 6.3.1 两种Ce基亲和探针的合成及形貌、结构和性质表征 | 第198-202页 |
| 6.3.2 材料的可能形成机理 | 第202页 |
| 6.3.3 从混合标准磷酸化蛋白中选择性富集磷酸化肽 | 第202-215页 |
| 6.4 结论 | 第215页 |
| 参考文献 | 第215-219页 |
| 总结与展望 | 第219-222页 |
| 附录 | 第222-224页 |
| 致谢 | 第224-227页 |
